В современном мире артериальная гипертония (АГ) выходит на одно из лидирующих мест в числе неинфекционных заболеваний. В России распространенность АГ среди взрослого населения достигает 40 %, приводя к развитию мозгового инсульта, ишемической болезни сердца, сердечной и почечной недостаточности и являясь ведущей причиной смерти населения [3]. В последние годы АГ все чаще сочетается с дислипидемией, что значимо увеличивает риск развития сосудистых катастроф, связанных с тромбообразованием [4].
Несмотря на всю серьезность проблемы, остается недостаточно изученным влияние гиполипидемических препаратов на механизмы, определяющие начальные этапы тромбообразования, а именно на активность тромбоцитарного гемостаза [7, 8]. По этой причине оценка динамики тромбоцитарных функций у больных, получающих наиболее распространенные статины, в т.ч. аторвастатин, может считаться актуальной и практически значимой.
Цель работы – установить особенности воздействия ингибитора гидрокси-метилглутарил коэнзим А-редуктазы – аторвастатина на тромбоцитарный гемостаз у больных АГ с дислипидемией.
Материалы и методы исследования
Исследование проведено на 33 больных АГ 1–2 степени с дислипидемией IIб типа, риск 3 (критерии ДАГ3 (2008), среднего возраста (52,8 ± 1,7 года). Группу контроля составили 26 здоровых людей аналогичного возраста.
Количество общего холестерина (ОХС) и триглецеридов (ТГ) оценивали энзиматическим колориметрическим методом наборами фирмы «Витал Диагностикум». Холестерин ЛПВП определяли набором фирмы «Ольвекс Диагностикум» энзиматическим колориметрическим методом. Общие липиды (ОЛ) оценивали набором фирмы «Эрба Рус». Уровни ХС ЛПНП рассчитывали по формуле В. Фридвальда. ХС ЛПОНП устанавливали по формуле: содержание ТГ/2,2.
Уровень перекисного окисления липидов (ПОЛ) в плазме оценивали по содержанию тиобарбитуровой кислоты (ТБК)-активных продуктов набором фирмы «Агат-Мед» и ацилгидроперекисей (АГП) [2]. Антиокислительную активность (АОА) жидкой части крови определяли по Волчегорскому И.А. и соавт. (2000) [1].
Интенсивность внутритромбоцитарного ПОЛ определяли в отмытых и ресуспендированных тромбоцитах по концентрации малонового диальдегида (МДА) в реакции восстановления тиобарбитуровой кислоты по Кубатиеву А.А., Андрееву С.В. (1979) [7] и содержанию ацилгидроперекисей [2]. Активность внутритромбоцитарных антиоксидантных ферментов устанавливали для каталазы и супероксиддисмутазы (СОД) [9].
Активность тромбоцитарного гемостаза оценивали по ряду параметров. Подсчитывали количество тромбоцитов в капиллярной крови в камере Горяева. Агрегационная активность тромбоцитов исследовалась визуальным микрометодом по А.С. Шитиковой (1999) с использованием в качестве индукторов АДФ (0,5∙10–4 М), коллагена (разведение 1:2 основной суспензии), тромбина (0,125 ед./мл), ристомицина (0,8 мг/мл) (НПО «Ренам»), адреналина (5,0∙10–6 М. Завод Гедеон Рихтер А.О.) и перекиси водорода (7,3∙10-3 М) со стандартизированным количеством тромбоцитов в исследуемой плазме 200∙109 тр. [10].
Обмен эндогенной арахидоновой кислоты в тромбоцитах и активность в них циклооксигеназы и тромбоксансинтетазы – ферментов, непосредственно осуществляющих образование тромбоксана, оценивались в трех пробах переноса [5] с регистрацией агрегации тромбоцитов на фотоэлектроколориметре.
С целью коррекции дислипидемии всем больным назначался препарат «Аторвастатин» в дозе 10 мг на ночь на фоне постоянного приема больными эналаприла 10 мг 2 раза в сутки. Оценка клинических и лабораторных показателей проводилась в начале лечения, через 4, 16, 52 и 104 недели терапии. Статистическая обработка полученных результатов велась t-критерием Стьюдента.
Результаты исследования и их обсуждение
Применение аторвастатина позволило достичь у больных достоверной положительной динамики липидного спектра крови и активности ПОЛ плазмы (таблица).
Уже через 4 недели терапии аторвастатином у больных было выявлено выраженное снижение уровня гиперлипидемии (ОЛ – 8,2 ± 0,07 г/л) при уменьшении содержания в крови холестерина и триглицеридов до 5,5 ± 0,07 и 2,56 ± 0,03 ммоль/л соответственно (р < 0,01). Положительную динамику испытала и концентрация ХС ЛПНП, составив через 4 недели 3,15 ± 0,05 ммоль/л. Показатели ХС ЛПВП уже за месяц лечения аторвастатином достоверно возросли до 1,19 ± 0,003 ммоль/л. Уже на фоне месячного применения аторвастатина у пациентов было отмечено увеличение АОА плазмы до 26,4 ± 0,04 % с достоверным уменьшением пероксидации липидов в жидкой части крови (р < 0,01).
Продолжение приема аторвастатина обеспечило дополнительную позитивную динамику липидного состава и ПОЛ плазмы крови пациентов. Так, к концу 16 нед. терапии найдено снижение уровня ОЛ (5,6 ± 0,05 г/л, концентрации холестерина и триглицеридов (4,6 ± 0,06 и 1,71 ± 0,05 ммоль/л соответственно), ХС ЛПНП (2,19 ± 0,04 ммоль/л) до уровня контроля. На фоне дальнейшего лечения отмечено продолжение роста уровней ХС ЛПВП до 1,63 ± 0,005 ммоль/л.
В результате 16 нед. лечения аторвастатином достигнуто достоверное усиление антиокислительного потенциала плазмы (32,9 ± 0,10 %), что вызвало снижение уровня пероксидации липидов в жидкой части крови – концентрация АГП плазмы больных (1,42 ± 0,04Д233/1 мл) и ТБК-активных продуктов (3,56 ± 0,03 мкмоль/л) вышли на уровень показателей группы контроля. В течение 2 лет приема препарата у пациентов сохранился достигнутый уровень липидного состава и пероксидации липидов плазмы.
В ходе приема аторвастатина у больных достоверно повысился уровень антиоксидантной защиты тромбоцитов, ослабив исходно повышенную активность внутритромбоцитарного ПОЛ. Спустя 4 недели применения препарата отмечен рост активности каталазы и СОД до 5350,0 ± 18,46 и 1310,0 ± 5,92 МЕ/109тр соответственно, что указывало на повышение антиоксидантной защищенности тромбоцитов, обусловливающей понижение в них АГП и МДА. К концу 16 недель терапии аторвастатином антиоксидантная защита и активность ПОЛ кровяных пластинок вышла на уровень, свойственный группе контроля. Так, через 16 недель приема аторвастина содержание АГП снизилось до 2,20 ± 0,06 Д233/109 тр., МДА до 0,69 ± 0,04 нмоль/109 тр. при усилении активности каталазы (9810,0 ± 16,89 МЕ/109тр.) и СОД (1654,0 ± 2,45 МЕ/109тр.). Продолжение приема аторвастатина больными до 2 лет способствовало стабилизации на достигнутом уровне антиоксидантной защиты тромбоцитов и показателей их ПОЛ.
Число тромбоцитов на фоне лечения оставалось неизменным. Проводимая терапия вызвала у наблюдаемых лиц с АГ и дислипидемией удлинение времени развития АТ со всеми индукторами и их сочетаниями. Так, через 4 месяца лечения наиболее активная АТ отмечена под воздействием коллагена – время ее развития составило 33,5 ± 0,13 с. Медленнее АТ наступала с АДФ (41,5 ± 0,10 с), ристомицином (45,3 ± 0,15 с), Н2О2 (47,4 ± 0,10 с) и тромбином (55,4 ± 0,14 с). Наиболее длительное время развития АТ выявлено в ответ на адреналин (93,5 ± 0,15 с). Оценка АТ при сочетанном применении индукторов также показала возможность нормализующего воздействия препарата на агрегационную активность тромбоцитов через 4 месяца терапии с ее сохранением на достигнутом уровне до конца наблюдения (104 нед.).
На фоне 4 месяцев терапии отмечена стабильная нормализация тромбоксанобразования (35,3 ± 0,14 %) за счет снижения активности обоих ферментов обмена арахидоновой кислоты в тромбоцитах (циклооксигеназы до 67,7 ± 0,10 % и тромбоксансинтетазы до 57,3 ± 0,11 %) с сохранением достигнутого эффекта при продолжении лечения (104 нед.).
Динамика показателей больных на фоне лечения аторвастатином
|
Параметры |
Аторвастатин, n = 33,М ± m |
Контроль, n = 26, М ± m |
||||
|
Исходные значения |
4 нед. |
16 нед. |
52 нед. |
104 нед. |
||
|
ОХС, ммоль/л |
6,3 ± 0,02 |
5,5 ± 0,07 р1 < 0,01 |
4,6 ± 0,06 р1 < 0,01 |
4,5 ± 0,03 |
4,4 ± 0,04 |
4,8 ± 0,05 р < 0,01 |
|
ХС ЛПВП, ммоль/л |
1,04 ± 0,002 |
1,19 ± 0,003 р1 < 0,01 |
1,63 ± 0,005 р1 < 0,01 |
1,65 ± 0,003 |
1,64 ± 0,005 |
1,60 ± 0,006 р < 0,01 |
|
ХС ЛПНП, ммоль/л |
4,00 ± 0,03 |
3,15 ± 0,05 р1 < 0,01 |
2,19 ± 0,04 р1 < 0,01 |
2,08 ± 0,02 |
2,00 ± 0,03 |
2,43 ± 0,04 р < 0,01 |
|
ХС ЛПОНП, ммоль/л |
1,30 ± 0,003 |
1,16 ± 0,003 р1 < 0,01 |
0,78 ± 0,002 р1 < 0,01 |
0,77 ± 0,004 |
0,76 ± 0,005 |
0,77 ± 0,005 р < 0,01 |
|
ТГ, ммоль/л |
2,85 ± 0,05 |
2,56 ± 0,03 р1 < 0,01 |
1,71 ± 0,05 р1 < 0,01 |
1,69 ± 0,04 |
1,68 ± 0,06 |
1,70 ± 0,02 р < 0,01 |
|
ОЛ, ммоль/л |
9,0 ± 0,18 |
8,2 ± 0,07 р1 < 0,01 |
5,6 ± 0,05 р1 < 0,01 |
5,7 ± 0,04 |
5,5 ± 0,08 |
5,6 ± 0,03 р < 0,01 |
|
АГП плазмы, Д233/1 мл |
3,21 ± 0,04 |
2,76 ± 0,03 р1 < 0,01 |
1,42 ± 0,04 р1 < 0,01 |
1,43 ± 0,05 |
1,42 ± 0,07 |
1,42 ± 0,09 р < 0,01 |
|
ТБК плазмы, мкмоль/л |
5,17 ± 0,10 |
4,77 ± 0,07 р1 < 0,01 |
3,56 ± 0,03 р1 < 0,01 |
3,54 ± 0,04 |
3,55 ± 0,06 |
3,56 ± 0,07 р < 0,01 |
|
Антиокислительный потенциал плазмы, % |
23,5 ± 0,11 |
26,4 ± 0,04 р1 < 0,01 |
32,9 ± 0,10 р1 < 0,01 |
32,8 ± 0,02 |
32,8 ± 0,09 |
32,9 ± 0,12 р < 0,01 |
|
АДФ, с |
24,1 ± 0,08 |
26,3 ± 0,09 р1 < 0,05 |
41,5 ± 0,10 р1 < 0,01 |
41,2 ± 0,08 |
41,3 ± 0,10 |
41,0 ± 0,12 р < 0,01 |
|
Коллаген, с |
22,4 ± 0,11 |
22,5 ± 0,14 р1 < 0,05 |
33,5 ± 0,13 р1 < 0,01 |
33,3 ± 0,12 |
33,4 ± 0,09 |
33,2 ± 0,10 р < 0,01 |
|
Тромбин, с |
34,1 ± 0,16 |
39,6 ± 0,10 р1 < 0,05 |
55,4 ± 0,14 р1 < 0,01 |
55,5 ± 0,12 |
55,4 ± 0,09 |
55,3 ± 0,05 р < 0,01 |
|
Ристомицин, с |
27,4 ± 0,13 |
28,8 ± 0,18 р1 < 0,05 |
45,3 ± 0,15 р1 < 0,01 |
45,5 ± 0,10 |
45,4 ± 0,13 |
45,2 ± 0,06 р < 0,01 |
|
Н2О2, с |
28,4 ± 0,14 |
33,6 ± 0,14 р1 < 0,05 |
47,4 ± 0,10 р1 < 0,01 |
47,7 ± 0,13 |
47,6 ± 0,10 |
47,5 ± 0,07 р < 0,01 |
|
Адреналин, с |
71,9 ± 0,14 |
73,0 ± 0,12 р1 < 0,01 |
93,5 ± 0,15 р1 < 0,01 |
93,4 ± 0,10 |
93,3 ± 0,11 |
93,0 ± 0,07 р < 0,01 |
|
АДФ + адреналин, с |
19,7 ± 0,19 |
22,9 ± 0,11 р1 < 0,01 |
35,0 ± 0,06 р1 < 0,01 |
34,9 ± 0,08 |
34,8 ± 0,09 |
34,5 ± 0,04 р < 0,01 |
|
АДФ+коллаген, с |
18,3 ± 0,17 |
18,6 ± 0,11 р1 < 0,05 |
26,7 ± 0,14 р1 < 0,01 |
26,6 ± 0,17 |
26,8 ± 0,09 |
26,6 ± 0,05 р < 0,01 |
|
Адреналин+ коллаген, с |
13,4 ± 0,07 |
16,7 ± 0,10 р1 < 0,05 |
29,0 ± 0,12 р1 < 0,01 |
29,3 ± 0,09 |
29,4 ± 0,08 |
29,2 ± 0,12 р < 0,01 |
Условные обозначения: р – достоверность исходных показателей и контроля, р1 – достоверность динамики показателей на фоне лечения.
Терапия аторвастатином способна быстро и эффективно корректировать липидный профиль плазмы у больных АГ с дислипидемией. Это сопровождается достоверным ослаблением в ней ПОЛ, что, несомненно, позитивно сказывается на активности тромбоцитов пациентов с АГ и дислипидемией. Все это обеспечивает оптимизацию ПОЛ в самих тромбоцитах, создавая условия для нормализации активности ферментных систем кровяных пластинок и рецепторов на их поверхности. Выраженная позитивная динамика активности кровяных пластинок обусловлена значимым положительным влиянием применения аторвастатина в результате ослабления активности ПОЛ в тромбоцитах. Удлинение времени развития АТ под влиянием ристомицина у больных, принимавших аторвастатин, объясняется снижением в крови уровня адгезивной молекулы – фактора Виллебранда, благодаря ослаблению его выработки в стенке сосудов [7]. Нарастание в результате лечения резистентности тромбоцитов к перекиси водорода, зарегистрированное по повышению длительности АТ с Н2О2, указывает на возросшую в них активность системы антиокисления и, в частности, каталазы и супероксиддисмутазы, что было подтверждено прямым исследованием их активности в кровяных пластинках.
Выраженное позитивное действие аторвастатина на адгезивную и агрегационную функцию тромбоцитов у больных АГ с дислипидемией связано не только с контролем над ПОЛ в мембранах тромбоцитов, но и уменьшением активности их ферментных систем, в т.ч. тромбоксанообразования [7, 8]. Ослабление функций тромбоцитов лиц с АГ и дислипидемией обеспечивает снижение генерации тромбопластина [10] в просвете сосудов, вызывая исключение пристеночного фибринообразования, существенно снижая риск тромбоза.
Таким образом, прием аторвастатина способен стабильно оптимизировать гемостатическую активность тромбоцитов у больных АГ с дислипидемией за 16 недель терапии.
Выводы
1. Назначение аторвастатина больным артериальной гипертонией с дислипидемией уже к 16 неделям терапии нормализует липидный состав и уровень перекисного окисления липидов плазмы до конца наблюдения (104 недели).
2. В результате 16 недель терапии аторвастатином у пациентов, страдающих артериальной гипертонией с дислипидемией, возможно выведение активности ПОЛ в плазме и в кровяных пластинках, а также функциональных возможностей последних на уровень нормы с закреплением достигнутого эффекта при продолжении лечения.
Рецензенты:
Громнацкий Н.И., д.м.н., профессор кафедры терапии № 2 Курского государственного медицинского университета,г. Курск;
Жукова Л.А., д.м.н., профессор, зав. кафедрой эндокринологии и диабетологии Курского государственного медицинского университета, г. Курск.
Работа поступила в редакцию 01.07.2013.