Scientific journal
Fundamental research
ISSN 1812-7339
"Перечень" ВАК
ИФ РИНЦ = 1,674

VAGINAL MICROFLORA AS RELATED TO THE SEVERITY OF PELVIC ADHESIONS IN GIRLS IN THE NEUTRAL PERIOD

Spiridonova N.V. 1 Kazakova A.V. 1
1 Samara State Medical University
The research was performed to explore the peculiarities of the microflora in girls with recurrent synechiae in the neutral period of sexual development in relation to the severity of pelvic adhesions. Methods and materials. The cases of vaginal microbiocenosis in 17 girls with recurrent synechiae were studied through complex quantification polymerase chain reaction (PCR) before and after the treatment with Polygynax Virgo followed by the control study after 6 months. Results and discussion. The microflora of the girls showed the difference in the amount of bacteria Gardnerella vaginalis/Prevotella bivia/Porphyromonas spp. (p = 0,021), Eubacterium spp. (p = 0,039), Peptostreptococcus spp. (p = 0,025), which were more multitudinous in cases with explicit synechiae of the edeae. All the patients received conservative treatment. In the group of girls with vaginal inflammatory processes the study medication Polygynax Virgo was used. The long-term prognosis of the treatment was assessed in 6 months after the end of application. In the group of patients having received the study medication Polygynax Virgo the recurring pelvic adhesions were never observed. In 6 months after the therapy there occurred a consistent decrease of anaerobic organism Gardnerella vaginalis/Prevotella bivia/ Porphyromonas spp. (р = 0,05), Megasphaera spp.,Veillonella spp., Dialister spp. (р = 0,028), Peptostreptococcus spp (р = 0,046). Conclusion. Studied in girls with recurrent synechiae of the edeae and assident vaginal inflammatory processes, the clinical and microbiological efficacy of the complex anti-inflammatory medication Polygynax Virgo was also proved in prevention of recurrent synechiae.
synechiae of the edeae
Nonspecific vulvovaginitis
quantification polymerase chain reaction (PCR)
vaginal microbiocenosis
antimicrobial therapy
neomycin sulfate
Polymyxin B sulfate
nystatin
Polygynax
1. Scheplyagina L.A., Chernov V.M., Kruglova I.V. Vozrastnye osobennosti immuniteta u detey. (Age Peculiarities Of Immunity In Children). Lektsiya dlya vrachey (The Lecture For Doctors), Moscow, Anita-Press Ltd., 2010, 35 p.
2. Zakharova I.N., Korovina N.A., Tvorogova T.M. Vulvovaginity v detskom I podrostkovom vozraste. (Vulvovaginitis in childhood and adolescence). Moscow, 2008, 56 p.
3. Kokolina V.F. Diagnostika I lechenie urogenitalnykh infektsiy u detey I podrostkov. (Diacrisis and treatment of urinogenital infections in children and adolescents). Posobie dlya vrachey (Doctors’ manual). Moscow, Kopiring Ltd., 2010, 36 p.
4. Kosykh S.L., Mozes V.G. Opyt ispolzovaniya kombinirovannogo antibiotika mestnogo deystviya pri nespetsificheskom bakterialnom vulvavaginite u devochek. (The Experience of application of local hybrimycin for nonspecific bacterial vulvovaginitis in girls). «Rossiyskiy vestnik akushera-ginekologa» (Russian Bulletin of obstetrician-gynecologists). 2013, no. 1, 42-45 p.
5. Neretina A.F. Osobennosti obschego I reproductivnogo zdorovya sovremennoy populyatsii devushek Tsentralno-Evropeyskogo regiona Rossii. (Peculiarities of general and reproductive health of contemporary population of adolescent females in Central European part of Russia). Neretina A.F., Enkova E.V. Reproductivnoye zdorovye detey I podrostkov (Reproductive health of children and adolescents), Moscow, 2008, no. 4, 16–20 p.
6. Kazakova A.V., Spiridonova N.V., Lineva O.I. Osnovnie zakonomarnosti reproductivnoy sistemy devochek: posobie dlya vrachey (Basic principles of the reproductive system development of girls: doctors’ manual). Samara, Ofort Ltd., 2013, 52 p.
7. Spiridonova N.V. Nespetsificheskiy vaginit u beremennykh: bozmozhno li lecheniye s sokhraneniem vaginalnikh lactobatsill? (Nonspecific vaginitis in pregnant: possible treatment conserving vaginal lactobacilli). Spiridonova N.V., Basina E.I., Melkadze E.V. Akusherstvo. Ginekologiya. Reproductsiya. T.6, nо. 1, (Obstetrics. Gynecology. Reproduction, Vol.6, nо. 1), 2012, рр. 6–13.
8. Spiridonova N.V. Osobennosti microbnogo peyzazha vlagalischa u devochek so slipchivym protsessom naruzhnikh polovykh organov. (Peculiarities of vaginal microflora in girls with adhesion pocess in the edeae). Spiridonova N.V., Kazakova A.F. Rossiyskiy vestnik akushera-ginekologa (Russian Bulletin of obstetrician-gynecologists). Moscow, 2014, no. 2, рр. 82–86.
9. Tkachenko L.V. Effectivnost lokalnoy immunotropnoy terapii ulvovaginita u devochek c atopicheskim dermatitom (Effectiveness of local biologic response modifier therapy of vulvovaginitis in girls with atopic dermatitis). Tkachenko L.V., Frolova N.V. Akusherstvo I ginekologiya (Obstetrics And Gynecology), Moscow, 2006, no. 6, рр. 43–46.
10. Uvarova E.V. Detskaya I podrostkovaya ginekologiya. Rukovodstvo dlya vrachey. (Children and Adolescents’ Gynecology. The Doctors’ Guidebook). Moscow, Literra, 2009, 375 p.

Сращение малых половых губ в настоящее время является наиболее распространенной гинекологической патологией у девочек младенческого и раннего детского возраста [5, 10]. К развитию синехий у детей предрасполагают интимно прилегающие друг к другу малые половые губы в нижней трети, которые имеют хорошую васкуляризацию и тонкий эпителий [2, 3].

Диагностика синехий не представляет сложности как для родителей, так и для гинеколога. А вот вопрос о причинах возникновения и факторах, которые способствуют формированию этой патологии, остается открытым и дискуссионным.

На современном этапе коррекция слипчивого процесса гениталий имеет несколько подходов.

«Золотым стандартом» лечения сращений малых половых губ у детей, которые не сопровождаются нарушениями мочеиспускания и другими симптомами, является консервативная терапия, заключающаяся в локальном нанесении эстрогенсодержащих кремов. Механизм действия эстрогенов заключается в ускорении пролиферации эпителия вульвы, влагалища и цервикального канала, что повышает защитные свойства слизистых оболочек [8]. Использование данных препаратов ведет к размягчению и расхождению сращений, хотя для этого требуется длительная терапия.

В отсутствие эффекта от консервативного лечения и/или при наличии полного сращения малых половых губ с нарушением оттока мочи из мочевого пузыря показана мануальная или хирургическая коррекция сращения с обязательным использованием местных анестезирующих средств. У данных методик есть свои недостатки: травмирующее действие на ткани, которое может привести к нарушению заживления краев малых половых губ, а также психологический стресс, которому в данном случае подвергается ребенок. По мнению психотерапевтов, такая манипуляция, как разъединение синехий с последующей неоднократной обработкой раневой поверхности, возможными рецидивами (повторными хирургическими вмешательствами), для маленьких детей является и физической, и психологической травмой. Происходит «переработка» травмирующих действий, ощущений в виде переживаний и развитие более-менее длительного состояния аффекта во время каждой данной манипуляции. Психическая травма (разлука с матерью, физическая боль, попадание в незнакомую обстановку, чужие лица) проявляется у ребенка нарушенным поведением и негативными эмоциональными знаками, такими как плаксивость, нарушение сна, аппетита, появление страхов и т.д. [10].

Психотравма накладывается в раннем детстве на эмоционально лабильную высшую нервную систему, дисфункция которой приводит к образному запоминанию тех или иных неприятных событий жизни, фиксации на них, что может способствовать развитию невротических расстройств в будущем, вплоть до психосексуальных в подростковом возрасте [9, 4].

В будущем и мануальное разведение синехий, и хирургическое в большом проценте случаев приводят к формированию более плотных фибрознотканных сращений особенно при частом и необоснованном применении данных методов лечения [3].

Но несмотря на явные недостатки мануальной и хирургической коррекции синехий до настоящего времени нет единого мнения по поводу оптимального метода лечения этой патологии: ряд авторов отдает преимущество только оперативному лечению, другие – настаивают на дальнейшем назначении в течение нескольких дней эстрогенсодержащих мазей с целью профилактики рецидивов заболевания [1, 2, 9].

Целью нашего исследования явилось изучение особенностей микробного пейзажа у девочек с рецидивирующими синехиями в зависимости от степени тяжести слипчивого процесса гениталий в нейтральном периоде полового развития.

Материалы и методы исследования

Исследование проводилось на базе детского отделения ГБУЗ СО ГП № 13 города Самары.

На первом этапе исследования проведен анализ анамнестических данных 84 девочек с синехиями (вес, рост при рождении, сроки грудного вскармливания, наличие соматической патологии) и данных акушерского анамнеза матерей, с изучением микробного пейзажа влагалища у 25 девочек.

В качестве контроля мы сформировали группу здоровых девочек в количестве 20 человек, проходивших профилактический осмотр, с отсутствием жалоб, неизмененной слизистой влагалища, а также физиологическими выделениями из половых путей с изучением микробного пейзажа влагалища у 8 девочек.

На втором этапе исследования у 17 девочек с рецидивирующими синехиями проведено изучение состояния влагалищного микробиоценоза при помощи комплексной количественной полимеразной цепной реакции (ПЦР) с использованием тест-систем «Фемофлор-17». Девочки с рецидивирующими синехиями были разделены на подгруппы в зависимости от выраженности слипчивого процесса: 10 – с плотными синехиями протяженностью 2/3 половой щели, и 7 – с тонкими, протяженностью меньше 1/3 половой щели.

Материалом для исследования методом комплексной количественной ПЦР у девочек являлся соскоб эпителиальных клеток, который забирался из заднего свода влагалища через гименальное кольцо.

Спектр диагностируемых показателей включал КВМ (контроль взятия материала), ОБМ (общая бактериальная масса), наличие микоплазм (Mycoplasma hominis, Ureaplasma spp.), дрожжеподобных грибов (Candida spp.); Lactobacillus spp., (Enterobacterium spp., Streptococcus spp., Staphylococcus spp.), (Gardnerella vaginalis/Prevotella bivia/Porphyromonas spp., Eubacterium spp., Sneathia spp./Leptotrichia spp./Fusobacterium spp., Megasphaera spp./Veillonella spp./Dialister spp., Lachnobacterium spp./Clostridium spp., Mobiluncus spp./Corinebacterium spp., Peptostreptococcus spp., Atopobium vaginae), а также идентификация патогенов (Mycoplasma genitalium). Заключение по результатам диагностического теста Real-Time PCR получали в виде диаграммы, которая описывала вид микробной флоры влагалища.

Рассчитывали абсолютные (в логарифмах полученных показателей бактериальной массы условно-патогенного организма Lg10УПМ) и относительные показатели (разница логарифмов полученных показателей общей бактериальной массы условно-патогенного организма (УПМ) и общей бактериальной массы (ОБМ) – Lg10УПМ-Lg10ОБМ). Оценку наличия Candida spp., Mycoplasma hominis, Ureaplasma spp., Mycoplasma genitalium проводили только в абсолютных показателях.

На 3-ем этапе исследования мы изучили состояние биоценоза влагалища у 9 девочек с синехиями и наличием воспалительного процесса вульвы до и после лечения препаратом Полижинакс® Вирго с контрольным исследованием через 6 месяцев.

Изучение анамнеза и обследование ребенка осуществлялись с письменного согласия родителей или лица, их заменяющего.

Статистическая обработка данных проводилась с использованием компьютерного программного пакета (Microsoft Office Excel 2007).

Результаты исследования и их обсуждение

С апреля 2011 года по февраль 2012 года в детском амбулаторном отделении ГБУЗ СО ГП № 13 города Самары в кабинет детского гинеколога обратилось 662 девочки. Из них 567 девочек в возрасте до 8 лет, что составило 85,6 % от всех пациенток.

Среди всех девочек нейтрального возраста синехии наружных половых органов встречались у 84 (15 %), из них с рецидивами патологического процесса – 20 случаев (24 % от всех девочек с синехиями), что согласуется с данными литературы [3, 9].

При анализе паритета матерей девочек с синехиями выявлено, что от первой беременности родилось 52 % обследуемых, от повторных ‒ 48 %. Наиболее частым осложнением гестации у матерей девочек являлась угроза прерывания беременности (25 %), плацентарная недостаточность (12 %), вульвовагиниты сопутствовали в 36 % (p = 0,019) случаев и чаще встречались в третьем триместре. Вес новорожденных девочек колебался от 2700 до 4500 грамм и в среднем был равен 3247,24 ± 143,92 грамм. Рост девочек был в физиологических значениях от 49 до 59 см, в среднем 53,76 ± 0,93 см. Средние сроки грудного вскармливания соответствовали 1 году, с индивидуальными колебаниями от 2 месяцев до 2 лет. Достоверно меньше, в среднем 6 месяцев, было грудное вскармливание у здоровых девочек, чем у девочек с синехиями, где этот показатель был равен 12 месяцам (p = 0,048).

Из соматической патологии ребенка хотелось бы отметить частые острые респираторные заболевания (48 %) и хронические запоры (18 %), а также высокую встречаемость аллергий (50 %). Перинатальная энцефалопатия на первом году жизни была диагностирована в 18 % случаев.

Средний возраст возникновения синехий был равен 18 месяцам.

Отмечалась тенденция в частом использовании антибактериальных препаратов (p = 0,059) у детей по поводу воспалительных заболеваний в группе девочек с наличием слипчивого процесса гениталий. Так, у 12 % девочек синехии возникли после применения антибиотиков по поводу воспалительных процессов верхних дыхательных путей.

По результатам комплексной количественной полимеразной цепной реакции (ПЦР) с использованием тест-систем «Фемофлор-17» в группе с синехиями выявлено преобладание Lactobacillus (р = 0,008), Megasphera spp.(р = 0,015), Eubacterium spp. (р = 0,033), и Gardnerella vaginalis (р = 0,041). Также отмечалась тенденция к преобладанию аэробных микроорганизмов Streptococcus spp., Enterobacteriaceae, что указывает на преобладание дисбиотических процессов у девочек с наличием синехий. Микоплазма в клинически незначимом количестве (101,00 ± 0,00) встречалась только у здоровых девочек. Тогда как уреаплазма (105,9 ± 0,00) ‒ у девочек с синехиями.

После изучения микробного пейзажа влагалища девочек с синехиями в сравнении с группой контроля мы проанализировали биоценоз у девочек с рецидивирующими синехиями в зависимости от степени тяжести слипчивого процесса гениталий (табл. 1).

Таблица 1

Биоценоз влагалища девочек с синехиями в зависимости от степени тяжести слипчивого процесса гениталий у девочек нейтрального периода

 

Тонкие синехии < 1/3 половой щели

Плотные синехии 2/3 половой щели

р

10M ± m

10M ± m

 

Lactobacillus spp.

1,000

Enterobacteriaceae

103,00

103,65 ± 0,65

0,713

Streptococcus spp.

104,42 ± 0,24

104,71 ± 0,28

0,769

Staphylococcus spp.

103,37 ± 0,09

103,78 ± 0,31

0,672

Gardnerella vaginalis, Prevotella bivia, Porphyromonas spp.

105,13 ± 0,41

106,05 ± 0,17

0,021

Eubacterium spp.

104,97 ± 0,27

105,85 ± 0,23

0,039

Sneathia spp., Leptotrichia spp., Fusobacterium spp.

104,23 ± 0,54

104,62 ± 0,42

0,959

Megasphaera spp., Veillonella spp., Dialister spp.

104,64 ± 0,39

105,37 ± 0,20

0,155

Lachnobacterium spp., Clostridium spp.

103,65 ± 0,18

104,18 ± 0,20

0,092

Mobiluncus spp., Corinebacterium spp.

104,40 ± 0,26

104,94 ± 0,22

0,282

Peptostreptococcus spp.

104,39 ± 0,27

105,53 ± 0,33

0,025

Atopobium vaginae

102,10 ± 0,20

102,26 ± 0,60

0,413

Candida spp.

103,30

0,403

Mycoplasma hominis

1,000

Ureaplasma

105,90

0,232

 

Статистический анализ микробного пейзажа в группах показал достоверную разницу количественного содержания микроорганизмов Gardnerella vaginalis, Prevotella bivia, Porphyromonas spp. (p = 0,021), Eubacterium spp. (p = 0,039), Peptostreptococcus spp. (p = 0,025) с преобладанием этих микроорганизмов в группе с выраженными синехиями наружных половых органов. Имели тенденцию к увеличению Lachnobacterium spp., Clostridium spp.

Всем девочкам с рецидивирующими синехиями вульвы мы выбрали консервативную тактику лечения, заключающуюся в местном применении эстрогенсодержащего крема с 1,0 мг эстриола. Аппликации на область синехий проводились самостоятельно родителями 1 раз в сутки.

Особое внимание мы обратили на девочек с синехиями и наличием воспалительного процесса вульвы. В этой группе в качестве комплексного противовоспалительного средства был использован препарат Полижинакс® Вирго. Выбор данного препарата связан с наиболее удобной формой введения, представленной в виде капсулы для вагинальных инстилляций, содержащих лекарственную эмульсию (Лаборатория Иннотек Интернасиональ, Франция), в состав которой входят неомицина сульфат 35 ООО ME – аминогликозидный антибиотик широкого спектра действия; полимиксина В сульфат 35 ООО ME – антибиотик полипептидной природы; нистатин 100 000 ME – противогрибковый антибиотик, обладающий фунгицидным и фунгистатическим действием, а также диметилполисиллоксан в форме геля, обладающего обволакивающим, противозудным действием, улучшающего трофические процессы в слизистой оболочке влагалища и способствующего проникновению активных компонентов препарата в складки слизистой оболочки влагалища.

Назначение препарата осуществлялось в день обращения при наличии жалоб и объективных признаков воспаления в качестве эмпирической терапии. Интравагинальная инстилляция выполнялась перед сном, после вечернего туалета в течение 6 дней.

Расхождение синехий в группе девочек, пролеченных эстрогенсодержащим кремом в сочетании с эмульсией Полижинакс® Вирго в 67 % случаев произошло на 7 сутки, у 33 % девочек до 14 суток от начала лечения. В группе девочек с синехиями без воспаления, пролеченных эстрогенсодержащим кремом, расхождение синехий произошло в 89 % случаев до 7 суток, у 1 девочки на 21 сутки (девочка была с рецидивированием процесса более двух раз в год на протяжении последних трех лет).

Отдаленный прогноз терапии оценивался спустя 6 месяцев после проведенного лечения.

Рецидивирования слипчивого процесса в группе пациенток, пролеченных препаратом Полижинакс® Вирго, не отмечалось ни в одном случае.

Наряду с клинической эффективностью лечения нами был изучен биоценоз половых путей девочек до лечения и спустя 6 месяцев после терапии. Результаты представлены в табл. 2.

После терапии произошло достоверное снижение анаэробных организмов Gardnerella vaginalis, Prevotella bivia, Porphyromonas spp. (р = 0,05), Megasphaera spp., Veillonella spp., Dialister spp. (р = 0,028), Peptostreptococcus spp (р = 0,046), а также имелась тенденция к снижению Sneathia spp., Leptotrichia spp., Fusobacterium spp. Atopobium vaginae, представляющая собой грамположительную анаэробную палочку, часто ассоциированную с рецидивирующим бактериальным вагинозом, не обнаружена у девочек после проведенной терапии.

На основании полученных результатов эффективность лечения данным препаратом подтверждена не только клинически отсутствием рецидивов синехий, но и изменениями влагалищного биотопа с достоверным уменьшением условно-патогенных анаэробных микроорганизмов Gardnerella vaginalis, Prevotella bivia, Porphyromonas spp., Megasphaera spp., Veillonella spp., Dialister spp., Peptostreptococcus spp.

Таблица 2

Количественное соотношение микроорганизмов во влагалище у девочек до лечения и спустя 6 месяцев после применения Полижинакс® Вирго

Микроорганизм

До лечения

После лечения

p

M ± m

M ± m

Lactobacillus spp.

1,000

Enterobacteriaceae

103,00

103,40

0,655

Streptococcus spp.

105,18 ± 0,39

103,90 ± 0,44

0,144

Staphylococcus spp.

103,73 ± 0,49

103,80

0,465

Gardnerella vaginalis, Prevotella bivia, Porphyromonas spp.

106,07 ± 0,22

104,80 ± 0,38

0,058

Eubacterium spp.

105,90 ± 0,22

105,28 ± 0,27

0,207

Sneathia spp., Leptotrichia spp., Fusobacterium spp.

104,30 ± 0,50

105,20

0,080

Megasphaera spp., Veillonella spp., Dialister spp.

105,58 ± 0,17

104,38 ± 0,34

0,028

Lachnobacterium spp., Clostridium spp.

104,04 ± 0,29

104,70 ± 0,20

0,225

Mobiluncus spp., Corinebacterium spp.

104,97 ± 0,30

104,38 ± 0,34

0,173

Peptostreptococcus spp.

105,70 ± 0,30

104,60 ± 0,23

0,046

Atopobium vaginae

102,00 ± 0,10

0,180

Candida spp.

1,000

Mycoplasma hominis

1,000

Ureaplasma

105,90

0,317

Таким образом, на основании полученного материала нами сформулированы выводы:

1. Факторами риска развития синехий вульвы у девочек нейтрального возраста следует считать наличие вульвовагинита у матери во время беременности (p = 0,019) и длительный период грудного вскармливания (p = 0,048).

2. У девочек с наличием синехий происходит смещение биоценоза влагалища в сторону преобладания дисбиотических процессов.

3. Для выраженного слипчивого процесса гениталий характерен сдвиг микробиологических характеристик влагалищной среды в сторону анаэробного дисбиоза.

4. Применение комплексного противовоспалительного средства Полижинакс® Вирго у девочек с синехиями наружных половых органов и сопутствующим воспалительным процессом вульвы имеет клиническую и микробиологическую эффективность в профилактике рецидивирующих синехий.

Рецензенты:

Липатов И.С., д.м.н., профессор кафедры акушерства и гинекологии № 1, ГБОУ ВПО СамГМУ Министерства здравоохранения РФ, г. Самара;

Целкович Л.С., д.м.н., профессор, заведующая кафедрой акушерства и гинекологии № 2, ГБОУ ВПО СамГМУ Министерства здравоохранения РФ, г. Самара.

Работа поступила в редакцию 06.03.2015.