Научный журнал

Фундаментальные исследования

ISSN 1812-7339

"Перечень" ВАК

ИФ РИНЦ = 1,674

• Авторы
• Резюме
• Файлы
• Ключевые слова
• Литература

Мусин Ш.И. 1 Фархутдинов Р.Р. 2

---

1 ГОУ ВПО «Башкирский государственный медицинский университет Минздрава России»

2 ЦНИЛ

Проведен анализ показателей хемилюминесценции, общего антиоксидантного статуса и малонового диальдегида в гомогенате лимфатических узлов пациентов с плоскоклеточным раком головы и шеи. Интенсивность ХЛ в модельной системе был статистически достоверно выше, чем в лимфоузлах, пораженных метастазами, по сравнению с лимфоузлами, свободными от метастазов. При этом в группе больных, ранее получавших лечение, не отмечено повышение хемилюминесценции в метастатических и свободных от метастазов лимфоузлах по сравнению с первичными больными. Выявлена достоверная разница между интенсивностью хемилюминесценции в метастатических и свободных от метастазов лимфоузлах у первичных больных. В метастатических лимфоузлах отмечено повышение содержания малонового диальдегида и снижение общего антиоксидантного статуса. Уровень хемилюминесценции в метастатических лимфоузлах зависит от типа дифференцировки метастазов плоскоклеточного рака.

Статья в формате PDF

452 KB

метастазы в лимфатические узлы шеи

плоскоклеточный рак головы и шеи

свободные радикалы

хемилюминесценция

малоновый диальдегид

общий антиоксидантный статус

1. Борунов Е.В., Смирнова Л.П., Щепеткин И.А. Высокая активность антиокислительных ферментов как фактор избегания контроля иммунной системы // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. – 1989. – Т. 4. – C. 41–43.

2. Фархутдинов Р.Р., Тевдорадзе С.И. Методы оценки антиоксидантной активности биологически активных веществ лечебного и профилактического назначения: сб. докл. науч.-практич. семинара. – М., 2005. – С. 147–154.

3. Чиссов В.И., Старинский В.В., Петрова Г.В. (ред.) Состояние онкологической помощи населению России в 2011 году / ФГБУ «МНИОИ им. П.А. Герцена» Минздравсоцразвития России. – М., 2012. – 240 с.

4. Ambrosone C.B. Oxidants and antioxidants in breast cancer // Antioxid. Redox Signal. – 2000. – Vol. 2, Issue 4. – P. 903–917.

5. Emerit I. Reactive oxygen species, chromosome mutation, and cancer: Possible role of clastogenic factors in carcinogenesis // Free Radic. Biol. Med. – 1994. – Vol. 16, Issue 1. – P. 99–109.

6. Resection margins and other prognostic factors regarding surgically treated glottic carcinomas / A.D. Karatzanis, F. Waldfahrer, G. Psychogios [et al.] // J. Surg. Oncol. – 2010. – Vol. 101, Issue 2. – P. 131–136.

7. The role of oxidative stress in chemical carcinogenesis / J.E. Klaunig, Y. Xu, J.S. Isenberg [et al.] // Environ. Health Pers. – 1998. – Vol. 106, Suppl. 1. – P. 289–295.

8. Redox-based escape mechanism from death: the cancer lesson / G. Pani, E. Giannoni, T. Galeotti, P. Chiarugi // Antioxid. Redox Signal. – 2009. – Vol. 11, № 11. – P. 2791–806.

9. Toyokuni S. Reactive oxygen species-induced molecular damage and its application in pathology // Pathol. Int. – 1999. – Vol. 49, Issue 2. – P. 91–102.

10. Cervical lymph node metastasis in oral cancer: the importance of even microscopic extracapsular spread / J.A. Woolgar, S.N. Rogers, D. Lowe [et al.] // Oral Oncol. – 2003. – Vol. 39, № 2. – P. 130–137.

В структуре злокачественных новообразований на плоскоклеточный рак головы и шеи (ПРГШ) приходится около 5 % [3]. Одним из основных параметров, определяющих прогноз лечения ПРГШ, является степень распространения опухолевого процесса на момент диагностики. При обращении в лечебное учреждение метастазы в регионарные лимфоузлы имеют от 30 до 60 % пациентов, что является наиболее важным прогностическим фактором [6, 10]. Так, у больных с метастазами в лимфатические узлы выживаемость снижена на 50 %. Контроль регионарных путей лимфооттока представляет сложную и до конца нерешенную проблему.

В патогенезе злокачественной трансформации и развития опухоли важную роль отводят свободнорадикальному окислению (СРО) – образование активных форм кислорода (АФК) и перекисному окислению липидов (ПОЛ). Имеются данные, которые свидетельствуют, что опухолевые клетки различных типов характеризуются повышенным образованием свободных радикалов и накоплением продуктов окисления[4, 5, 7, 9]. Однако имеется ряд работ, где обнаружена высокая активность антиоксидантных ферментов в опухолевых клетках [1, 8]. Это может являться одной из причин их устойчивости к «окислительному стрессу» и служить фактором развития резистентности опухолей к лечебным воздействиям, в основе механизма действия которых лежит активация СРО.

Во многих работах рассматриваются изменения показателей свободнорадикального окисления в опухолевой ткани или ткани вокруг опухоли, в крови, но не исследовано состояние этого процесса в регионарных лимфатических узлах.

Целью данного исследования было изучение состояния свободнорадикального окисления и антиоксидантной защиты в лимфатических узлах шеи у больных плоскоклеточным раком головы и шеи.

Материалы и методы исследования

Было обследовано 30 пациентов с плоскоклеточным раком головы и шеи, получавших лечение в отделении «Опухоли головы и шеи» Республиканского клинического онкологического диспансера МЗ РБ (г. Уфа). В исследовании включены следующие больные: рак нижней губы – 3, полости рта – 11, ротоглотки – 1, гортаноглотки – 3, гортани – 11, верхнечелюстной пазухи – 1. У всех больных гистологически подтвержден плоскоклеточный рак разной степени дифференцировки. Среди пациентов женщин – 9 (30 %) и мужчин – 21 (70 %), возраст больных варьировался от 45 до 75 лет. Первично обратились в лечебное учреждение 16 пациентов, повторно – 14. Операции разного объема только на путях лимфатического оттока перенесли 13 больных, двоим была выполнена биопсия «сторожевого» лимфоузла, 15 больным проведена расширенная операция на первичном очаге и путях лимфооттока. После операции выделяли лимфоузлы (ЛУ), в гомогенатах которых определяли интенсивность свободнорадикального окисления, количество одного из конечных продуктов ПОЛ – малонового диальдегида (МДМ), оценивали общий антиоксидантный статус.

Концентрацию МДА в образцах измеряли с помощью набора для определения ТБК-активных продуктов фирмы «Агат». Общий антиоксидантный статус оценивали набором фирмы «Randox». Определяли степень изменения хемилюминесценции (ХЛ)-свечения модельной системы, связанной с образованием АФК, при добавлении к ней гомогената ЛУ [2].

Статистическая обработка результатов проводилась в операционной среде Windows XP с использованием статистической программы «Statistica 6.0». Характер распределения количественных признаков оценивался по критерию Колмогорова–Смирнова. Достоверность различий количественных показателей оценивалась по критерию Манна–Уитни, а относительных показателей по χ2-критерию Пирсона.

Результаты исследования и их обсуждение

При добавлении к модельной системе генерирующей АФК гомогената метастатических ЛУ интенсивность ХЛ повышалась (рис. 1), что свидетельствовало о способности опухолевой ткани вырабатывать АФК.

Рис. 1. Уровень показателей хемилюминесценции гомогената лимфатических узлов у первичных больных и больных, перенесших ранее лечение

ХЛ гомогената метастатических ЛУ в модельной системе повышалась в 1,5 раза как у группы первичных больных, так и у пациентов, получавших ранее лечение. Разница между ними статистически была недостоверна (р3 = 0,55).

Гомогенаты ЛУ свободных от метастазов, наоборот, снижали интенсивность ХЛ в модельной системе на 20–30 %, что свидетельствует о способности гомогената ткани подавлять генерацию АФК. Это отмечалось как у первичных пациентов, так и у пациентов, получавших ранее лечение. Разница между ними статистически была недостоверна (р4 = 0,05).

Показатель ХЛ модельной системы при добавлении метастатических ЛУ в группе первичных пациентов и в группе пациентов, ранее получавших лечение, статистически оказался выше, чем ХЛ модельной системы в присутствии гомогената ЛУ, свободных от метастазов (р1 = 0,0004, р2 = 0,041). Полученные результаты согласуются с данными литературы, по которым следует, что в опухолевой ткани поддерживаются высокие показатели свободнорадикального окисления.

Гомогенаты ЛУ, пораженные метастазами и свободные от них, взятые у больного, оказывали различное влияние на ХЛ модельной системы. В группе как первичных, так и повторных больных интенсивность ХЛ гомогената метастатических ЛУ, был выше, чем в ЛУ свободных от метастазов (р1 = 0,013, р2 = 0,117). Таким образом, показатель уровня ХЛ гомогената ткани можно использовать как маркер для диагностики метастатического поражения ЛУ у первичных больных (р1 = 0,013).

При оценке общего антиоксидантного статуса наборами фирмы «Randox» в ЛУ, пораженных метастазами, показатель был в 3 раза ниже, чем в гомогенатах ЛУ, которые были свободны от метастазов.

Рис. 2. Показатели ХЛМ метастатических и нормальных ЛУ, взятых у одних и тех же больных

Содержание конечного продукта перекисного окисления липидов (ПОЛ) – малонового диальдегида, напротив, в метастатических ЛУ оказался в 2 раза выше, чем в лимфатических узлах, свободных от метастазов.

Таким образом, в гомогенатах метастатических лимфатических узлов отмечено повышенное содержание МДА и низкий общий антиоксидантный статус. Чем выше содержание МДА, тем ниже уровень ОАС, что демонстрирует истощение антиоксидантов в опухолевой ткани.

Проведена оценка показателей интенсивности хемилюминесценции гомогената ЛУ в модельной системе в зависимости от гистологического типа опухоли. У 17 больных (56,6 %) были гистологически верифицированные метастазы в ЛУ шеи: у 7 пациентов (41,2 %) выявлены метастазы высокодифференцированного плоскоклеточного рака, у 6 пациентов (35,3 %) – метастазы умеренно-дифференцированного плоскоклеточного рака и у 4 пациентов (23,5 %) – метастазы низкодифференцированного рака. Показатели интенсивности ХЛ в группе больных с метастазами высокодифференцированного плоскоклеточного рака оказались статистически достоверно ниже, чем у пациентов с метастазами умеренно-дифференцированного плоскоклеточного рака (р = 0,01). Полученные данные свидетельствуют, что интенсивность свободнорадикального окисления зависит от гистологического типа опухоли, и требуют дальнейшего детального изучения.

Рис. 3. Показатели ХЛМ в зависимости от гистологического типа метастазов

Выводы

1. Интенсивность хемилюминесценции и содержание МДА в гомогенатах лимфатических узлов, пораженных метастазами, выше, чем в лимфоузлах, свободных от метастазов, в то время как антиоксидантный статус ниже.

2. Повышенный уровень хемилюминесценции, содержания продуктов окисления и снижение антиоксидантной активности в гомогенатах лимфатических узлов может служить маркером их метастатического поражения у первичных больных.

Рецензенты:

Ганцев Ш.Х., д.м.н., профессор, заведующий кафедрой онкологии с курсами ИПО Башкирского государственного медицинского университета, г. Уфа;

Липатов О.Н., д.м.н., профессор, заведующий курса онкологии ИПО Башкирского государственного медицинского университета, г. Уфа.

Работа поступила в редакцию 26.03.2013.

Библиографическая ссылка