Scientific journal
Fundamental research
ISSN 1812-7339
"Перечень" ВАК
ИФ РИНЦ = 1,674

SANITARY-INDICATIVE MICROBIOTA CAVE SYSTEM SNEZHNAYA – ILLUZIYA – MEZHENNAYA

Mazina S.E. 1 Bazarova E.P. 2 Kontsevova A.A. 3
1 Lomonosov Moscow State University
2 Institute of the Earth Crust
3 Federal public budgetary scientific institution is the All-russian research institute of the Veterinary sanitation hygiene and ecology
The analysis of sanitary indicative microbiota Snow cave system. During the four years surveyed microbial contamination of the air of the cave. The correlation between the number of microorganisms and anthropogenic load. The cave runs a large underground river, which empties into several tributaries. There are trays filled with drippings from the vaults. Evaluation of the microbiota in the water held in the cave during the drought period. Investigation of the water flows showed that the greatest number of microorganisms fixed in the tub while the water flow have low content of microorganisms. Conducted study of microbial contamination of rock and mineral deposits of the cave. When sampling avoid disturbing areas. The grounds of the cave shows increasing numbers of microbiota underground near tourist sites and in areas frequented by people.
microorganisms
karst
cave
anthropogenic load
microbiota
1. Arinushkina E.V. Rukovodstvo po himicheskomu analizu pochv. M., 1970. 486 р.
2. Bazarova E.P., Mazina S.E., Hodyreva E.V. Mineralogicheskie issledovaniya v peshchernoj sisteme Snezhnaya-Mezhennogo-Illyuziya (Zapadnyj Kavkaz, Bzybskij hrebet): predvaritelnye rezultaty i napravleniya dalnejshih rabot // Speleologiya i karstologiya. 2013. no. 10. рр. 76–85.
3. Vahrushev B.A., Dublyanskij V.N., Amelichev G.N. Karst Bzybskogo hrebta. Zapadnyj Kavkaz. M.: RUDN, 2001. 165 р.
4. Giginejshvili G.N. Karstovye vody Bolshogo Kavkaza i osnovnye problemy gidrogeologii karsta. Tbilisi: Mecniereba, 1979. 222 р.
5. Gusev A.S., Mazina S.E. Dvizhenie karstovyh vod sistemy Snezhnaya (Zapadnyj Kavkaz): rezultaty indikatornogo opyta 2010 goda // Speleologiya i spelestologiya: razvitie i vzaimodejstvie nauk, Sbornik materialov Mezhdunarodnoj nauchno-prakticheskoj konferencii, Naberezhnye CHelny: NGPI, 2010. рр. 121–124.
6. Kompleksnye karstologo-speleologicheskie issledovaniya i ohrana geologicheskoj sredy Zapadnogo Kavkaza. (Pod red. V.N. Dublyanskogo, V.I. Klimenko, B.A. Vahrusheva, V.D. Rezvana). Sochi, 1987. 124 р.
7. Mavlyudov B.R. Usikov D.A. Predvaritelnyj otchet ob issledovaniyah peshchery «Snezhnaya» Zapadno-Kavkazskim karstovo-glyaciologicheskim otryadom otdela glyaciologii Instituta geografii AN SSSR (iyun-iyul, 1979 g.) Nauchnyj rukovoditel: chl.-korr. AN SSSR V.M. Kotlyakov: http//www.snowcave.ru (data obrashcheniya: 10.06.2015).
8. Mavlyudov B.R. O geologii peshchernoj sistemy Snezhnaya-Mezhennogo-Illyuziya (Zapadnyj Kavkaz) // Kompleksnoe ispolzovanie i ohrana podzemnyh prostranstv: Mezhdunarodnaya nauchno-prakticheskaya konferenciya, posvyashchennaya 100-letnemu yubileyu nauchnoj i turistsko-ehkskursionnoj deyatelnosti v Kungurskoj Ledyanoj peshchere i 100-letiyu so dnya rozhdeniya V.S. Lukina /GI UrO RAN; pod obshch. red. O. Kadebskoj, V. Andrejchuka. Perm, 2014. рр. 30–39.
9. Mazina S.E. Predvaritelnye dannye po issledovaniyu mikroorganizmov karstovoj peshchernoj sistemy Snezhnaya-Mezhennogo-Illyuziya (Abhaziya) // Mineralogiya tekhnogeneza-2009 pod red. S.S. Potapova. Miass: IMin UrO RAN, 2009. рр. 93–107.
10. Mazina S.E. Predvaritelnye dannye issledovanij sostava mikroflory privhodovyh uchastkov peshcher Arabiki: Kujbyshevskaya, Gnomov i Krubera-Voronej // Speleologiya Samarskoj oblasti (vypusk 6), 2011. рр. 69–77.
11. Maksimovich G. A. Osnovy karstovedeniya. Perm, 1963. 480 р.
12. Praktikum po mikrobiologii. Pod red. Netrusova A.I. 2005, 602 р.
13. Nemchenko T.A. Snezhnaya History and Exploration // National Speleological Society News, 1993. Vol. 51. no. 10. рр. 268–278.
14. Northup D.E., Lavoie K.H. Geomicrobiology of Caves: A Review Geomicrobiology Journal. 2001. 18: рр. 199–222.
15. Vesper D.J, Loop C.M, White W.B. Contaminant transport in karst aquifers. // Theoretical and Applied Karstology. 2001. no. 13–14. рр. 101–111.

Карстовые ландшафты формируют комплекс уникальных экосистем, наименее изученными из которых остаются подземные. Их отличительной особенностью являются специфические условия среды. Породы, в которых заложены полости, и отложения, характерные для подземных полостей, определяют особенности биотопа. Для карстовых полостей характерна повышенная влажность воздуха, наличие водных потоков различной мощности, повышенная минерализация воды, стабильные микроклиматические параметры [3, 11]. Отсутствие солнечного света накладывает ограничение на поступление органического вещества в подземные экосистемы. Оно либо вносится потоками, проникающими под землю, либо продуцируется обитающими в карстовых полостях организмами, видовой состав которых специфичен для каждой пещеры [14]. Карстовые горные массивы являются важной частью биосферы, в частности способствуют сохранению влаги и обеспечивают питание рек и ручьев. На карстовых территориях реализуются процессы самоочистки природных вод, эффективность которых зависит от состояния карста [15].

Увеличение в обществе интереса к экстремальным видам спорта, в том числе спелеотуризму, и совершенствование технических средств значительно увеличили рекреационную нагрузку на карстовые территории. На сегодняшний день для человека стали доступны карстовые полости большой протяженности и глубиной до 2 км. Посещение таких систем предполагает длительное нахождение человека в подземном пространстве, создание подземных туристических стоянок и, как следствие, загрязнение полостей. В ряде популярных районов такое загрязнение перестает быть локальным и принимает угрожающие масштабы. В частности, еще в 70–80 годах ХХ века отмечено скопление мусора в ряде пещер Абхазии, наиболее загрязненной стала пещерная система Снежная, в пещере накопились тонны бытового мусора, в том числе химически опасного [13]. Органические загрязнения в пещерах не поддаются учету.

Масштабность загрязнений, а также слабая изученность механизмов самоочистки пещерных систем и трансформации в них органического вещества, попадающего с поверхности, заставляет проводить исследования в этом направлении. Целью данной работы был количественный учет санитарно-показательных групп микроорганизмов в различных биотопах пещерной системы Снежная.

Материалы и методы исследования

Пещерная система Снежная (открыта в 1971 году) расположена в южной части Хипстинского высокогорного карстового массива (Гудаутский район, Абхазия) [3]. Согласно последним данным пещерная система сформирована в южном крыле крупной антиклинальной складки в известняках, доломитизированных известняках и доломитах [8]. Верхняя часть пещерной системы заложена в массивных и толстослоистых известняках и доломитах баррема, а нижняя часть пещерной системы почти полностью приурочена к пласту намывных брекчий нижнего неокома. Минералогические исследования пещеры фрагментарны, последняя обобщающая работа – Базаровой с соавторами [2].

Пещера сообщается с поверхностью несколькими доступными для человека входами Снежная (высота входа 1971 м над у.м.), пещера имени С. Меженного (высота входа 2015 м над у.м.) и Иллюзия (высота входа 2389 м над у.м.), причем последний на протяжении нескольких десятков метров был значительно расширен инженерными методами. Каждый вход открывает независимые вертикальные ветки пещеры, которые соединяются в общую систему на горизонтальных участках. Глубина вертикальных частей пещер составляет 670 м (Иллюзия), 500 м (Меженного) и 550 м (Снежная). Пещера продолжается до глубины 1753 метра с чередованием горизонтальных участков каньонообразных галерей, меандров, колодцев и глыбовых завалов. Основной вход пещеры Снежная представляет собой вертикальный колодец (размеры на поверхности 12×25 метров), заполненный снежно-ледовыми массами. На глубине 185–200 метров вертикальный ход переходит в Большой зал, где располагается снежно-ледовый конус (по некоторым предположениям ледник), объем которого оценивается в 30–40 тысяч м3 [7].

Пещера в горизонтальной части имеет подземную реку с меженным расходом 200 л/с. Неоднократными экспериментами по трассированию вод пещерной системы показано, что она питает реки Бзыбь, Хипста, Дохурта, источник Мчишта. Мчишта является выходом крупной подземной реки из карстовой пещерной системы Мчишта – Акшаша [4, 5, 6]. На источнике находится форелевое хозяйство.

Площадь водосбора входного колодца предположительно составляет 0,16 км2. Поступление воды в полость происходит через крупные естественные входы, по трещинам и разломам или посредством фильтрации и просачивания через породу. Пещера паводкоопасна, даже незначительные осадки на поверхности приводят к быстрому увеличению объемов воды в подземной реке и ручьях и появлению дополнительных водных потоков в местах водокапов и боковых ответвлений пещеры. Вода в пещеру поступает за счет круговорота осадочных вод, значительную роль в котором принимают талые воды снежно-ледовых отложений [3].

Исследование на участке Иллюзия – Зал Победы проводили в августе 2008 года, январе 2010 и 2011 года; на участке Снежная – Зал Победы в августе 2009 и 2010 года; на участке ниже зала Победы в январе 2010 и 2011 года. Всего отобрано более 260 образцов, глубина мест отбора указана от верхнего входа (Иллюзия) в пещерную систему по представленной топографической карте (рисунок). На участке от входа Снежная до дна дополнительно приведена глубина от входа Снежная по работе Мавлюдова [7]. Ошибка привязки точки по глубине может достигать ±50 м, ошибка увеличивается с глубиной. Проанализирована микробная контаминация подземных стоянок (лагерей) спелеотуристов на различных глубинах. Время нахождения туристов на стоянках в момент исследования составляло трое суток. Стоянки на глубине 670 и 800 м не использовались несколько лет до момента исследования. Участок от входа Снежная до зала Победы был недоступен для посещений с зимы 2005–2006 года, поскольку вследствие схода лавины в районе естественного входа доступ в пещеру заблокировали снежно-ледовые массы.

Определяли общее микробное число (ОМЧ) в воздухе, воде и грунте по стандартной методике [12]. Количество микроорганизмов в воздухе определяли методом седиментации с экспозицией 30 минут, расчет количества КОЕ в единице объема воздуха производили по формуле Омелянского [12]. Образцы воды отбирали на протяжении водного потока, их помещали в стерильные флаконы и хранили при температуре 5–9 °С не более 8 часов. Численность микроорганизмов учитывали, используя среды МПА и Чапека – Докса, и на среде Эндо при 37 °С. Бактерии группы кишечной палочки определяли методом мембранных фильтров, из лактозоположительных колоний делали окраску по Граму и ставили оксидазный тест. Бактерии Clostridium perfingens определяли на среде Вильсона – Блера при 43 °С через 14–20 дней после отбора проб [12].

Анализировали глинистые отложения пещеры. Образцы грунтов отбирали в районе подземных базовых лагерей туристов (ПБЛ), участков удаленных от посещения (труднодоступные гроты), в сухих галереях и вдоль подземной реки. Грунт отбирали в стерильные емкости, которые хранили при 4–6 °С не более 20 дней. Отбор образцов в каждой точке осуществляли с шагом в 10 см поперек хода пещеры на однородном грунте, исключая участки с явным антропогенным воздействием (уплотненный грунт, тропы, замусоренные участки и пр.). Для анализа использовали усредненную пробу с каждого участка. Кислотность грунта определяли в водной вытяжке [1]. Проводили анализ общего микробного числа, бактерий группы кишечной палочки, Clostridium perfingens и микромицетов. Численность выражали в колониеобразующих единицах (КОЕ) на вес сухого грунта [12]. Образцы хранили и выращивали в темноте.

pic_27.tif

Топографическая схема (разрез-развертка) пещерной системы Снежная с указанием точек отбора проб

Исследование микробиоты пещер вызывает определенные сложности, поскольку пещеры часто расположены в труднодоступных местах и чаще всего транспортировка образцов до лаборатории занимает время, которое не позволяет обеспечить достоверность получаемых данных. Сохранить образцы, организовав необходимые условия для их транспортировки, не всегда возможно. В случае с пещерами, имеющими большую глубину и протяженность, эта задача становится еще более сложной. Спуск на дно пещеры Снежной занимает около 8 дней. Единственным способом получить адекватные результаты является организация микробиологических исследований непосредственно в пещере.

В данном исследовании использовали стерильные среды, разлитые в пластиковые чашки, которые закладывали в термоконтейнеры, где поддерживали необходимую температуру. Образцы грунтов с целью количественного анализа микроорганизмов изучали в лаборатории. Поскольку в пещере влажность близка к 100 %, высушить образцы грунтов не представлялось возможным, это делали на поверхности.

В местах отбора образцов проводили измерение температуры и влажности электронными приборами Элин Комплекс iBDLR-L-U (термохрон) с ошибкой 0,1 °С и 1 %. Измерение рН проводили pH-метрами PH200 (погрешность ±0,02 pH) и PH-013 (погрешность ±0,01 pH).

Результаты исследования и их обсуждение

Микроклиматические параметры полости стабильны, температура воздуха колебалась только в привходовой зоне пещеры, с глубины 100 метров она становилась практически постоянной и постепенно увеличивалась с 2,8 до 6,5 °С. В Большом зале, где расположен Ледовый конус, температура была 0 °С. В пещере отмечена высокая влажность воздуха 96–100 %. Температура воды на разных участках пещеры изменялась в пределах 3,8–4,1 °С, рН воды была от 7,86 до 8,32 рН грунтов. Более подробно микроклиматические параметры пещеры и характеристика грунтов даны в работах [9, 2].

В глинистых отложениях пещеры численность всех групп микроорганизмов была повышенной вблизи постоянно используемых туристических стоянок и на часто посещаемых участках пещеры. Бактерии группы кишечной палочки отсутствовали на редко посещаемых участках и неиспользуемых стоянках, но в последнем случае выявлялись бактерии Clostridium perfringens. Наиболее загрязненными были стоянки в зале Победы, а наименее – лагеря на участке Иллюзии на глубине 320, неиспользуемые стоянки в Иллюзии на 670 метрах и ПБЛ в зале Юпитера (табл. 1). В образцах глинистых отложений непосещаемых участков изредка встречался светлоокрашенный мицелий с низким обилием, число КОЕ микромицетов не превышало 200 КОЕ/г, в паводковых глинах микромицетов не обнаружено. В образцах субстратов туристических лагерей микромицеты были представлены дискретно.

Основной водный поток пещеры в период межени содержит небольшое число микроорганизмов. После водопадов и каскадных уступов содержание микроорганизмов в воде снижается, что можно объяснить разрушением клеток на участках со сложным рельефом. Такое явление описано и в других пещерах [10]. Воды боковых притоков и водокапы также относятся к чистым по показателям содержания микроорганизмов. Наибольшее число микроорганизмов отмечено в ванночках вблизи стоянок туристов, причем в процессе использования ПБЛ численность микроорганизмов возрастала (табл. 2).

Таблица 1

Численность микроорганизмов в грунтах пещеры*

№ п/п

Место отбора

Глубина, м

ОМЧ

Микро-мицеты

Clostridium perfringens

БГКП

в 1 г

Иллюзия

1

Зал, ПБЛ

110

4∙106

2∙104

4

0-14

5

Иллюзия, ПБЛ

320

2∙107

4∙104

40

6

7

Ядерный каскад

500

8∙104

2000

0

0

8

Иллюзия, ПБЛ

670

4∙106

2∙104

28

0

10

Иллюзия, ПБЛ

700

2∙109

2∙108

65

26

11

Берег ручья

720

4∙108

600

4

0-12

12

Галерея оранжевых грез

770

3∙107

3∙104

2

14

Меженного

13

Соединение Иллюзия - Меженного, ПБЛ

800

5∙106

300

7

0

14

Берег реки

830

5∙106

200

6

4

15

Сахалинская галерея, ПБЛ

900

2∙108

4∙108

36

12

16

Берег реки

960

4∙107

4000

-

8

17

ПБЛ в Зале Юпитера

940

2∙106

3∙104

14

0

Снежная

18

Соединение пещер Меженного - Снежная

950 (1368)

4∙105

400

2

4

19

Берег реки

1050 (1468)

4∙105

200

-

0

20

Цветочный ход

550 (968)

5∙106

110

0

0

21

Зал Надежда, перед Цветочным ходом

550 (968)

3∙106

4000

0

0

22

Зал Надежда, соединение с залом Победы

550 (968)

6∙107

6∙104

6

0

23

Большой зал

185 (603)

3∙105

12

0

0-20

24

Университетский зал

447 (865)

3∙106-3∙108

3∙104-5∙104

30-400

900

0-25

2-80

28

Четвертый завал

650 (1068)

6∙106

2000

6

0

30

Первый ПБЛ, подъем с реки

675 (1093)

5∙106

3∙104

10

0

32

Зал Победы, ПБЛ

630 (1048)

4∙108

3∙108

80-400

40

35

Зал Дольмена

732 (1150)

4∙106-2∙108

2∙104

20

0

39

Зал Ожидания

800 (1218)

9∙107

2107

70

25

40

Гремящий зал

835 (1253)

4∙107

1106

4-3504

0-16

43

Глиняный завал

965 (1383)

8∙107

9105

60

20

45

Зал ИГАН, ПБЛ

1125 (1543)

4∙107

2105

40

18

48

Зал Икс

1275 (1693)

6∙106

4105

800

40

Примечание. *В таблицах указаны средние значения, в случае большой разницы между значениями в различные даты исследования указаны min и max значения).

Таблица 2

Численность микроорганизмов в водах пещеры

№ п/п

Место отбора

Глубина, м

ОМЧ

Микромицеты

БГКП

в 100 мл

Иллюзия

2

Водокап в зале, ПБЛ

113

1500

30

8

3

Ванночка с водокапом

130

1800-2∙105

20

6

4

Ручей

260

400

10

0

6

Основной поток

440

3200

0

14

7

Ядерный каскад

500

1200

20

0

9

Ручей Яуза

680

780

42

0

10

Иллюзия, ванночка с водокапом, ПБЛ

700

1000-15∙104

58

2

11

Ручей

720

1100

12

0

12

Галерея оранжевых грез

770

600

60

0

Меженного

14

Река

830

600

30

0

15

Сахалинская галерея, ПБЛ

900

30-4000

7

0

16

Река

940

1000

16

0

Снежная

18

Соединение пещер Меженного - Снежная

950 (1368)

800

30

3

19

Река

1050 (1468)

600

40

0

24

Университетский зал, водокап

447 (865)

400-15000

18-60

2-6

25

Ручей перед первым завалом

520 (938)

1200

6-65

0-20

26

Впадение Водопадного ручья в основную реку

650 (1068)

860-8000

25

14

27

Река перед четвертым завалом

670 (1088)

770

16

0

29

Пятый завал у реки

685 (1103)

650

14

0

32

Зал Победы, водокап

630 (1048)

300

60

0

33

Река, спуск из зала Победы

710 (1128)

12000

400

6

34

Река перед залом Дольмена

777 (1195)

200

13

0

36

Река, спуск из зала Дольмена

790 (1208)

220

20

0

37

Ручей Струйка

792 (1210)

120

4

0

38

Река перед Седьмым завалом

810 (1228)

180

16

0

40

Гремящий зал

835 (1253)

240

18

0

42

Река перед глиняным завалом

950 (1368)

9000

36

12

44

Верх водопада Озерный

1070 (1488)

200

-

-

46

Река у зала ИГАН

1130 (1548)

140

19

0

47

Низ водопада Олимпийский

1255 (1673)

130

8

0

По результатам исследований воздуха показана зависимость содержания КОЕ бактерий и микромицетов от присутствия человека. Отмечено повышение количества микроорганизмов в воздухе в районе туристических лагерей при нахождении в них людей (табл. 3). За три дня пребывания на стоянках туристов ОМЧ и количество микромицетов могло увеличиться в несколько десятков раз (Иллюзия 700, Сахалинская галерея, зал Победы). Все туристические стоянки располагались в залах, в верхних участках пещеры, где ток воздуха замедлен, что способствовало накоплению КОЕ микроорганизмов. Резкое повышение содержания микроорганизмов в воздухе на стоянках может быть связано как с непосредственным попаданием микроорганизмов из организма человека в воздушную среду пещеры, так и с выделением зачатков микроорганизмов из субстратов, вследствие интенсификации воздушных потоков и поднятия частиц грунта и микроорганизмов в воздух при движении людей.

Проведенные исследования показали зависимость количества бактерий и микромицетов от величины антропогенной нагрузки. Отмечено преимущественное развитие микромицетов на загрязненных органическим веществом субстратах. Число микроорганизмов в водном потоке неодинаково на разных участках водотока, но роль воды в переносе микроорганизмов остается неопределенной. Возможно, что водный поток является переносчиком микрофлоры, но она разрушается на участках со сложным рельефом. Морфология полости, характеризующаяся обилием узких участков в завалах, чередующихся спусков и подъемов, исключает перенос микроорганизмов воздушными потоками. Это подтверждается низким количеством микроорганизмов в воздухе и в грунтах на непосещаемых участках пещеры.

Таблица 3

Численность микроорганизмов в воздухе пещеры

№ п/п

Место отбора

Глубина, м

ОМЧ

Микромицеты

в 1 м3 (1–3 день)

Иллюзия

1

Зал, ПБЛ

110

50–200

2000

5

Иллюзия, ПБЛ

320

120–12000

300–9000

7

Ядерный каскад

500

150

200

8

Иллюзия, ПБЛ

670

300

50–500

9

Ручей Яуза

680

270

200

10

Иллюзия, ПБЛ

700

800–16000

200–7000

12

Галерея оранжевых грез

770

210

40

Меженного

13

Соединение Иллюзия – Меженного, ПБЛ

800

160

400

14

Река

830

200

30

15

Сахалинская галерея, ПБЛ

900

300–11000

800–8200

16

Река

940

500

200

17

ПБЛ в Зале Юпитера

990

1500

500

Снежная

18

Соединение Меженного – Снежная

950 (1368)

180

60

19

Река

1050 (1468)

240

30

20

Цветочный ход

550 (968)

380

330

21

Зал Надежда, перед Цветочным ходом

550 (968)

600

1000

22

Зал Надежда, перед залом Победы

550 (968)

4000

1500

23

Большой зал

185 (603)

50

10

24

Университетский зал

447 (865)

20–3000

5019–7980

26

Впадение Водопадного ручья в основную реку

650 (1068)

250

20

28

Четвертый завал

650 (1068)

260

400

29

Пятый завал у реки

685 (1103)

210

315

30

Первый ПБЛ, подъем с реки

675 (1093)

480

19900

31

В завале, выше ПБЛ

670 (1088)

400

18480

32

Зал Победы

630 (1048)

4000–18000

1000–14000

33

Река, спуск после зала Победы

710 (1128)

600

800

35

Зал Дольмена

732 (1150)

420–2800

60

36

Река, спуск из зала Дольмена

790 (1208)

210

20

38

Река у подъема на Седьмой завал

810 (1228)

200

20

39

Зал Ожидания

800 (1218)

320–8000

300-800

40

Гремящий зал

835 (1253)

800–6000

200

41

Гремящий зал, спуск к воде

870 (1288)

980

200

42

Река перед глиняным завалом

950 (1368)

240

40

43

Глиняный завал

965 (1383)

600

600

44

Верх водопада Озерный

1070 (1488)

200

60

45

Зал ИГАН

1125 (1543)

500–1800

400

46

Река у зала ИГАН

1130 (1548)

370

300

47

Низ водопада Олимпийский

1255 (1673)

220

40

48

Зал Икс

1275 (1693)

400

800

Рецензенты:

Удавлиев Д.И., д.б.н., профессор кафедры ветеринарно-санитарной экспертизы и биологической безопасности, ФГБОУ ВПО «Московский государственный университет пищевых производств», г. Москва;

Светличкин В.В., д.б.н., профессор, заведующий «Отдел технического регулирования, стандартизации и сертификации», ФГБНУ «ВНИИ ветеринарной санитарии», гигиены и экологии», г. Москва.