Научный журнал
Фундаментальные исследования
ISSN 1812-7339
"Перечень" ВАК
ИФ РИНЦ = 1,674

ХИМИЧЕСКИЙ СОСТАВ НАДЗЕМНОЙ ЧАСТИ ЖЕНЬШЕНЯ

Акушская А.С. 1
1 ГБОУ ВПО «Самарский государственный медицинский университет» Минздрава России
В настоящей статье обсуждаются результаты фитохимического исследования надземной части женьшеня настоящего (Panax ginseng C.A. Meyer). С использованием хроматографических методов – адсорбционной жидкостной колоночной хроматографии, тонкослойной хроматографии, а также методов перекристаллизации из травы женьшеня выделено индивидуальное вещество флавоноидной природы, предварительно идентифицированное как 3-О-диксилозид 3,5,7,4’-тетрагидроксифлавона (кемпферол-3-О-диксилозид). Разработаны методики количественного определения суммы сапонинов в надземной части в пересчете на гинзенозид Rg1 и суммы флавоноидов в пересчете на рутин с использованием метода спектрофотометрии. Содержание суммы сапонинов составляет 4,30 и 1,30 % в листьях и стеблях соответственно. Содержание суммы флавоноидов составляет 1,20 и 0,50 % в листьях и стеблях соответственно. Метрологические характеристики методик свидетельствуют об их достоверности и воспроизводимости.
женьшень настоящий
Panax ginseng C.A. Meyer
флавоноиды
хроматография
спектрофотометрия
1. Бржихнач Б., Шаповалов В.К., Севрюк Н.И. К фармакогностической характеристике листьев Panax ginseng C.A. Meyer // Растительные ресурсы. – 1982. – Т. 18. – № 3. – С. 357–363.
2. Государственный реестр лекарственных средств. – Т. 1. Официальное издание. – М.: Ремедиум, 2008. – 1398 с.
3. Куркин В.А., Акушская А.С. Определение сапонинов в корнях женьшеня // Фармация. – 2012. – Т. 60. – № 3. – С. 18 –20.
4. Куркин В.А. Фармакогнозия: учебник для студентов фармацевтических вузов – 2-е изд., перераб. и доп. – Самара: Офорт; СамГМУ, 2007. – 1239 с.
5. Легостева А.Б. Фитохимическое изучение листьев женьшеня, получение и анализ препаратов, содержащих панаксозиды: автореф. дис. ... канд. фарм. наук. – Л., 1989. – 26 с.
6. Способ приготовления и фармакологические свойства настойки из листьев женьшеня / С.А. Минина, А.Б. Легостева, Н.Б. Сыровежко, Е.Е. Лесиовская, Н.Ю. Фролова, М.А. Буракова, Н.Е. Тушина // Химико-фармацевтический журнал. – 2000. – Т. 34. – № 9. – C. 31–33.
7. Растительные ресурсы России: Дикорастущие цветковые растения, их компонентный состав и биологическая активность. Т. 3. Семейства Fabaceae – Apiaceae / отв. ред. А.Л. Буданцев. – СПб.; М.: Товарищество научных изданий КМК, 2010. – 601 с.

Корни женьшеня настоящего (Panax ginseng C.A. Meyer.) широко используются в медицинской практике как общетонизирующие и адаптогенные средства. В РФ сырье используется преимущественно для получения настойки, за рубежом – для производства эликсиров, таблеток, комбинированных витаминных препаратов [2, 4, 7].

В РФ осуществляется промышленное культивирование женьшеня как в европейской части страны (Самарская, Брянская, Тверская области), так и на Дальнем Востоке (Приморский край). При сборе корней остается значительная фитомасса надземной части растения. Существуют научные данные о противогипоксическом, актопротекторном, термопротекторном, стресспротекторном и адаптогенном действии извлечений из травы женьшеня [1, 5, 6]. Поэтому с точки зрения ресурсосберегающих технологий актуальным и перспективным является изучение листьев и стеблей женьшеня, сравнение их химического состава с активными компонентами корней и оценка биологической активности.

Целью настоящего исследования являлась оценка качественного и количественного состава сапонинов и флавоноидов в надземной части женьшеня.

Материал и методы исследования

Объектом исследования служили стебли и листья женьшеня настоящего, культивируемого в Самарской области (КФК «Питомник «Женьшень», г. Жигулевск). Сбор растительного материала осуществляли в июне-сентябре 2011–2012 гг. и подвергали сушке в хорошо проветриваемом помещении без доступа прямых солнечных лучей.

В ходе работы применялись такие методы исследования, как тонкослойная хроматография (ТСХ), бумажная и адсорбционная жидкостная колоночная хроматография, кристаллизация и перекристаллизация, УФ-, ЯМР-спектроскопия и масс-спектрометрия, кислотный и ферментативный гидролиз, а также статистические методы обработки данных. Масс-спектры регистрировали на масс-спектрометре Kratos MS-30 (UK), ЯМР-спектры записывали на приборе Bruker AM300. УФ-спектры получали на спектрофотометре «Specord 40» (Analytik Jena).

Результаты исследования и их обсуждение

Методом адсорбционной жидкостной колоночной хроматографии с использованием различных сорбентов (силикагель L 40/100 и полиамид) и путем последующей перекристаллизации из надземной части женьшеня выделено вещество, которое по физико-химическим константам, данным УФ-, ЯМР- и масс-спектрам предварительно охарактеризовано как 3-О-диксилозид 3,5,7,4’ – тетрагидроксифлавона (кемпферол-3-О-диксилозид) (рис. 1).

В гликозидной хроматографической системе н-бутанол – ледяная уксусная кислота – вода (БУВ) в соотношении 4:1:2 вещество имеет хроматографическую подвижность с Rf ~ 0,5 и проявляется в виде ярко-желтого пятна 3 % раствором алюминия хлорида (рис. 2) и в виде оранжевого пятна – раствором диазобензолсульфокислоты в насыщенном растворе натрия карбоната. При перекристаллизации выпадает из спирта в ацетон в виде мелкодисперсного порошка светло-желтого цвета. Спектр выделенного вещества в УФ-области имеет максимумы поглощения при 271 ± 2 и 355 ± 2 нм. УФ-спектры комплексов вещества с алюминия хлоридом м натрия ацетатом, а также дифференциальный спектр представлены на рис. 3 и 4.

3-О-диксилозид кемпферола

Желтое кристаллическое вещество состава С25Н26О16.

Масс-спектр (m/z): 286 (М+ агликона).

УФ-спектр: lmax 271, 355 нм.

1Н-ЯМР-спектр в DMSO-d6 300 МГц (δ, м.д.): 12,67 (с, 1Н, 5-ОН), (д, 9 Гц, 2Н, Н-21,61), 6,86 (д, 9 Гц, 2Н, Н-31,51), 6,43 (д, 2 Гц, 1Н, Н-8), 6,19 (д, 2 Гц, 1Н, Н-6), 5,68 (д, 7 Гц, 1Н, Н-111 ксилозы), 4,53 (1Н, Н-1111 ксилозы), 3,0–4,95 диксилозид (м, 10Н двух молекул ксилозы).

pic_85.tif

Рис. 1. Формула и 1Н-ЯМР-спектр кемпферол-3-О-диксилозида

а pic_86.tif б pic_87.tif

Реактивы: а- 20 % спиртовой раствор ФВК; б - 3 % спиртовой раствор AlCl3

Рис. 2. Схема ТСХ в системе БУВ (4:1:2):1 – извлечение из корней женьшеня (70 % этанол); 2 – извлечение из надземной части женьшеня (70 % этанол); 3 – рабочий стандартный образец (РСО) гинзенозида Rg1; 4 – доминирующий флавоноид женьшеня

Методом дифференциальной УФ-спектрофотометрии определено содержание суммы флавоноидов в листьях и стеблях женьшеня, а также суммарно в траве женьшеня в пересчете на государственный стандартный образец (ГСО) рутин (рис. 5, табл. 1).

Для количественной оценки суммы сапонинов в надземной части женьшеня адаптирована разработанная ранее методика определения суммы сапонинов в корнях женьшеня [3], предусматривающая использование рабочего стандартного образца (РСО) гинзенозида Rg1 или удельного показателя поглощения комплекса гинзенозида с 70 % серной кислотой (25). Методика модифицирована путем введения стадии очистки извлечения из травы женьшеня от хлорофилла и других липофильных веществ, легко окисляющихся серной кислотой, путем экстракции нативного извлечения хлороформом. Содержание суммы сапонинов в стеблях и листьях женьшеня, определенное с помощью данной методики, представлено в табл. 1.

Метрологические характеристики методик количественного определения суммы сапонинов и суммы флавоноидов в надземной части женьшеня представлены в табл. 2 и 3 соответственно.

pic_88.wmf

Рис. 3. Спектры поглощения раствора флавоноида:1 – исходного раствора; 2 – после добавления алюминия хлорида; 3 – дифференциальный спектр исходного раствора на фоне комплекса с алюминия хлоридом

pic_89.wmf

Рис. 4. Спектры поглощения раствора флавоноида:1 – исходного раствора; 2 – после добавления ацетата натрия

pic_90.wmf

Рис. 5. Спектры поглощения извлечения из надземной части женьшеня:1 – исходного раствора (разведения 1:50); 2 – после добавления комплексообразователя алюминия хлорида; 3 – флавоноида, выделенного из травы женьшеня

Таблица 1

Содержание различных групп биологически активных веществ (БАВ) в частях растения, %

Группа БАС

Сырье

Сапонины (в пересчете на РСО гинзенозида Rg1)

Флавоноиды (в пересчете на ГСО рутина)

Корни

6,11 ± 0,272

––

Листья

4,30 ± 0,078

1,20 ± 0,053

Стебли

1,30 ± 0,066

0,50 ± 0,032

Надземная часть (трава)

3,10 ± 0,125

0,90 ± 0,029

Таблица 2

Метрологические характеристики методики количественного определения содержания суммы сапонинов в надземной части женьшеня

n

f

Eqn167.wmf

S

S2

P, %

t (P,f)

ΔX

E, %

7

6

3,10

0,0510

0,0026

95

2,45

± 0,125

± 4,48

Таблица 3

Метрологические характеристики методики количественного определения содержания суммы флавоноидов в надземной части женьшеня

n

f

Eqn167.wmf

S

S2

P, %

t (P,f)

ΔX

E, %

7

6

0,90

0,0118

0,00014

95

2,45

± 0,029

± 3,21

Выводы

1. Из надземной части женьшеня настоящего выделено вещество флавоноидной природы и установлены его спектральные и хроматографические свойства, позволяющие предварительно идентифицировать флавоноид как 3-О-диксилозид кемпферола.

2. Разработана методика количественного определения суммы сапонинов в надземной части женьшеня в пересчете на PCO гинзенозид Rg1.

3. Разработана методика оценки количественного содержания флавоноидов в надземной части женьшеня в пересчете на ГСО рутин.

4. С помощью разработанных методик получены данные о количественном содержании суммы сапонинов и суммы флавоноидов в надземной части женьшеня. Статистическая обработка данных позволяет сделать вывод о том, что ошибки единичных определения составляет ± 4,48 и ± 3,21 % соответственно.

Рецензенты:

Первушкин С.В., д.фарм.н., профессор, зав. кафедрой фармацевтической технологии, ГБОУ ВПО «Самарский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения РФ, г. Самара;

Авдеева Е.В., д.фарм.н., профессор кафедры фармакогнозии с ботаникой и основами фитотерапии, ГБОУ ВПО «Самарский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения РФ, г. Самара.

Работа поступила в редакцию 01.07.2013.


Библиографическая ссылка

Акушская А.С. ХИМИЧЕСКИЙ СОСТАВ НАДЗЕМНОЙ ЧАСТИ ЖЕНЬШЕНЯ // Фундаментальные исследования. – 2013. – № 8-2. – С. 385-388;
URL: https://fundamental-research.ru/ru/article/view?id=31928 (дата обращения: 01.12.2024).

Предлагаем вашему вниманию журналы, издающиеся в издательстве «Академия Естествознания»
(Высокий импакт-фактор РИНЦ, тематика журналов охватывает все научные направления)

«Фундаментальные исследования» список ВАК ИФ РИНЦ = 1,674