Аминокислоты занимают особо важное место среди низкомолекулярных природных органических соединений, синтезируемых растениями. Они обладают широким спектром биологического действия, являются структурными компонентами белков и составной частью ферментов и витаминов, предшественниками гормонов, алкалоидов, антибиотиков. Растения синтезируют все необходимые для метаболизма аминокислоты. Важно отметить, что лекарственные растения часто рассматриваются как источник легкоусвояемой формы аминокислот, микроэлементов и целого комплекса фармакологически активных веществ в биологически доступных концентрациях. Аминокислоты также обеспечивают фармакологическую безопасность и способствуют более легкому усвоению других биологически активных веществ, одновременно потенцируя их эффективность [1, 4]. Сведения об аминокислотном составе побегов розмарина лекарственного в научной литературе отсутствуют. В связи с этим представляло интерес изучение качественного состава и количественного содержания аминокислот, содержащихся в побегах пряно-ароматического растения – розмарина лекарственного, интродуцированного в условиях Кавказских Минеральных Вод.
Розмарин лекарственный (Rosmarinus officinalis L.) в многолетнее вечнозеленое растение из семейства Lamiaceae. В диком виде произрастает в Северной Африке, Турции, на Кипре, в Греции, Италии, Португалии, Испании, на юге Франции. Листья розмарина лекарственного являются официнальным сырьем во многих странах Европы (входят в состав БТФ), в США, Индии и в Китае, используются в гомеопатии. Ведущей группой биологически активных веществ розмарина является эфирное масло (в листьях накапливается до 1,8 %) [5]. Поэтому листья и эфирное масло розмарина широко используются для санации помещений с целью предотвращения размножения микроорганизмов в воздушной среде закрытых помещений, что особенно оправдано в период эпидемий инфекций, передающихся воздушно-капельным путем. Кроме того, сырье розмарина является приправой и прекрасным консервантом пищевых продуктов [6, 7].
Целью настоящей работы явилось исследование аминокислотного состава побегов розмарина лекарственного.
Материалы и методы исследования
Объект исследований – молодые олиственные побеги розмарина лекарственного, заготовленные летом и осенью 2014 года в ботаническом саду ПМФИ [2]. Эксперимент проводили на базе ФГБОУ ВПО «Ставропольский государственный аграрный университет», в аккредитованной научной лаборатории «Корма и обмен веществ».
Для качественного обнаружения аминокислот в водном извлечении побегов розмарина лекарственного использовали нингидриновую реакцию [3]. Количественное определение проводили на аминокислотном анализаторе – ААА 400 (Чехия), узкоспециализированном автоматизированном жидкостном хроматографе с компьютерным управлением, оснащённом постколоночной детекторной системой.
0,2 г сырья (точная навеска) поместили в колбу со шлифом, добавили 20 мл 6Н кислоты хлористоводородной, плотно закрыли крышкой и поместили в сушильный шкаф на 23 часа при температуре 110 °С. После гидролиза колбу охлаждали до комнатной температуры, кислотное извлечение фильтровали и выпаривали досуха в ротационном испарителе, после чего добавили 5 мл воды и снова выпаривали (промывание водой необходимо, чтобы избавиться от остатков кислоты хлористоводородной, которая отрицательно влияет на выход и разделение пиков). Операцию повторяли 2 раза. К выпаренному досуха остатку прилили 50 мл загрузочного буфера (рН – 2,2). Перед введением в ионообменную колонку полученный раствор фильтровали через бумажный фильтр. Приготовление загрузочного буфера: в мерную колбу вместимостью 1 литр добавляли 14 г лимонной кислоты + 11,5 г хлорида натрия + 0,1 г азида натрия + 5 мл тиодигликоля, далее доводили до метки дистиллированной водой [3].
Результаты исследования и их обсуждение
Результаты анализа аминокислотного состава побегов изучаемого растения представлены на рисунке и в таблице.
Аминограмма розмарина лекарственного, выданная прибором – ААА 400
Содержание аминокислот в побегах розмарина лекарственного
|
Название аминокислоты |
Содержание, % |
Название аминокислоты |
Содержание, % |
|
Треонин (Тhr) |
0,45 |
Аргинин (Arg) |
0,50 |
|
Валин (Val) |
0,42 |
Аспарагиновая кислота (Аsp) |
1,06 |
|
Метионин (Met) |
0,06 |
Глутаминовая кислота (Glu) |
0,85 |
|
Изолейцин (Iie) |
0,29 |
Серин (Ser) |
0,39 |
|
Лейцин (Leu) |
0,52 |
Пролин (Pro) |
0,54 |
|
Фенилаланин (Phe) |
0,44 |
Глицин (Gly) |
0,41 |
|
Гистидин (His) |
0,29 |
Аланин (Ala) |
0,41 |
|
Лизин (Lys) |
0,33 |
Тирозин (Tyr) |
0,26 |
|
Сумма аминокислот, % 7,22 |
|||
|
Сырой протеин, % 8,04 |
|||
Согласно данным, представленным в таблице, в побегах розмарина лекарственного содержится 16 аминокислот, из них 9 незаменимых: валин, треонин, метионин, изолейцин, лейцин, фенилаланин, гистидин, лизин и аргинин. Сумма заменимых представлена моноаминомонокарбоновыми, моноаминодикарбоновыми алифатическими и ароматическими кислотами. Незаменимые аминокислоты представлены моноаминомонокарбоновыми и диаминомонокарбоновыми алифатическими, ароматическими и гетероциклическими кислотами. В наибольшем количестве содержатся аспарагиновая кислота (14,65 %), глутаминовая кислота (12,82 %) и лейцин (8,27 %). Биологическая активность идентифицированных аминокислот достаточно хорошо изучена. Так глутаминовая кислота относится к нейромедиаторным аминокислотам, вследствие чего используется при заболеваниях, сопровождающихся нарушениями функции ЦНС [1, 4]. Имеются данные о гепатопротекторной активности аланина, он также регулирует уровень сахара в крови и участвует в регенерации тканей. Для лечения язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки применяют гистидин. Обнаружена способность гистидина снижать уровень алкогольной интоксикации [4].
Впервые определен качественный состав и количественное содержание аминокислот в побегах розмарина лекарственного. Ввиду того, что листья розмарина лекарственного широко используются как пряность и консервант, можно предположить перспективность его использования в качестве источника заменимых и незаменимых аминокислот. Полученные результаты могут быть основанием для более глубокого изучения сырья розмарина лекарственного как источника природных биологически активных веществ.
Рецензенты:
Коновалов Д.А., д.фарм.н., профессор, зам. директора по научной работе, зав. кафедрой фармакогнозии, Пятигорский медико-фармацевтический институт, филиал ГБОУ ВПО ВолгГМУ Минздрава России, г. Пятигорск;
Кодониди И.П., д.фарм.н., доцент кафедры органической химии, Пятигорский медико-фармацевтический институт, филиал ГБОУ ВПО ВолгГМУ Минздрава России, г. Пятигорск.
Работа поступила в редакцию 10.04.2015.