В настоящее время существует тенденция к росту числа хронических бактериальных и вирусных заболеваний, для которых характерны непрерывно рецидивирующее течение и малая эффективность антибактериальной и симптоматической терапии. Одними из основных причин, приводящих к хронизации различных заболеваний, являются иммунные нарушения как системного, так и местного характера [1]. Иммунная система, выполняющая защитную функцию при контакте с возбудителями инфекционных заболеваний, может давать сбой, что ведет к нарушению защиты организма от микробов. Одним из таких заболеваний является паратонзиллит - воспаление околоминдаликовой клетчатки.
Небные миндалины расположены на стыке дыхательного и пищеварительного трактов, поэтому на их поверхности задерживаются микроорганизмы, проникающие в организм воздушно-капельным и оральным путями. В этиопатогенезе паратонзиллита известна роль бактерий и иммунодефицитного состояния [3]. Однако, в настоящее время не до конца изучены механизмы развития паратонзиллита.
Вирус Эпштейна-Барр (ВЭБ) относится к семейству γ-герпесвирусов и обладает тропностью эпителиальным клеткам носоглотки и В-лимфоцитам. Полноценный иммунный ответ на внедрение ВЭБ состоит из гуморального и клеточного звеньев. После внедрения ВЭБ в геном В-лимфоцитов они приобретают способность к неограниченной пролиферации. Особенносьтю ВЭБ является избирательное инфицирование В-лимфоцитов, приводящее к их функциональной неполноценности, проявляющейся в выработке антител с низкой способностью к опсонизации, а следовательно и к элиминации чужеродных антигенов - низкоаффинных антител. Т.е., формируется иммунологическая несостоятельность гуморального звена иммунитета на системном уровне [2].
Цель исследования - оценка факторов специфического гуморального иммунитета на системном уровне у практически здоровых лиц и у больных паратонзиллитом при персистенции вируса Эпштейна-Барр в ткани небных миндалин.
Материалы и методы.
Под наблюдением находились 32 больных паратонзиллитом в возрасте от 15 до 62 лет. В биопсийном материале небных миндалин больных проводилась детекция ДНК герпесвирусов (ЦМВ, ВПГ, ВЭБ) методом полимеразной цепной реакции. В качестве контрольной группы выступали 27 практически здоровых лиц.
Определение специфических антител к ядерному (EBNA-1 p72) и капсидному (VCA) белкам вируса Эпштейна-Барр проводили иммуноферментным методом с использованием тест-систем фирмы «Вектор-Бест» (Новосибирская обл.).
Параллельно изучали способность антител к связыванию с ВЭБ - относительную аффинность, которую проводили по методу, предложенному R.W. Luxton и E.J.Thomson [4], иммуноферментным методом с использованием тест-систем фирмы «Вектор-Бест» (Новосибирская обл.) с добавлением раствора соли тиоцианата натрия - NaSCN («Sigma»), разной молярности (3,5; 4,0; 4,5; 5,0 Моль/л).
Результаты исследования.
Было установлено, что ДНК герпесвирусов в ткани небных миндалин выявлялись как у практически здоровых лиц, так и у больных паратонзиллитом. Однако, у больных паратонзиллитом выявляемость герпесвирусов была значительно выше - 71,88%, против 37,04% в группе практически здоровых лиц. В большинстве своем герпесвирусы были представлены вирусом Эпштейна-Барр либо в виде моноинфекции (73,9%), либо в сочетании с ВПГ или ЦМВ (13,1%).
Наряду с выявлением персистенции герпесвирусов в ткани небных миндалин, проводили определение уровня антител к белкам ВЭБ: IgG к ядерному белку (EBNA-1 p72), IgG и IgМ к капсидному белку (VCA) вируса Эпштейна-Барр. Полученные результаты представлены в таблице 1.
Таблица 1. Уровень антител к ядерному и капсидному белкам вируса Эпштейна-Барр у практически здоровых лиц и больных паратонзиллитом в зависимости от выявляемости ВЭБ в ткани небных миндалин
|
Показатели |
Исследуемые группы |
|||
|
Практически здоровые лица (n=27) |
Больные паратонзиллитом (n=32) |
|||
|
Без ВЭБ (n=17) |
С ВЭБ (n=10) |
Без ВЭБ (n=9) |
С ВЭБ (n=23) |
|
|
Уровень IgG к ядерному белку , у.е. |
1,83±0,28 |
1,85±0,47 |
2,29±0,28 |
2,03±0,23 |
|
Уровень IgG к капсидному белку, у.е. |
1,94±0,18 |
0,33±0,42 |
0,98±0,45 |
0,76±0,35** |
|
Уровень IgМ к капсидному белку, у.е. |
0,24±0,06 |
0,16±0,04 |
0,22±0,03 |
0,20±0,02 |
Примечание: **- показатели отличаются от ПЗЛ без ВЭБ со статистической достоверностью (Р<0,01)
Как видно из данных таблицы 1, в целом, уровень антител в группе ПЗЛ без персистенции ВЭБ в ткани небных миндалин, был незначительно выше, чем в других группах обследуемых. Достоверно показатели отличались только в группе больных паратонзиллитом с персистенцией ВЭБ - в данной группе выявлялись низкие значения уровня IgG к VCA (Р<0,01).
Изучение относительной аффинности антител (RHAV) класса G к ядерному белку вируса Эпштейна-Барр (EBNA-1 p72), являющихся маркером перенесенной инфекции и к капсидному белку (VCA) в сыворотке крови показало более выраженные отличия (табл.2).
Как видно из данных таблицы 2, в группе здоровых, неинфицированных ВЭБ, отмечались самые высокие показатели функциональной способности антител - значений относительной аффинности (RHAV) антител класса G к ядерному (EBNA-1 p72) и капсидному (VСA) белкам вируса Эпштейна-Барр.
Таблица 2. Относительная аффинность антител (RHAV) к ядерному и капсидному белкам ВЭБ у практически здоровых лиц и больных паратонзиллитом в зависимости от выявляемости вируса Эпштейна-Барр в ткани небных миндалин
|
Показатели |
Исследуемые группы |
|||
|
Практически здоровые лица (n=27) |
Больные паратонзиллитом (n=32) |
|||
|
Без ВЭБ (n=17) |
С ВЭБ (n=10) |
Без ВЭБ (n=9) |
С ВЭБ (n=20) |
|
|
RHAV IgG к ядерному белку |
829,51±271,35 |
31,45±12,89** |
181,44±108,81 |
160,93±53,39* |
|
RHAV IgG к капсидному белку |
300,01±57,13 |
63,98±29,91** |
111,59±72,32 |
95,75±52,14* |
Примечание: *-показатели отличаются от ПЗЛ без ВЭБ со статистической достоверностью (P<0, 05); **- показатели отличаются от ПЗЛ без ВЭБ со статистической достоверностью (Р<0,01)
В группах обследованных с персистенцией ВЭБ, как здоровых, так и больных паратонзиллитом, были выявлены статистически достоверно низкие значения показателей относительной аффинности обоих видов антител (соответственно Р<0,01 и Р<0,05), что, возможно и обусловливает персистенцию вируса Эпштейна-Барр в небных миндалинах.
Таким образом, персистенция ВЭБ в ткани небных миндплин сопровождается особенностями реагирования гуморального звена иммунной системы против вирусов. У всех носителей вируса Эпштейна-Барр в небных миндалинах, вне зависимости от наличия воспалительной патологии в небных миндалинах, имеет место снижение способности антител класса G связываться с вирусом. У больных с гнойно-воспалительной патологией небных миндалин (паратонзиллит) низкая функциональная активность вируснейтрализующих антител (к капсидному белку) усугубляется их недостаточностью.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
- Нестерова И.В. Программы иммунореабилитации больных вторичными иммунодефицитами //International Journal on Immunorehabilitation.- 1998.- № 9. - Р.40-45.
- Родионова О.В., Александрова Н.В., Букина А.А., Железникова Г.Ф. //Иммунология. - 2003.- №4.- С.233-237.
- Хафизова Ф.А. Патогенетическое лечение паратонзиллита. Дисс...канд. мед.наук.-Уфа, 1996. -139 с.
- Luxton R.W., Thomson E. J. //J. Immunol. Meth.- 1990. - Vol.131.- P.277-282.