Успешное освоение Севера, обладающего огромным экономическим потенциалом, тесно связано с изучением адаптации человека. Важнейшей частью данного вопроса является изучение функционирования физиологических систем организма человека в неблагоприятных климатогеографических условиях Севера, оказывающих негативное влияние на качество жизни и уровень здоровья [1].
Многофакторность и лабильность климатических воздействий Среднего Приобья носит экстремальный характер. Длительное проживание в гипокомфортных условиях приводит к снижению резервов приспособительных возможностей современного человека и способствует возникновению предпатологических и патологических сдвигов, особенно в тех системах и органах, в которых наиболее выражены адаптивные перестройки [8].
В последние годы среди патологических процессов инфекционного характера широко распространены хламидийная и уреаплазменная инфекции, передающиеся преимущественно половым путем [4]. При губительном воздействии на клетки хозяина инфекционных агентов хламидийной и уреаплазменной природы в условиях Севера процесс адаптации в организме человека протекает крайне тяжело с выраженными нарушениями в обмене веществ, сдвигами в метаболизме белков и другими системными нарушениями [1].
В процессе адаптации происходит гиперактивация иммунной системы, а при длительном течении срыв ее функций, который проявляется снижением Т-клеточного звена иммунитета, значимой активации В-клеточного звена иммунитета и снижением переваривающей способности нейтрофилов на фоне высокой фагоцитарной активности, в результате чего формируется стойкая иммунная недостаточность [8].
В результате хламидийной инфекции происходят более серьезные нарушения как клеточного, так и гуморального звеньев иммунитета, приводящие к хронизации инфекции и развитию различных осложнений [9].
Цель исследования: оценить иммунологические показатели крови жителей Среднего Приобья, страдающих урогенитальными инфекциями в гипокомфортных климатических условиях.
Материал и методы исследования
Обследовано 247 жителей Среднего Приобья в зимний период, в возрасте от 18 до 69 лет; из них 143 женщины и 104 мужчины, проживающих в г. Сургуте более 8 лет. Жители были разделены на 3 группы по характеру инфекций: контрольная группа - практически здоровые жители, из них 23 женщины и 17 мужчин; группа 1 - пациенты с урогенитальными смешанными инфекциями (хламидия, уреаплазма), из них 45 женщин и 30 мужчин; группа 2 - пациенты с урогенитальной хламидийной инфекцией, из них 49 женщин и 38 мужчин; группа 3 - пациенты с урогенитальной уреаплазменной инфекцией, из них 26 женщин и 19 мужчин.
Количество Т-лимфоцитов (Т-лф) крови определяли с помощью метода Е-РО (розеткообразование с эритроцитами барана) в спонтанном тесте и В-лимфоциты (В-лф) - М-РО (розеткообразование с эритроцитами мыши) по ускоренной технологии. Фагоцитарную реакцию нейтрофильных лейкоцитов крови проводили в тесте с клетками суточной культуры кишечной палочки. В окрашенных мазках подсчитывали показатели фагоцитоза с помощью иммерсионной системой светового микроскопа: % фагоцитоза, фагоцитарное число (ФЧ), индекс завершенности фагоцитоза (ИЗФ). Содержание Т-хелперов (CD4) и Т-супрессеров (CD8) в крови измеряли с помощью метода иммунофенотипирования на проточном цитофлуометре. Рассчитывали иммунорегуляторный индекс (CD4/CD8). Количественное определение иммуноглобулинов (Ig) А, М, G проводили методом радиальной иммунодиффузии в геле (РИД).
Статистическую обработку полученных результатов осуществляли методами вариационной статистики с использованием t-критерия Стьюдента. Определяли среднее квадратическое отклоне-
ние (σ), среднее арифметическое значение (М) и ошибку средней (m), достоверными считали отличия при P < 0,05; 0,01; 0,001.
Результаты исследований и их обсуждение
Многообразие функций иммунной системы и ее саморегуляция обеспечивается гетерогенностью популяций лимфоцитов. Для иммунного ответа гуморального типа характерна выработка антител, которые одновременно являются эффекторами В-звена иммунной системы [10].
Урогенитальные инфекции сопровождаются иммунными нарушениями, которые характеризуются вариабельностью и неоднозначностью, что затрудняет применение результатов лабораторных иммунологических тестов на практике [2].
Известно, что Ig G обеспечивает антитоксическую защиту, а Ig A и Ig M принимают участие в воспалительно-деструктивных процессах в тканях и рассматриваются в качестве компонентов синдрома эндогенной интоксикации. Нарушение этих закономерностей свидетельствует о недостаточности гуморального иммунитета и указывает на звено, за счет которого идет нарушение [10].
Результаты исследований показали достоверное увеличение содержания IgA в крови I и II групп пациентов по сравнению с группой здоровых людей (табл. 1). Это, вероятно, связано с местной защитной реакцией, в первую очередь, против хламидийных агентов.
Таблица 1
Показатели гуморального звена иммунитета в крови жителей Среднего Приобья
|
Показатели |
Ед. изм. |
Здоровые люди |
Смешанные инфекции |
Хламидийная инфекция |
Уреаплазменная инфекция |
|
n = 40 |
n = 75 |
n = 87 |
n = 45 |
||
|
В-лф |
_ %_ 109/л |
16,13 ± 0,66 0,31 ± 0,02 |
10,40 ± 0,61** 0,23 ± 0,01** |
9,23 ± 0,45** 0,83 ± 0,04** |
9,85 ± 0,76** 0,45 ± 0,03** |
|
IgA |
г/л |
1,73 ± 0,28 |
2,89 ± 0,39** |
3,51 ± 0,35*** |
2,00 ± 0,29 |
|
IgG |
г/л |
11,02 ± 0,84 |
15,58 ± 0,45*** |
14,78 ± 0,50*** |
14,36 ± 0,48** |
|
IgM |
г/л |
1,75 ± 0,15 |
1,63 ± 0,26 |
1,85 ± 0,22 |
1,43 ± 0,13* |
Примечание: * - P < 0,05; ** - P < 0,01; *** - P < 0,001 - достоверность различий показателей по сравнению с контролем.
Ig M является единственным классом антител, синтез которых начинается до рождения ребенка. Они первыми появляются в сыворотке после введения антигена, поэтому содержание IgM должно увеличиваться только в начальный период острого процесса [10]. Результаты исследований показали, что в крови пациентов содержание IgM практически не изменялось, за исключением III группы лиц, где наблюдалось незначительное снижение содержания IgM по сравнению с группой здоровых людей (см. табл. 1). Вероятно, снижение концентрации IgM связано с увеличением синтеза IgG, так как по мере нарастания титра IgG резко тормозится синтез малоспецифичных IgM, который регулируется только уровнем соответствующего ему по специфичности IgG [5].
IgG является основным антителом вторичного иммунного ответа. Антитела класса IgG продуцируются в ответ на проникновение в организм большинства бактерий и вирусов, следовательно, количество антител класса IgG у пациентов, инфицированных патогенными организмами, должно было увеличиваться [7]. В наших исследованиях обнаружено достоверное увеличение содержания IgG в крови всех экспериментальных групп по сравнению с группой здоровых людей (см. табл. 1).
При сравнении показателей гуморального звена иммунитета крови пациентов с хламидийной инфекцией г. Сургута и г. Твери [6] выявлен повышенный уровень В-лф в крови пациентов г. Сургута, почти в 4 раза в сравнении с показателями крови жителей г. Твери. В крови пациентов с хламидийной инфекцией г. Твери и г. Саратова [3] содержание IgA выше на 34 % (P < 0,01) в сравнении с данным показателем крови пациентов г. Сургута. Однако содержание IgМ выше на 62 % (P < 0,01) в крови жителей г. Саратова в сравнении с данным показателем жителей г. Сургута и г. Твери. Можно предположить, что такого рода изменения в крови жителей разных климатических зон могут свидетельствовать о соответствующем уровне антигенной активации в процессе длительного течения урогенитальных инфекций.
В результатах наших исследований показано увеличение абсолютного содержания В-лф в крови пациентов с хламидийной и уреаплазменной инфекциями и снижение относительного количества В-лф практически во всех группах пациентов по сравнению с группой здоровых людей, что может свидетельствовать о длительном воздействии инфекций (см. табл. 1).
Содержание Т-лф в крови всех экспериментальных групп существенно не изменялось за исключением незначительного достоверного снижения их количества в крови второй группы пациентов по сравнению с группой здоровых людей (табл. 2), что, вероятно, свидетельствует о снижении реакции Т-лф на слабо выраженное воздействие инфекционных агентов. Возможно, это связано с персистенцией хламидий. Данные наших исследований показали достоверное снижение абсолютного и относительного содержания CD4 в крови пациентов I, III групп и CD8 в крови всех групп пациентов по сравнению с контролем (см. табл. 2). Подобные изменения характерны для инфекций с затяжным течением и обусловлены формированием приобретенных вторичных иммунодефицитных состояний.
Таблица 2
Показатели Т-клеточного звена иммунитета в крови жителей Среднего Приобья
|
Показатели |
Ед. изм. |
Здоровые люди |
Смешанные инфекции |
Хламидийная инфекция |
Уреаплазменная инфекция |
|
n = 40 |
n = 75 |
n = 87 |
м = 45 |
||
|
Т-лф |
% 109/л |
72,27 ± 4,26 1,41 ± 0,08 |
65,28 ± 5,52 1,22 ± 0,09 |
62,59 ± 4,94* 1,21 ± 0,05* |
63,24 ± 6,84 1,24 ± 0,09 |
|
CD4 |
% 109/л |
43,61 ± 1,15 0,69 ± 0,02 |
35,00 ± 1,28* 0,25 ± 0,01** |
43,87 ± 1,47 0,72 ± 0,02 |
41,25 ± 1,78 0,21 ± 0,02** |
|
CD8 |
% 109/л |
26,53 ± 0,45 0,45 ± 0,06 |
18,23 ± 0,48** 0,16 ± 0,04*** |
17,78 ± 0,33** 0,28 ± 0,06** |
17,95 ± 0,54** 0,18 ± 0,03** |
|
CD4/CD8 |
- |
1,53 ± 0,01 |
1,56 ± 0,01 |
2,57 ± 0,02*** |
1,17 ± 0,03* |
Примечание: * - P < 0,05; ** - P < 0,01; *** - P < 0,001 - достоверность различий показателей по сравнению с контролем.
Одним из ведущих значений в оценке состояния иммунной системы имеет соотношение CD4 и CD8 в периферической крови, так как от этого зависит интенсивность иммунного ответа [10]. В нашей экспериментальной группе отмечено достоверное увеличение CD4/CD8 в крови II и III групп пациентов по сравнению с контролем (см. табл. 2).
Учитывая неадекватность сдвигов иммунологических параметров Т-лф, CD4, CD8, сравнивали данные показатели крови жителей г. Твери [6] с таковыми показателями собственных исследований. Отмечено, что содержание Т-лф и показателя CD4/CD8 в крови жителей г. Сургута выше в 2 раза (P < 0,001) по сравнению с данными показателями крови жителей г. Твери. Содержание Т-лф в крови жителей г. Сургута было снижено на 14 %, а в крови жителей г. Твери в 2 раза. Отмечено снижение коэффициента соотношения CD4/CD8 на 51 % в крови жителей г. Твери по сравнению с контролем, что указывает на развитие иммунодефицитного состояния, а в крови пациентов г. Сургута данный показатель выше контроля на 45 %, что может свидетельствовать о гиперактивности иммунной системы.
В ответ на любое внешнее воздействие начинает действовать иммунофагоцитарная система, свидетельствующая о сложных связях между различными клеточными популяциями и неклеточными химическими субстанциями. Иммунофагоцитарная система формирует определенные формы ответа на внешнее воздействие. Значительную роль в противоинфекционной защите макроорганизма играет система нейтрофильного фагоцитоза [6]. Обнаружено достоверное увеличение как абсолютного, так и относительного содержания фагоцитирующих нейтрофилов крови пациентов в течение 30 мин и 120 мин во всех экспериментальных группах по сравнению с контролем (табл. 3).
Таблица 3
Показатели фагоцитарной активности нейтрофилов в периферической крови
жителей Среднего Приобья
|
Показатели |
Ед. изм. |
Здоровые люди |
Смешанные инфекции |
Хламидийная инфекция |
Уреаплазменная инфекция |
|
n = 40 |
n = 75 |
n = 87 |
n = 45 |
||
|
Фагоцитоз в течение 30 мин |
% ФЧ |
82,00 ± 2,38 3,44 ± 0,17 |
92,00 ± 4,90* 4,50 ± 0,37** |
93,56 ± 3,57** 4,70 ± 0,39** |
92,61 ± 3,73* 4,61 ± 0,31** |
|
Фагоцитоз в течение 120 мин |
% ФЧ |
81,6 ± 4,28 3,45 ± 0,32 |
96,50 ± 3,00*** 5,30 ± 0,41*** |
92,22 ± 5,14** 5,44 ± 0,63*** |
98,12 ± 4,35*** 5,37 ± 0,56*** |
|
ИЗФ (N > 1) |
- |
1,12 ± 0,07 |
0,74 ± 0,02* |
0,90 ± 0,02* |
0,78 ± 0,02* |
Примечание: * - P < 0,05; ** - P < 0,01; *** - P < 0,001 - достоверность различий показателей по сравнению с контролем.
Показано достоверное снижение индекса завершенности фагоцитоза (ИЗФ) в крови всех групп пациентов по сравнению с группой здоровых людей (см. табл. 3).
Заключение
Таким образом, анализ выявленных изменений в иммунном статусе жителей г. Сургута с урогенитальными инфекциями свидетельствует о неадекватной иммунореактивности в целом и нарушении процессов опсонизации хламидий и уреаплазмы, как одного из пусковых факторов незавершенного фагоцитоза. Изменения В-клеточного звена в сторону увеличения уровня иммуноглобулинов IgG, IgA в сыворотке крови жителей г. Сургута с урогенитальными инфекциями свидетельствует о длительном воздействии на организм человека инфекционных агентов. Снижение активности Т-клеточного звена иммунитета у жителей г. Сургута, в сравнении с жителями Средней полосы России, лежит в основе развития вторичного иммунодефицита.
Рецензенты:
Литовченко О.Г., д.б.н., доцент, начальник управления ГОУ ВПО «Сургутский государственный университет ХМАО-Югры», г. Сургут;
Меркулова Н.Н., д.б.н., зав. иммунологическим отделением Бюджетного учреждения Ханты-мансийского автономного округа «Сургутская станция переливания крови», г. Сургут.
Работа поступила в редакцию 16.08.2011.