Проблемы взаимодействия иммунной и эндокринной систем у женщин в менопаузе остаются актуальными в связи с широким распространением различных заболеваний, в первую очередь рака молочной железы (РМЖ). Особый интерес представляют специфические иммунные реакции на половые гормоны. В многочисленных экспериментах показано существенное влияние активной и пассивной иммунизации различных видов животных (самок) против эстрадиола (ЭС) и прогестерона (ПГ) не только на содержание этих, но и других гормонов в сыворотке крови и различных органах, а также на их биологические функции [1, 3–6, 7, 9, 10]. Ранее выявлены характерные особенности образования антител (АТ) против ЭС и ПГ у женщин, больных РМЖ. Предполагается, что специфические АТ образуются в естественных условиях в ответ на появление аддуктов метаболитов стероидных гормонов с макромолекулами организма и обладают способностью модулировать биологические функции гормонов, в частности стимулировать или угнетать рост гормонозависимых опухолей [2, 8].
Цель настоящего исследования – выяснить, взаимосвязано ли содержание ЭС и ПГ с уровнями соответствующих АТ в сыворотке крови у женщин в менопаузе, в том числе при раке молочной железы.
Материалы и методы исследования
Нами были обследованы 139 женщин в постменопаузе. Из них – 74 больные РМЖ, которые поступили на лечение в Областной клинический онкологический диспансер г. Кемерово. Диагноз РМЖ в каждом случае был подтвержден морфологически, рентгенологически и эндоскопически. Средний возраст больных РМЖ – 58,9 ± 10,5 лет. В группу сравнения вошли 65 здоровых женщин без патологии молочной железы (средний возраст – 57,9 ± 7,1 лет).
Забор периферической крови осуществлялся согласно этическим стандартам в соответствии с Хельсинкской декларацией 2000 г. и «Правилами клинической практики в Российской Федерации», утвержденными Приказом Минздрава РФ № 266 от 19.06.2003 г. Все лица, участвовавшие в исследовании, дали информированное письменное согласие на участие в нем.
Концентрацию эстрадиола и прогестерона определяли с помощью коммерческих наборов для ИФА («Иммунотех», г. Москва) согласно инструкции по применению.
Исследование АТ к БП, ЭС и ПГ проводили с помощью модифицированного нами неконкурентного иммуноферментного анализа [4, 10]. Уровни АТ к гаптенам выражали в относительных единицах и вычисляли по формуле
АТ – Х = (ODХ–БСА – ODБСА)/ODБСА,
где Х = БП, ЭС, ПГ; ODХ–БСА – связывание АТ с конъюгатом гаптен-БСА; ODБСА – связывание с БСА.
Статистическую обработку результатов проводили с использованием ППП Statistica 6.0 (StatSoft, Inc., USA). Ненормальный характер распределения показателей определили с помощью критерия Шапиро – Уилка и в дальнейшем статистически значимые различия между группами выявляли с помощью непараметрического U-критерия Манна – Уитни при уровне значимости p < 0,05. Взаимосвязи между уровнями специфичных антител и содержанием стероидных гормонов оценивали с помощью коэффициента корреляции рангов Спирмена.
Результаты исследования и их обсуждение
При анализе стероидных гормонов выяснилось, что количество ЭС в сыворотке крови здоровых женщин в постменопаузе составило 0,15 ± 0,1 нмоль/л, а ПГ – 1,43 ± 0,7 нмоль/л. У больных РМЖ эти показатели равнялись 0,14 ± 0,1 и 1,46 ± 0,5 нмоль/л соответственно. Повышение соотношения концентраций ЭС/ПГ (> 0,1) происходит за счет значимого повышения содержания ЭС и понижения ПГ как у здоровых женщин, так и у больных РМЖ (табл. 1).
Повышение соотношения IgA-АТ против ЭС и IgA-АТ против ПГ (АТ – ЭС/ПГ) > 0,1 происходило за счет повышения уровней АТ–ЭС в обеих группах и, кроме того, за счет понижения уровня АТ-ПГ у больных РМЖ (табл. 2).
У здоровых женщин между содержанием ЭС и ПГ (у) и уровнями соответствующих специфических АТ-ЭС и АТ-ПГ (х) выявлены прямые, линейные, статистически значимые взаимосвязи слабой силы, которые описываются уравнениями регрессии общего вида y = ax + b (табл. 3). Аналогичные взаимосвязи обнаружены между рассчитанными значениями индивидуальных соотношений ЭС/ПГ (у), с одной стороны, и соотношений уровней АТ-ЭС/ПГ (х), с другой стороны.
Таблица 1
Медианы концентраций эстрадиола (ЭС) и прогестерона (ПГ) при повышенных (> Ме) и пониженных (≤ Ме) медианах их соотношений (ЭС/ПГ) в сыворотке крови здоровых женщин и больных раком молочной железы (РМЖ)
|
Гормоны |
Группа сравнения (N = 65) |
Больные РМЖ (N = 74) |
||||
|
ЭС/ПГ > 0,1 |
ЭС/ПГ ≤ 0,1 |
р |
ЭС/ПГ > 0,1 |
ЭС/ПГ ≤ 0,1 |
р |
|
|
Ме ± SD |
Ме ± SD |
Ме ± SD |
Ме ± SD |
|||
|
ЭС |
0,24 ± 0,1 |
0,11 ± 0,03 |
0,000001 |
0,24 ± 0,1 |
0,1 ± 0,04 |
0,000001 |
|
ПГ |
1,34 ± 0,4 |
1,58 ± 0,8 |
0,003 |
1,41 ± 0,4 |
1,75 ± 0,5 |
0,003 |
Таблица 2
Медианы уровней IgA-антител к эстрадиолу и прогестерону (AТ-ЭС, AТ-ПГ) при повышенных (> Ме) и пониженных (≤ Ме) медианах их соотношений (AТ-ЭС/ПГ) в сыворотке крови здоровых женщин и больных раком молочной железы (РМЖ)
|
Антитела |
Группа сравнения (N = 65) |
Больные РМЖ (N = 74) |
||||
|
АТ – ЭС/ПГ > 0,1 |
АТ – ЭС/ПГ ≤ 0,1 |
р |
АТ – ЭС/ПГ > 0,1 |
АТ – ЭС/ПГ ≤ 0,1 |
р |
|
|
Ме ± SD |
Ме ± SD |
Ме ± SD |
Ме ± SD |
|||
|
АТ-ЭС |
5,2 ± 3,4 |
2,8 ± 1,9 |
0,001 |
5,22 ± 3,3 |
3,75 ± 1,9 |
0,045 |
|
АТ-ПГ |
3,7 ± 2,3 |
4,2 ± 2,9 |
0,7 |
4,28 ± 2,6 |
7,8 ± 4,2 |
0,000001 |
Таблица 3
Взаимосвязи содержания эстрадиола (ЭС), прогестерона (ПГ) и их соотношений (ЭС/ПГ) с уровнями антител к эстрадиолу (АТ-ЭС) и прогестерону (АТ-ПГ) и их соотношений в сыворотке крови здоровых женщин и больных раком молочной железы (РМЖ)
|
y |
x |
Группа сравнения |
Больные РМЖ |
||
|
rs (p) |
y = ax + b |
rs (p) |
y = ax + b |
||
|
АТ-ЭС |
ЭС |
0,29 (0,015) |
y = 0,01x + 0,14 |
0,27 (0,01) |
y = 0,01x + 0,13 |
|
АТ-ПГ |
ПГ |
0,33 (0,006) |
y = 0,07x + 1,29 |
0,01 (0,91) |
y = 0,004x + 1,55 |
|
АТ-ЭС/ПГ |
ЭС/ПГ |
0,29 (0,009) |
y = 0,07x + 0,05 |
0,01 (0,94) |
y = 0,001x + 0,12 |
Примечание. rs – коэффициент корреляции по Спирмену.
Корреляционные связи между индивидуальными соотношениями содержания эстрадиола/прогестерона (у) и уровней антител к эстрадиолу/прогестерону (х) у здоровых женщин (1) и больных раком молочной железы (2)
У больных РМЖ статистически значимая взаимосвязь между содержанием ЭС и уровнями АТ-ЭС также имеет место, и ее характер не отличается от такового у здоровых женщин. Не выявлено взаимосвязей между содержанием ПГ и уровнями АТ-ПГ, а также между значениями рассчитанных индивидуальных соотношений ЭС/ПГ и АТ-ЭС/ПГ. Коэффициенты корреляции в последних случаях не превышают 0,01 с очень низкими уровнями значимости (p > 0,9).
Обнаруженные различия между сравниваемыми группами наглядно изображены на рисунке.
Заключение
Таким образом, впервые выявлены прямые корреляционные взаимосвязи между содержанием стероидных гормонов и соответствующих специфических АТ у человека в естественных условиях. Эти взаимосвязи оказались характерными для здоровых женщин в постменопаузе. У больных РМЖ взаимосвязи между содержанием ЭС и уровнями АТ-ЭС сохранились, а между содержанием ПГ и уровнями АТ-ПГ отсутствовали. Причина нарушений этих взаимосвязей, равно как и патогенетическое значение для развития РМЖ, остаются неизвестными. Не исключено, что на взаимодействие АТ-ПГ и ПГ в сыворотке крови оказывают влияние соответствующие антиидиотипические АТ, исследование которых еще предстоит выполнить. Тем не менее ранее высказанное предположение о влиянии АТ к стероидным эндобиотикам, образующимся в естественных условиях, на биологические функции последних получило первое подтверждение.
Авторы благодарят академика Л.Н. Иванову за содействие в развитии выбранного направления исследований; сотрудников лаборатории иммунохимии ИЭЧ СО РАН Аносову Т.П., Аносова М.П., Красильникову К.С., Гурова Е.А. за техническую поддержку настоящей работы.
Рецензенты:
Дружинин В.Г., д.б.н., профессор, заведующий кафедрой генетики биологического факультета, ФГБОУ ВПО «Кемеровский государственный университет», г. Кемерово;
Неверова О.А., д.б.н., профессор, заведующая лабораторией экологического биомониторинга, ФГБУН «Институт экологии человека» Сибирского отделения РАН, г. Кемерово.