Scientific journal

Fundamental research

ISSN 1812-7339

"Перечень" ВАК

ИФ РИНЦ = 1,674

Эффективность и безопасность липидоснижающей терапии симвастатином подтверждены во многих исследованиях, ставших основой доказательной базы для всей группы статинов [9]. Согласно одному из них, при сравнении двух стратегий лечения разными дозами препарата – 40 и 80 мг/сутки, «агрессивное» лечение приводило к более выраженному снижению риска основных сердечно-сосудистых событий без признаков осложнений [11].

Влияние статинов на уровень жирных кислот (ЖК) представляет теоретический и практический интерес, так как имеются работы, показывающие наличие положительного терапевтического эффекта статинов при совместном использовании с препаратами, содержащими ненасыщенные жирные (НЖК) [4]. Содержание ЖК в мембранах эритроцитов наиболее объективно отражает глубокие и долговременные изменения в мембранах клеток организма [12], поэтому данное исследование направлено на изучение изменения жирно-кислотного состава в данном объекте.

Цель исследования – провести сравнительный анализ эффективности влияния разных доз симвастатина (40 и 80 мг/ сутки) на спектр ЖК эритроцитов у мужчин, больных хронической формой ИБС.

Материал и методы исследования

В исследовании участвовали 39 пациентов мужского пола, больных хронической формой ИБС, в возрасте от 45 до 68 лет (средний возраст 55,45 ± 0,92 лет). Критериями исключения для данной группы являлись инфаркт миокарда, прогрессирующая стенокардия, инсульт, тромбоэмболия легочной артерии, перенесенные менее чем за 6 месяцев до обследования, стенокардия напряжения III–IV функциональных классов, тяжелые нарушения функции печени, почек, острые и хронические заболевания в стадии обострения, злоупотребление алкоголем, отсутствие добровольного информированного согласия на участие в исследовании.

В зависимости от получаемой дозировки препарата больные были поделены на группы. Первая группа в количестве 19 пациентов получала холестеролпонижающий препарат «Симвагексал» с действующим веществом симвастатин в дозировке 40 мг/сутки. Вторую группу составили больные ИБС, которым назначали данный препарат в дозировке 80 мг/сутки. Срок лечения составил 2 месяца. С целью предупреждения возникновения осложнений через 1 месяц регулярного приема препарата осуществляли контроль над соблюдением рекомендаций, проводили развернутый и биохимический анализ крови.

Липидный спектр сыворотки крови, включающий такие показатели, как липопротеины высокой (ЛПВП), триацилглицеролы (ТГЛ), общий холестерол (ОХ), определяли автоматически, гомогенным энзиматическим колориметрическим методом на автоматическом анализаторе «Star Fax 1904+» (США). Содержание липопротеинов очень низкой плотности (ЛПОНП) и низкой плотности (ЛПНП) рассчитывали по формулам Фридвальда. Расчет коэффициента атерогенности (КА) производили по формуле А.Н. Климова [5].

Исследование жирно-кислотного состава эритроцитов крови проводились после 12-часового голодания. Эфиры ЖК получали непосредственно в гомогенизированных эритроцитах с использованием хлористого ацетила по методу Ланкина [6], с некоторыми модификациями. Разделение ЖК проводили на капиллярной колонке «Omegа wax 250», 30 м, 0,25 мм, 0,25 µн (США).

Метиловые эфиры ЖК липидов эритроцитов очищали с помощью тонкослойной хроматографии на пластинах размером 5×20 см, толщиной силикагеля 250 мкм и диаметром гранул 25 мкм (средний диаметр пор 60 Å) (Fluka, США) по методу Ruggieri [13].

Определение эфиров ЖК проводили на хромато-масс-спектрометре (Аgilent Technologies, США) при введении 1 мкл пробы. Идентификация ЖК проводилась по времени выхода стандартов ЖК, а также по масс-спектрометрии электронных облаков с использованием библиотеки масс-спектрометрических отпечатков. Содержание отдельных ЖК выражали в процентах от общей суммы жирно-кислотного состава эритроцитов.

Исследовали суммарные уровни НасЖК, НЖК, включающие семейства ω3, ω6, их отношение, а также семейства ω7 и ω9 ЖК. В сумму мононенасыщенных ЖК (МНЖК) входили заменимые ЖК, такие как С16:1 ω7, С18:1 ω9, С18:1 ω7, С20:1 ω9, С22:1 ω9, С24:1 ω9ЖК. В качестве интегрального показателя, указывающего на перераспределение ЖК состава, использовался индекс ненасыщенности (ИН), рассчитанный как отношение процентного содержания НЖК к НасЖК, умноженное на 100. Содержание в клетках витамина F вычисляли как сумму незаменимых для организма ЖК, включающую С18:2 ω6, С18:3 ω3, С20:4 ω6, С20:5 ω3, С22:6 ω3 ЖК [2].

Содержание ЖК входящих в состав ТГЛ рассчитывали как сумму С16:0, С18:1 ω9, С18:2 ω6, С18:3 ω3 ЖК. В качестве субстратов мембран эритроцитов использовали процентное содержание НЖК с 2-мя и более двойными связями к общему содержанию ЖК, тогда как энергетический субстрат клеток состоял из суммы НасЖК и МНЖК [3, 10].

Анализ полученных результатов проводили с помощью статистического пакета прикладных программ SPSS 13.0 for Windows с проверкой показателей на нормальность распределения с помощью критерия Колмогорова‒Смирнова. Достоверность различий для парных выборок определяли по параметрическому t-критерию Стьюдента. Статистически значимыми считали различия при p ≤ 0,05.

Результаты исследования и их обсуждения

Исследование липидного спектра крови у мужчин с хронической формой ИБС при получении симвастатина независимо от дозировки показало снижение ОХ, ЛПНП и КА. Прием препарата в дозе 40 мг/сутки приводил к снижению ЛПВП, тогда как при увеличенной дозе симвагексала наблюдался более выраженный положительный эффект, который заключался в дополнительном уменьшении ЛПОНП и ТГЛ (табл. 1).

Исследование содержания НЖК в мембранах эритроцитов этих же больных после приема симвастатина в дозировке 40 мг/сутки показывало снижение цервоновой (С22:6) ω3 ЖК, влиявшее на уменьшение суммарного уровня ω3 ЖК (табл. 2).

При использовании обеих дозировок препарата наблюдалось повышение дигомо-γ-линолевой (С20:2) ω6 ЖК, снижение линолевой (С18:2) ω6 ЖК. Содержание арахидоновой (С20:4) ω6 ЖК уменьшалось только при дозе 40 мг/сутки. Данные изменения сказались на уменьшении суммарного уровня ω6 НЖК.

В обеих группах после терапии симвастатином олеиновая (С18:1) ω9 ЖК понижалась, однако только при дозировке 80 мг/сутки на фоне увеличения гондоиновой (С20:1) ω9 НЖК наблюдалось уменьшение суммы ω9 НЖК.

Независимо от дозы симвастатина снижалось процентное содержание НЖК, участвующих в построении клеточных мембран (НЖК – субстраты мембран эритроцитов) [3]. Также уменьшалось содержание незаменимых НЖК (витамин F) [2]. Напротив, содержание заменимых МНЖК увеличивалось.

Таблица 1

Содержание липидов сыворотки крови у мужчин, больных хронической формой ИБС, до и после приема симвастатина (М ± m)

Примечание. Здесь и далее n ‒ количество пациентов; М – среднее значение; m – ошибка среднего; звездочкой обозначен уровень значимости различий показателей между группами наблюдения до и после лечения *** – p ≤ 0,001; ** – p ≤ 0,01; * – p ≤ 0,05; КА-коэффициент атерогенности в у.е.

Таблица 2

Содержание ненасыщенных жирных кислот в эритроцитах у мужчин, больных хронической формой ИБС, до и после приема симвастатина в дозировках 40 и 80 мг/сутки (М ± m)

Таблица 3

Специфичность воздействия разных доз препарата проявилась в качественном изменении процентного содержания НасЖК. Так, при дозировке симвастатина 40 мг/сутки повышался уровень миристиновой и маргариновой ЖК, тогда как при 80 мг/сутки увеличивалось содержание арахиновой ЖК и снижалось – пальмитиновой ЖК (табл. 4).

Таблица 4

Содержание насыщенных жирных кислот в эритроцитах у мужчин, больных хронической формой ИБС, до и после приема симвастатина в дозровках 40 и 80 мг/сутки (M ± m)

Наблюдалось увеличение лигноцериновой (С24:0) и гексаказановой (С26:0) ЖК в обеих группах. Таким образом, независимо от дозировки симвастатина, рост процентного содержания отдельных НасЖК приводил к увеличению их суммы, что на фоне снижения суммарного содержания НЖК давало уменьшение ИН. Снижалось процентное содержание ЖК, входящих в состав ТГЛ. Отмечалось увеличение процентного содержания ЖК, которые в сумме относятся к основным энергетическим субстратам клетки [10].

Заключение

Полученные результаты свидетельствуют о положительном влиянии двухмесячной терапии симвастатином на липидный профиль крови, характеризующийся снижением ОХ, ЛПНП и КА. Данные изменения не зависели от дозировки препарата. Более выраженный эффект наблюдался при увеличенной дозе симвастатина до 80 мг, который заключался в дополнительном снижении ЛПОНП и ТЛГ.

В зависимости от дозы препарата происходило качественное перераспределение как отдельных, так и суммарных уровней ЖК в эритроцитах. При дозировке препарата 40 мг/сутки отмечалось снижение общего уровня ω3 ЖК за счет цервоновой ЖК, в то время как дозировка 80 мг/сутки приводила к уменьшению суммы ω9 за счет олеиновой ЖК. Известно, что недостаток в клетках ω3 ЖК приводит к изменению физико-химических свойств плазматических мембран, нарушению функционирования рецепторов и транспортных систем в клетке [8]. Данные изменения требуют коррегирующей терапии при совместном назначением статинов и препаратов, содержащих как ω3 ЖК, так ω6 ЖК, дефицит которых наблюдался независимо от установленной дозировки.

При лечение симвастатином 80 мг/сутки выявлено снижение суммарного уровня ω9 ЖК в результате уменьшения олеиновой ω9 ЖК. Известно, что данная ЖК является предшественником синтеза ω9-простагландинов с сильным провоспалительным эффектом. Простациклины данного семейства активируют сокращение гладкомышечных клеток сосудов и повышают артериальное давление, тогда как тромбоксаны – агрегацию тромбоцитов [7].

Кроме того, выявлено снижение ЖК, содержащихся в ТЛГ, таких как пальмитиновая, олеиновая, линолевая и линоленовая ЖК [10]. Необходимо отметить, что при 80 мг/сутки эффект симвастатина сказался на снижении уровня ЛПОНП и соответственно на содержание ТЛГ в составе данной фракции. Кроме того, снижение процентного содержания пальмитиновой ЖК связано с положительным эффектом лечения, поскольку избыточное содержание таковой в составе ЛПНП крови играет важную роль в формировании атеросклеротических бляшек [10].

Известно, что лигноцериновая ЖК является гидроокси-производной цереброновой и нервоновой ЖК, входящих в состав гликосфинголипидов клеточных мембран различных тканей [1], однако влияние статинов на таковую остается наименее изученным. Возможно, увеличение в содержании лигноцериновой ЖК при дозировках симвастатина 40 и 80 мг может отразиться на функции сфинголипидов в составе плазматических мембран клеток, ответственных за выполнение функции антигенов, групповых свойств крови, рецепторов, участвующих в регуляции адгезии клеток, роста, размножения клеток и иммунологических процессах. Кроме этого, накопление НасЖК обеспечивает более жесткую структуру клеточных мембран, нарушая работу ферментов и белково-транспортных систем. Данные изменения подтверждаются снижением индекса ненасыщенности, изменение которого указывало на повышение доли НЖК при дефиците ННЖК в мембранах эритроцитов.

Независимо от дозировки в той или иной степени можно сказать, что симвастатин создает условия для усиленного депонирования субстратов энергии [10] – НасЖК и МНЖК, с одной стороны, и уменьшение уровня НЖК – субстратов для структуризации мембран и витамина F ‒ с другой.

Рецензенты:

Гринштейн Ю.И., д.м.н., профессор, зав. кафедрой терапии ИПО ГОУ ВПО «Красноярский медицинский университет им. проф. Войно-Ясенецкого», г. Красноярск;

Смирнова О.В., д.м.н., зав. лабораторией молекулярно-клеточной физиологии и патологии НИИ медицинских проблем Севера СО РАМН, г. Красноярск.

Работа поступила в редакцию 08.05.2013.