Scientific journal
Fundamental research
ISSN 1812-7339
"Перечень" ВАК
ИФ РИНЦ = 1,749

STUDYING OF STABILITY OF SALT ADEMETIONINE FROM THE CHONDROITINSULFONIC ACID

Morozov A.V. 1
1 Pyatigorsk physician – pharmaceutical Institute
Studying of stability of salt of ademethionine was carried out. In the first series a salt substance of ademethionine hermetically closed in bottles and stored at a temperature of 20 ± 2 °C. The second series in hermetically closed bottles stored in the thermostat at a temperature of 40 ± 1 °C. In each series quantitative definition of ademethionine with frequency in 60 days – in the first series and 30 days – to the second was carried out. Quantitative definition of ademethionine was carried out with UV- spectrophotometry method. The content of ademethionine counted with a help of WS of ademethionine. Destruction studying of ademethionine in a storage time at 20 and 40 °C showed that ademethionine keeps quality indicators in the first case within 12 months, in the second – 6 months. As the second control method of stability the TLC method was used. The samples were chromatographyed in system of ethanol: water: acetic acid (65:34:1). After drying chromatograms were showed in UV-light. In samples stored 1 year at a temperature of 20 °C and at a temperature of 40 °C of 6 months additional spots wasn’t appear. The optimum period of storage of salt – is established, it is 1 year.
ademetionine
chondroitinsulfonic acid
salt
1. Registr lekarstvennyh sredstv Rossii RLS Jenciklopedija lekarstv. 19-j vyp. / Gl. red. G.L. Vyshkovskij. M.: RLS-MEDIA, 2010. рр. 80.
2. Registr lekarstvennyh sredstv Rossii RLS Jenciklopedija lekarstv.- 19-j vyp./Gl. red. G.L. Vyshkovskij. M.: RLS-MEDIA, 2010. рр. 963.
3. Aminosugar, glycosaminoglycan, and S-adenosylmethionine composition for the treatment and repair of connective tissue [Jelektronnyj resurs]. Rezhim dostupa: http://www.google.ru/patents/US6271213
4. Composition and use of ademetionine against ageing of the skin [Jelektronnyj resurs]. Rezhim dostupa: http://www.google.com/patents/US4956173
5. Sulphonic acid salts of S-adenosilmethionine [Jelektronnyj resurs]. Rezhim dostupa: http://www.google.com/patents/US4057686.

Адеметионин в настоящее время является одним из наиболее эффективных гепатопротекторных лекарственных средств. Он проявляет также антидепрессивное, детоксицирующее, регенирирующее, нейропротективное действие [1]. Кроме того, эмпирическое применение адеметионина при остеоартритах сопровождается уменьшением болевого синдрома и стимуляцией синтеза протеингликанов и частичной регенерацией хрящевой ткани [2].

Однако недостатком адеметионина является его низкая стабильность и недостаточная хондропротекторная активность. В зарубежной литературе описано совместное назначение адеметионина и хондроитина [3, 4, 5]. Нами изучена соль адеметионина с хондроитином, которая позволит в значительной степени повысить хондропротекторную активность нового препарата. В первой серии субстанцию соли адеметионина с хондроитином герметично закрывали во флаконах и хранили при температуре 20 ± 2 °С. Вторую серию в герметично закрытых флаконах хранили в термостате при температуре 40 ± 1 °С. В каждой серии проводили количественное определение адеметионина с периодичностью в 60 дней – в первой серии и 30 дней – во второй.

Количественное определение адеметионина проводили спектрофотометрическим методом. Спектр поглощения адеметионина в 0,1 M растворе кислоты хлористоводородной приведен на рисунке.

В спектре поглощения адеметионина имеется одна широкая полоса поглощения с максимумом при 256 нм. Хондроитин сульфат в этой области не имеет светопоглощения и не мешает определению адеметионина. Содержание адеметионина рассчитывали по рабочему стандартному образцу, в качестве которого использовали субстанцию, соответствующую ФСП 42 – 0521 – 7254 – 05.

Точную навеску соли массой около 0,1 г растворяли в мерной колбе вместимостью 100 мл в 0,1 М кислоте хлористоводородной и доводили до метки той же кислотой. Аликвоту 25 мл переносили в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводили до метки 0,1 М кислотой хлористоводородной. Оптическую плотность полученного раствора регистрировали при длине волны 256 нм. Параллельно измеряли оптическую плотность РСО с концентрацией 0,001 %.

pic_63.tif

Спектр поглощения раствора адеметионина в 0,1 M растворе кислоты хлористоводородной

Расчет содержания адеметионина ( %) проводили по формуле

Eqn94.wmf

где Аx, Аст – зачение оптической плотности исследуемого и стандартного растворов соответственно; С𝑐т – концентрация раствора РСО, %; а – масса навески исследуемого образца, г.

Результаты анализа адеметионина, полученные в период хранения, приведены в таблице.

Приведенные результаты показывают, что при нормальной температуре соль адеметионина с хондроитином сохраняет стабильность на протяжении всего срока хранения. Срок наблюдения – 1,5 года. При температуре 40 °С через 240 суток наблюдается тенденция к снижению содержания адеметионина.

Изменение содержания адеметионина в соли с хондроитином в процессе хранения

t, дни

T, °С

30

60

120

180

270

300

330

360

20 °С

19,90

19,85

19,95

19,90

19,85

19,0

19,90

19,80

40 °С

19,95

19,85

19,90

19,85

19,0

18,90

18,0

18,0

В качестве второго метода контроля стабильности был использован метод ТСХ. Для выявления возможных продуктов деструкции адеметионин был подвержен термическому разложению. Образец субстанции метионина помещали в термостат и выдерживали в течение часа при 100 °С. Далее проводили хроматографирование всех образцов адеметионина: подвергшегося термическому разложению, образцов, заложенных на хранение, и фармакопейного препарата.

Из всех образцов готовили водные растворы с концентрацией около 0,1 %. Хроматографировали в системе этанол:вода:уксусная кислота (65:34:1). После высушивания хроматограммы проявляли в УФ-свете. На хроматограммах проявляется четкое пятно адеметионина 𝑅𝑓 = 0,3. В образце, подвергнутом термическому разложению, проявляется дополнительное пятно 𝑅𝑓 = 0,65. В образцах, хранившихся 1 год при температуре 20 °С и при температуре 40 °С 6 месяцев, дополнительных пятен не проявляется.Однако при температуре 40 °C после хранения 8–9 месяцев появляется дополнительное пятно с 𝑅𝑓 = 0,62.Эти результаты показывают, что адеметионин в составе соли с хондроитином стабилен не менее 1 года.

Выводы

1. Проведено изучение деструкции адеметионина во время хранения при 20 °C и при 40 °C и показано, что адеметионин сохраняет показатели качества в процессе хранения в первом случае в течение 12 месяцев во втором случае – в течение 6 месяцев.

2. Методом ТСХ показано, что после хранения в течение 12 месяцев при 20 °C и 6 месяцев при 40 °C могут появляться продукты деструкции адеметионина.

3. На основании исследования стабильности можно установить срок хранения соли адеметионина с хондроитином –1 год.

Рецензенты:

Панкрушева Т.А., д.фарм.н., профессор, зав. кафедрой фармацевтической технологии Курского медицинского университета, г.Курск;

Попова О.И., д.фарм.н., профессор кафедры фармакогнозии Пятигорского медико-фармацевтического института, филиала ГБОУ ВПО ВолгГМУ, г. Пятигорск.

Работа поступила в редакцию 14.10