Одной из причин неудачи в терапии урогенитального трихомониаза является широкое распространение устойчивых к метронидазолу штаммов Trichomonas vaginalis (Gillette H.,1999), а также выделение атипичных, без ядерных, неподвижных форм возбудителя (Клименко, 2001).
В основе механизма устойчивости лежит процесс нарушения ультраструктуры гидрогеносом, а также способность простейших выбрасывать паракостальные гранулы, ингибирующие действие лекарственных средств. Подобные изменения трихомонад часто сопровождаются переходом типичной грушевидной формы в округлую.
Целью работы явилось изучение морфологических особенностей атипичных форм трихомонад под воздействием антисептических препаратов, используемых для профилактики и местного лечения мочеполовых инфекций.
Проведено исследование воздействия in vitro антисептиков из группы поверхностно-активных веществ 0,01 % раствора мирамистина и 2 % раствора бактерицидного интимного мыла на атипичные формы культуры Trichomonas vaginalis, полученные на питательной среде Тераса по разработанной нами методике. Микроскопический анализ опытной и контрольной проб проводили окрашиванием 1% водным раствором метиленового синего с интервалами в течение 3 часов действия мирамистина и 8 часов действия интимного мыла при t +37º С.
Культура, взятая для исследований, была представлена формами различных размеров: амебовидными: правильными (7х5 мкм, 28,7х20 мкм), крупными (53х28 мкм), гигантскими округлыми или овальными формами (90,2 мкм), цистоподобными (4 мкм, 41 мкм), реже грушевидными жгутиковыми, встречались формы неправильных очертаний различных размеров, округлые формы в мелких колониальных скоплениях. Оболочка клеток ровная, у округлых блестящая. С интервалом времени действия неблагоприятных факторов в опытных пробах отмечались изменения популяции простейших, контрольные пробы оставались без изменений.
Начиная с 10 минут в течение 1 часа воздействия, у крупных форм появлялись щели в оболочке, которые постепенно доходили до 1/3, затем до 2/3 клетки, у округлых начиналось мультисептирование клетки, а с 25 минут действия антисептика происходил процесс почкования. Постепенно крупные клетки фрагментировались на отдельные части, оболочка становилась с повреждениями, принимая зубчатый вид. Также с 25 минут воздействия появлялись клетки в состоянии шизогонии, состоящие из отдельных микроформ размером 2 мкм под общей оболочкой, которые постепенно распадались.
К 2 часам процессы почкования и шизогонии усиливались, клетки трихомонад принимали угловатые очертания, появлялось много фрагментов клеток.
К 3 часам действия препарата мирамистин популяция простейших была представлена в значительном количестве сферическими формами размером 2 мкм, 4 мкм, образовавшимися в результате почкования и шизогонии. Крупные формы встречались редко.
Подобные изменения под влиянием интимного мыла также наблюдались, максимально проявляясь в опытной пробе в течение 8 часов.
После 24 часов действия антисептиков, производили посев опытных проб в питательную среду, и на 5-е сутки культивирования наблюдался рост простейших.
Перечисленный перечень морфологических изменений показывает, что атипичные формы трихомонад обладают повышенными возможностями трансформации, отражающей и доказывающей их высочайшую жизнестойкость.