Одной из наиболее распространенных форм шизофрении является параноидная форма, показатель впервые зарегистрированных больных по России, по данным А.А. Чуркина (2006), составляет 361,91 на 100 000 населения. Многочисленные клинико-генетические исследования шизофрении свидетельствуют о наследственных основах заболевания, уточняя, что риск заболевания шизофренией для родственников больных выше, чем в популяции. Близнецовые методы исследования выявили высокую конкордантность по шизофрении у монозиготных близнецов, которая составила 50 %. Изучен ряд генов-кандидатов, ответственных за развитие шизофренического процесса [3]. В их числе гены допаминового рецептора D2 [1], рецептора серотонина 5HTR2A [2] и мозгового нейротрофического фактора (BDNF) [7, 8]. Изучение биологических основ шизофрении в контексте молекулярно-генетических механизмов остаётся одним из перспективных научных направлений психиатрии, что определяет актуальность данного исследования в теоретическом и практическом плане.
Целью настоящей работы явилось определение частоты встречаемости аллелей и генотипов нескольких генов, имеющих отношение к функционированию нейрохимических систем мозга, у больных параноидной шизофренией, проживающих в Саратовской области.
Материалы и методы исследования
В соответствии с поставленной целью обследовано 207 больных параноидной шизофренией (97 женщин и 110 мужчин; возрастной диапазон – от 18 до 56 лет) с различной продолжительностью заболевания, поступивших для лечения в психиатрические стационары г. Саратова и Саратовской области по поводу обострения шизофренического процесса. Основными критериями отбора являлись: верифицированный стационарным обследованием диагноз параноидной шизофрении «F20.0» (в соответствии с диагностическими критериями МКБ-10), соматическое благополучие. Группу контроля составили 96 соматически и психически здоровых лиц без семейной отягощенности по шизофрении (53 женщины и 43 мужчины; возрастной диапазон – от 21 до 63 лет) из числа жителей Саратова и Саратовской области.
Все больные и лица контрольной группы дали информированное согласие на участие в исследовании.
Материалом исследования являлась периферическая венозная кровь пациентов, взятая из кубитальной вены. Материалы для генотипирования отправлялись в лабораторию клинической генетики НЦПЗ РАМН (зав. лабораторией – д.б.н. В.Е. Голимбет), где из образцов крови выделяли ДНК с помощью фенол-хлороформного метода (Grimberg, 1989). Для анализа ассоциации между параноидной шизофренией и геном использовали следующие маркеры: полиморфизм Val66Met (аллели Val и Met) – для гена BDNF; полиморфизм Т102С (аллели T и C) для гена 5-HTR2A и полиморфизм c939t (аллели С и T) для гена дофаминового рецептора D2 (DRD2). Генотипирование проводили путем амплификации ДНК в полимеразной цепной реакции с использованием термоциклера Терцик (ДНК-технологии). Для сопоставления двух выборок по частоте встречаемости интересующего исследователя признака использовали статистический критерий углового преобразования Фишера (φ*эмп).
Результаты исследования и их обсуждение
В результате анализа аллельных частот в изученных полиморфных участках у больных параноидной шизофренией по сравнению с психически здоровыми людьми существенных различий встречаемости аллелей не отмечалось (табл. 1).
Таблица 1
Частота аллелей в изученных полиморфных участках больных параноидной шизофренией (n = 207) и в контрольной группе здоровых лиц (n = 96)
|
Ген |
BDNF |
DRD2 |
5-HTR2A |
|||
|
Аллели |
Val |
Met |
T |
C |
C |
T |
|
Больные |
360 (87 %) |
54 (13 %) |
125 (30 %) |
289 (70 %) |
263 (63,5 %) |
151 (36,5 %) |
|
Здоровые |
164 (85 %) |
28 (15 %) |
67 (35 %) |
125 (65 %) |
124 (64,5 %) |
68 (35,5 %) |
Распределение генотипов не отличалось от ожидаемого в соответствии с законом Харди‒Вейнберга. Не было также найдено ассоциации между каким-либо из изученных генетических вариантов и параноидной шизофренией (табл. 2). Отсутствие связи не всегда указывает на то, что ген не ассоциирован с психическим заболеванием. Ранее проведённые молекулярно-генетические исследования шизофрении показывают, что каждый из генов в целом оказывает небольшое влияние на её развитие. Это влияние трудно выявить, учитывая клиническую гетерогенность шизофрении, которая может в значительной степени зависеть от отдельных клинических особенностей исследуемой группы больных.
Таблица 2
Частота генотипов в изученных полиморфных участках больных параноидной шизофренией (n = 207) и в контрольной группе здоровых лиц (n = 96)
|
Ген |
BDNF |
DRD2 |
5-HTR2A |
||||||
|
Генотип |
ValVal |
ValMet |
MetMet |
СС |
СТ |
ТТ |
ТТ |
ТС |
СС |
|
Больные |
75,4 (156) |
23,2 (48) |
1,4 (3) |
49,3 (102) |
40,6 (84) |
10,1 (21) |
17,0 (35) |
40,5 (84) |
42,5 (88) |
|
Здоровые |
70,8 (68) |
29,2 (28) |
0 (0) |
42,7 (41) |
44,8 (43) |
12,5 (12) |
9,4 (9) |
52,1 (50) |
38,5 (37) |
Примечание. Приведена частота генотипа; в скобках – число носителей.
Некоторые исследователи указывают на то, что связь соответствующих генов с шизофренией и с некоторыми ее патогенетическими параметрами (нейрофизиологическими, нейропсихологическими или морфометрическими) обнаруживается только в мужских выборках [4, 6, 9]. Поэтому на следующем этапе нашего исследования была предпринята попытка выявить связь генетических вариантов, предрасполагающих к параноидной шизофрении, в однородных по полу выборках больных и здоровых лиц.
В табл. 3 представлены результаты анализа аллельных частот в изученных полиморфных участках у страдающих параноидной шизофренией женщин по сравнению с психически здоровыми женщинами. Каких-либо значимых различий встречаемости аллелей не отмечалось.
Таблица 3
Частота аллелей в изученных полиморфных участках страдающих параноидной шизофренией женщин (n = 97) и в контрольной группе здоровых женщин (n = 53)
|
Ген |
BDNF |
DRD2 |
5-HTR2A |
|||
|
Аллели |
Val |
Met |
T |
C |
C |
T |
|
Больные женщины |
171 (88,1 %) |
23 (11,9 %) |
60 (30,9 %) |
134 (69,1 %) |
119 (61,3 %) |
75 (38,7 %) |
|
Здоровые женщины |
93 (87,7 %) |
13 (12,3 %) |
40 (37,7 %) |
66 (62,3 %) |
68 (64,2 %) |
38 (35,8 %) |
При сопоставлении женских выборок больных параноидной шизофренией и здоровых значимых ассоциаций между изученными генетическими вариантами и параноидной шизофренией найдено не было (табл. 4). Исключение составил полиморфизм Т102С для гена 5-HTR2A, для которого была обнаружена слабая ассоциация (φ*эмп = 2,1; p < 0,05) с наличием параноидной шизофрении, обусловленная более высокой частотой встречаемости гомозигот TТ у больных по сравнению со здоровыми женщинами.
Таблица 4
Частота генотипов в изученных полиморфных участках страдающих параноидной шизофренией женщин (n = 97) и в контрольной группе здоровых женщин (n = 53)
|
Ген |
BDNF |
DRD2 |
5-HTR2A |
||||||
|
Генотип |
ValVal |
ValMet |
MetMet |
СС |
СТ |
ТТ |
ТТ |
ТС |
СС |
|
Больные женщины |
77,3 (75) |
19,6 (19) |
3,1 (3) |
48,5 (47) |
41,2 (40) |
10,3 (10) |
19,6* (19) |
38,1 (37) |
42,3 (41) |
|
Здоровые женщины |
75,5 (40) |
24,5 (13) |
0 (0) |
39,6 (21) |
45,3 (24) |
15,1 (8) |
9,4* (5) |
52,8 (28) |
37,8 (20) |
Примечание. Приведена частота генотипа; в скобках – число носителей.
* – различия по частоте генотипа TT по сравнению с объединенными генотипами TC и CC значимы между больными и здоровыми (φ*эмп = 2,1; p < 0,05).
При сравнении аллельных частот в изученных полиморфных участках у страдающих параноидной шизофренией мужчин по сравнению с психически здоровыми мужчинами каких-либо значимых различий встречаемости аллелей выявлено не было (табл. 5).
Таблица 5
Частота аллелей в изученных полиморфных участках страдающих параноидной шизофренией мужчин (n = 110) и в контрольной группе здоровых мужчин (n = 43)
|
Ген |
BDNF |
DRD2 |
5-HTR2A |
|||
|
Аллели |
Val |
Met |
T |
C |
C |
T |
|
Больные мужчины |
191 (86,8 %) |
29 (13,2 %) |
65 (29,5 %) |
155 (70,5 %) |
143 (65 %) |
77 (35 %) |
|
Здоровые мужчины |
71 (82,6 %) |
15 (17,4 %) |
27 (31,4 %) |
59 (68,6 %) |
56 (65,1) |
30 (34,9 %) |
При сопоставлении мужских выборок больных параноидной шизофренией и здоровых лиц значимых ассоциаций между изученными генетическими вариантами и параноидной шизофренией найдено не было (табл. 6).
Таблица 6
Частота генотипов в изученных полиморфных участках страдающих параноидной шизофренией мужчин (n = 110) и в контрольной группе здоровых мужчин (n = 43)
|
Ген |
BDNF |
DRD2 |
5-HTR2A |
||||||
|
Генотип |
ValVal |
ValMet |
MetMet |
СС |
СТ |
ТТ |
ТТ |
ТС |
СС |
|
Больные мужчины |
73,6 (81) |
26,4 (29) |
0 (0) |
50 (55) |
40,9 (45) |
9,1 (10) |
14,5 (16) |
41,9 (46) |
43,6 (48) |
|
Здоровые мужчины |
65,1 (28) |
34,9 (15) |
0 (0) |
46,5 (20) |
44,2 (19) |
9,3 (4) |
9,3 (4) |
51,2 (22) |
39,5 (17) |
Примечание. Приведена частота генотипа; в скобках – число носителей.
Стоит отметить, что при сравнении встречаемости аллельных частот и генотипов изучаемых полиморфизмов между группами больных мужчин и больных женщин различий также выявлено не было.
Полученные результаты подтверждают мнения о том, что генетическое влияние в развитии шизофрении полигенно и имеет вероятностный характер [5], а не определяется эффектом одного гена, при этом связь генов-кандидатов с характеристиками психоза обнаруживается только в однородных по полу выборках.
В ходе проведенного исследования в женской выборке больных параноидной шизофренией была обнаружена более частая встречаемость генотипа ТТ для полиморфизма Т102С гена 5-HTR2A в сравнении со здоровыми женщинами. Таким образом, можно заключить, что из всех изученных генов только полиморфизм Т102С гена 5-HTR2A связан с параноидной шизофренией у женщин.
Выводы
Увеличения частоты встречаемости какого-либо из изучаемых генотипов, ассоциированных с эндогенными психозами, в общей выборке больных шизофренией, проживающих на территории Саратовской области, выявлено не было. Возможно, полиморфизм Т102С гена 5-HTR2A связан с риском развития параноидной шизофрении у женщин.
Рецензенты:
Каледа В.Г., д.м.н., заместитель директора ФГБУ «Научный центр психического здоровья» Российской академии медицинских наук, главный научный сотрудник отдела по изучению эндогенных психических расстройств и аффективных состояний, г. Москва;
Оруджев Н.Я., д.м.н., профессор, заведующий кафедрой психиатрии, наркологии и психотерапии с курсом ФУВ, ГБОУ ВПО ВолгГМУ Министерства здравоохранения РФ, г. Волгоград.