Адеметионин в настоящее время является одним из наиболее эффективных гепатопротекторных лекарственных средств. Он проявляет также антидепрессивное, детоксицирующее, регенирирующее, нейропротективное действие [1]. Кроме того, эмпирическое применение адеметионина при остеоартритах сопровождается уменьшением болевого синдрома и стимуляцией синтеза протеингликанов и частичной регенерацией хрящевой ткани [2].
Однако недостатком адеметионина является его низкая стабильность и недостаточная хондропротекторная активность. В зарубежной литературе описано совместное назначение адеметионина и хондроитина [3, 4, 5]. Нами изучена соль адеметионина с хондроитином, которая позволит в значительной степени повысить хондропротекторную активность нового препарата. В первой серии субстанцию соли адеметионина с хондроитином герметично закрывали во флаконах и хранили при температуре 20 ± 2 °С. Вторую серию в герметично закрытых флаконах хранили в термостате при температуре 40 ± 1 °С. В каждой серии проводили количественное определение адеметионина с периодичностью в 60 дней – в первой серии и 30 дней – во второй.
Количественное определение адеметионина проводили спектрофотометрическим методом. Спектр поглощения адеметионина в 0,1 M растворе кислоты хлористоводородной приведен на рисунке.
В спектре поглощения адеметионина имеется одна широкая полоса поглощения с максимумом при 256 нм. Хондроитин сульфат в этой области не имеет светопоглощения и не мешает определению адеметионина. Содержание адеметионина рассчитывали по рабочему стандартному образцу, в качестве которого использовали субстанцию, соответствующую ФСП 42 – 0521 – 7254 – 05.
Точную навеску соли массой около 0,1 г растворяли в мерной колбе вместимостью 100 мл в 0,1 М кислоте хлористоводородной и доводили до метки той же кислотой. Аликвоту 25 мл переносили в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводили до метки 0,1 М кислотой хлористоводородной. Оптическую плотность полученного раствора регистрировали при длине волны 256 нм. Параллельно измеряли оптическую плотность РСО с концентрацией 0,001 %.
Спектр поглощения раствора адеметионина в 0,1 M растворе кислоты хлористоводородной
Расчет содержания адеметионина ( %) проводили по формуле
где Аx, Аст – зачение оптической плотности исследуемого и стандартного растворов соответственно; С𝑐т – концентрация раствора РСО, %; а – масса навески исследуемого образца, г.
Результаты анализа адеметионина, полученные в период хранения, приведены в таблице.
Приведенные результаты показывают, что при нормальной температуре соль адеметионина с хондроитином сохраняет стабильность на протяжении всего срока хранения. Срок наблюдения – 1,5 года. При температуре 40 °С через 240 суток наблюдается тенденция к снижению содержания адеметионина.
Изменение содержания адеметионина в соли с хондроитином в процессе хранения
|
t, дни T, °С |
30 |
60 |
120 |
180 |
270 |
300 |
330 |
360 |
|
20 °С |
19,90 |
19,85 |
19,95 |
19,90 |
19,85 |
19,0 |
19,90 |
19,80 |
|
40 °С |
19,95 |
19,85 |
19,90 |
19,85 |
19,0 |
18,90 |
18,0 |
18,0 |
В качестве второго метода контроля стабильности был использован метод ТСХ. Для выявления возможных продуктов деструкции адеметионин был подвержен термическому разложению. Образец субстанции метионина помещали в термостат и выдерживали в течение часа при 100 °С. Далее проводили хроматографирование всех образцов адеметионина: подвергшегося термическому разложению, образцов, заложенных на хранение, и фармакопейного препарата.
Из всех образцов готовили водные растворы с концентрацией около 0,1 %. Хроматографировали в системе этанол:вода:уксусная кислота (65:34:1). После высушивания хроматограммы проявляли в УФ-свете. На хроматограммах проявляется четкое пятно адеметионина 𝑅𝑓 = 0,3. В образце, подвергнутом термическому разложению, проявляется дополнительное пятно 𝑅𝑓 = 0,65. В образцах, хранившихся 1 год при температуре 20 °С и при температуре 40 °С 6 месяцев, дополнительных пятен не проявляется.Однако при температуре 40 °C после хранения 8–9 месяцев появляется дополнительное пятно с 𝑅𝑓 = 0,62.Эти результаты показывают, что адеметионин в составе соли с хондроитином стабилен не менее 1 года.
Выводы
1. Проведено изучение деструкции адеметионина во время хранения при 20 °C и при 40 °C и показано, что адеметионин сохраняет показатели качества в процессе хранения в первом случае в течение 12 месяцев во втором случае – в течение 6 месяцев.
2. Методом ТСХ показано, что после хранения в течение 12 месяцев при 20 °C и 6 месяцев при 40 °C могут появляться продукты деструкции адеметионина.
3. На основании исследования стабильности можно установить срок хранения соли адеметионина с хондроитином –1 год.
Рецензенты:
Панкрушева Т.А., д.фарм.н., профессор, зав. кафедрой фармацевтической технологии Курского медицинского университета, г.Курск;
Попова О.И., д.фарм.н., профессор кафедры фармакогнозии Пятигорского медико-фармацевтического института, филиала ГБОУ ВПО ВолгГМУ, г. Пятигорск.
Работа поступила в редакцию 14.10