Scientific journal

Fundamental research

ISSN 1812-7339

"Перечень" ВАК

ИФ РИНЦ = 1,674

Персонифицированное лечение требует контроля on-line применения лекарственных средств. Большинство современных методов, используемых в диагностике заболеваний и для дальнейшего контроля проводимой терапии, регистрируют изменения структуры и функций тканей и органов. В свою очередь, постоянство структуры и функции поддерживается системой регуляторных процессов. Процессы регуляции основываются на рецепторно-информационных взаимодействиях всех клеток организма [1, 11], а также организма и окружающей среды [13, 15]. С этих позиций закономерно использовать методы, позволяющие оценить данные процессы. К таким методам можно отнести акупунктурную диагностику. В этом случае регистрируется тот или иной показатель биологически активных точек (БАТ), что позволяет судить о функции канала, связанного с состоянием внутренних органов, отдельных функциональных систем и организма в целом [12, 14].

Особый интерес, на наш взгляд, вызывают методики, позволяющие оценивать состояние внутренних органов по температурным параметрам БАТ [7, 9]. В этой связи возникла необходимость детального изучения возможности применения термопунктурной оценки БАТ для оценки действия лекарственных средств в режиме реального времени.

Цель исследования – разработать параметры способа ежесекундной регистрации разности температуры между биологически активной точкой и интактной зоной кожи для оценки регуляторных изменений при действии лекарственных средств.

Материал и методы исследования

Эксперименты проведены на 40 половозрелых кроликах-самцах породы шиншилла массой 2,8–3,3 кг, в соответствии с положениями о правилах работы с животными и согласно руководствам по экспериментальным исследованиям под редакцией Р.У. Хабриева (2005) [5], Н.Н. Каркищенко (2010) [6]. Животные были распределены на 4 группы, по 10 кроликов в каждой. Эвтаназия животных осуществлялась под обязательным эфирным наркозом.

Ежесекундная регистрация разности температур (DТ) между БАТ и интактной зоной кожи (для исключения влияния на температуру внешних факторов) проводилась посредством автономного регистратора дифференциальной температуры (Патент на полезную модель № 134028) [4].

Исследование разности температуры между БАТ и интактной зоной кожи в эксперименте и клинике проводилось в стандартных условиях при температуре 20–25 °С в одно и то же время суток. До начала термометрии испытуемые животные и пациенты находились в помещении не менее 30 мин. При помощи специального щупа, используемого в электропунктуре по методу Р. Фолля, и на основе топографо-анатомических ориентиров определялись БАТ. На акупунктурную точку устанавливался основной датчик термопары, а второй накладывался на интактную зону на расстоянии 1–1,5 см.

Динамика DТ БАТ оценивалась непрерывно в течение 2 минут, изменения фиксировались каждую секунду в виде термограмм. Полученные данные заносились в формализованные карты и сохранялись в базе данных. Описание и оценка динамики изменения термограмм DТ БАТ производились по 14 показателям, расчет которых зарегистрирован в Реестре программ для ЭВМ (свидетельство № 2011611929 от 2.03.2011).

В эксперименте оценивалось действие кортексина и гомеопатического средства Арника С6 в условиях патологического процесса – на модели экспериментальной ишемии головного мозга (ЭИГМ). Моделировали ЭИГМ путем лигирования правой общей сонной артерии [8]. Прооперированные животные были разделены на 3 группы: 1-я – контрольная, получала воду для инъекций, в объеме 2 мл/кг массы животного, 2-я – кортексин (ГЕРОФАРМ – Россия) в дозе 0,6 мг/кг, 3-я – Арника С6 (ООО «ОЛЛО») внутрь из расчета 5 крупинок в 100 мл воды в свободном доступе. Исследуемые вещества вводились внутримышечно в заднюю поверхность бедра, за исключением Арники С6, предварительно растворенной в воде, которую животные получали перорально в свободном доступе, начиная с первых суток после операции, ежедневно в течение 14 дней в одно и то же время.

Регистрацию разности температур проводили всем кроликам до операции (до ЭИГМ) и на 1, 7 и 14 сутки после операции. Морфологическое исследование проводилось всем животным на 14 сутки (кора лобной доли больших полушарий) после ЭИГМ и введения препаратов. Полученные срезы окрашивали толуидиновым синим по Нисслю и гематоксилином Караци – эозином.

Клиническая часть работы была проведена с участием 30 пациентов обоего пола с диагнозом «Острое нарушение мозгового кровообращения по типу ишемического инсульта» и 10 здоровых добровольцев. При проведении исследования были соблюдены все этические нормы. В исследование были включены больные с ишемическим инсультом, подтвержденным в 100 % случаев компьютерной томографией головного мозга. Исследования пациентов проводились только в условиях стационара с 1 по 14 день с момента поступления в нейро-сосудистое отделение. Разница температуры регистрировалась в БАТ Gi4. Все больные, включенные в исследование, были разделены на 3 группы: 1-я группа – стандартная фармакотерапия (СФТ); 2-я группа – СФТ+КР, пациенты получали на фоне СФТ кортексин в суточной дозе 10 мг однократно внутримышечно; 3-я группа – СФТ+Арника С6. Каждый больной и здоровый доброволец обследовался 3 раза: на 1, 7-е и на 14-е сутки.

Для объективной оценки тяжести ишемического инсульта и контроля проводимого лечения в те же сроки использовалась комплексная оценка по клинико-неврологическим шкалам: NIHSS, Оригинальной, шкале психо-эмоционального статуса САН и уровня социальной адаптации Бартел. Все цифровые материалы обработаны статистически [2, 10].

Результаты исследования и их обсуждение

Ежесекундные изменения DТ БАТ можно проследить на дисплее компьютера.

При анализе изменений термограмм здоровых животных и людей в течение 2 мин отмечаются отклонения разницы температуры от средней линии в одну (+) и другую (–) стороны приблизительно равное количество раз и на одинаковое расстояние. Эти отклонения мы оцениваем как регуляторные импульсы по данному меридиану, характеризующие регуляторное воздействие на изменение метаболизма или функции, в данном случае сердечно-сосудистой системы. Однако для выявления различий требуются количественные характеристики. Нами использован принцип, применяемый в методике Ю.М. Баевского (1987) [3] для оценки ритмограмм сердца. С этой целью нами предлагаются следующие показатели:

1. Общее количество отклонений со знаком «+» и знаком «–», позволяющее оценить частоту регуляторных воздействий в течение 2 минут.

2. Этот же показатель, но за 1 минуту, чем выше эти показатели, тем активнее происходит корригирующее влияние канала.

3. Количество изменений со знаком «+» в минуту, т.е. частоту регуляторных воздействий со знаком «+».

4. Этот же показатель, но для изменений со знаком «–».

5. Соотношение между количеством изменений со знаком «+» и знаком «–» в минуту, позволяющее установить превалирование одного или другого (противоположного) регуляторного воздействия при изменениях в сердечно-сосудистой системе.

6. Длительность изменений со знаком «+» в 1 минуту, т.е. устойчивость однотипных регуляторных посылов.

7. То же, но для изменений со знаком «–» в минуту.

8. Соотношение между длительностью импульсаций со знаком «+» и знаком «–», что определяет устойчивость превалирующего регуляторного процесса в 1 минуту.

9. Индекс регуляции по частоте как соотношение импульсаций со знаком «+» и знаком «–». Преобладание частоты определяется так: если показатель более 1, то преобладают воздействия со знаком «+», если меньше 1, то со знаком «–».

10. Индекс регуляции по длительности рассчитывается как предыдущий, но с использованием не частоты импульсаций, а их длительности.

11. Среднее количество выраженности (амплитуда) импульсаций со знаком «+» за 2 мин, что позволяет оценить интенсивность регуляторных воздействия со знаком «+».

12. То же самое, но со знаком «–».

13. Частота сегментов без изменений амплитуды за 1 минуту, характеризующая отсутствие регуляторных воздействий по частоте.

14. Длительность сегментов без изменения амплитуды за 1 минуту, характеризующая отсутствие регуляторных воздействий по длительности.

Эти показатели рассчитывались с помощью специальной компьютерной программы и позволили установить существенные различия в состоянии регуляторных процессов при патологии и действии лекарственных средств. В табл. 1 представлены показатели здоровых лиц при наблюдении в течение 14 суток. Они достаточно стабильны.

Экспериментальные исследования

В контрольном исследовании животным вводили внутривенно в краевую вену левого уха воду для инъекций в дозе 20 мл. В результате проведенного эксперимента установлено, что значения всех 14 показателей оценки термограмм, полученных сразу после введения воды для инъекций, через 1, 2 и 3 часа после введения, статистически значимо не отличались от исходных.

В экспериментах на животных с ЭИГМ на 1 сутки после операции установлена активация функции меридиана: увеличение на 17–19 % (р < 0,05) 1, 2, 3, 4, 6 и 7 показателей, характеризующих усиление 2 противоположных регуляторных процессов, как со знаком «+», так и со знаком «–» в 1 мин, а также их устойчивости в 1 мин. Уменьшение величин 13 и 14 показателей на 13–14 % (р < 0,05) подтверждает эту активацию.

Изучение структуры коры больших полушарий у животных показало наличие некротически измененных нервных клеток по коагуляционному (пикноморфные нейроциты) и колликвационному (клетки-тени) типам. В III слое лобной коры больших полушарий отмечалось значительное уменьшение численности нейронов. Среди сохранившихся нейроцитов обнаруживалось значительное количество дистрофически измененных клеток, в большей степени по гипохромному типу, что характеризовалось вакуолизацией цитоплазмы, фокальным лизисом субстанции Ниссля, смещением ядер к периферии. В микрососудах коры ГМ отмечались признаки стаза и полного выключения кровотока.

Таблица 1

Показатели ∆Т БАТ Gi4 (р.е., М ± m) у здоровых лиц (n = 20)

На 7 сутки после ЭИГМ и введения кортексина были увеличены (р < 0,05) следующие показатели: 1-й – на 30,6 %, 2-й – на 32,3 %, 3-й – на 27,3 %, 4 – на 36,5 %, 6-й – на 38,6 % и 7-й – на 39,2 %. Значения 14-го показателя уменьшались на 32,5 % (р < 0,05). По сравнению со значениями, полученными на 1 сутки после ЭИГМ, отмечалась динамика к повышению (р < 0,05) значений показателей ∆Т БАТ: 2, 4, 6, 7 и 14 – на 13,4; 15,4; 18,0; 17,0 и 16,6 % соответственно. На 14 сутки после моделирования ЭИГМ, на фоне введения кортексина, значения большинства показателей дифференциальной термометрии БАТ приблизились к исходному уровню, соответствующему здоровым животным.

Эти данные свидетельствуют о возможности определить с помощью динамической термометрии БАТ возможность лечебного действия препарата, что подтверждается и морфологическим исследованием. Морфологические изменения нейронов в этой группе выражались в наличии умеренных дистрофических и адаптационных изменений, нейроны лобной коры были представлены нормохромными, гипо- и гиперхромными клетками без выраженных дистрофических и деструктивных изменений. Пикнотически измененные нейроны и клетки-тени встречались значительно реже, чем в группе без применения препарата, при этом практически отсутствовали признаки глубоких деструктивных изменений, чаще встречались гиперхромные нейроны с крупным ядром и выраженным ядрышком.

При использовании в качестве лечебного средства гомеопатического препарата Арника С6 на 7-е сутки исследования установлено увеличение 5 показателя на 75 %,(р < 0,05); а показателя 8 уменьшение – на 12,9 %, (р < 0,001). Незначительные изменения ∆Т БАТ были отмечены по остальным показателям. Эти результаты указывают на увеличение выраженности флюктуаций со знаком «+» (показатель 5) и снижение их устойчивости (показатель 8), что характеризует увеличение активности регуляторных процессов в организме животных. На 14-е сутки термограмма существенно не отличается от термограммы здоровых животных. Следовательно, показатели дифференциальной термометрии отражают действие и гомеопатического препарата.

Клинические исследования

При апробации методики в условиях клиники эти факты подтвердились (табл. 2).

Представленные в таблице данные свидетельствуют о том, что степень восстановления неврологических нарушений, психоэмоционального статуса и повышения качества жизни больных в остром периоде ишемического инсульта возрастала в следующем порядке:

СФТ < CФТ + КР < СФТ + Арника С6.

Динамика изменения показателей дифференциальной термометрии БАТ Gi4 группы СФТ носила положительный характер. Применение СФТ привело к выраженному увеличению показателей дифференциальной термометрии на 7 и 14 сутки относительно исходного уровня. Так, на 7 сутки исследования наблюдалось увеличение (р < 0,05) следующих показателей более, чем на 20 %: 1-го – на 21,5 %, 2-го – на 20,6 %, 3-го – на 20,6, 4-го – на 20,6 %, 6-го – на 20,7 %, 7-го – на 22,0 %). К 14 суткам регистрируемые нами показатели продолжали увеличиваться: по показателям 6, 7 и 13 более чем на 30 % (р < 0,05), а по показателям 1, 2, 3, 4 (р < 0,05) более чем на 40 % (р < 0,05). Снижение 14 показателя также было выражено значительнее и составило 14,5 % (р < 0,05) относительно исходного уровня.

Таблица 2

Изменения показателей неврологического статуса по шкалам у пациентов СФТ, СФТ+КР и СФТ+Арника С6 групп (M ± m, баллы, * – р < 0,05, ** – р < 0,01)

При включении в программу лечения гомеопатического препарата Арника С6 в точке Gi 4 на 7 сутки исследования показатели увеличены (р < 0,05): 2-й – на 11 % 4-й – на 12 %, 5-й – на 185 %, 7-й – на 12 %; 8-й – на 100 %; 11-й – на 12 %, 12-й – на 10 %. На 14 сутки наблюдений большинство указанных показателей остаются увеличенными (р < 0,05): 4-й – на 15,3 %, 5-й – на 185 %; 6-й и 7-й – на 16 %, 11-й – на 17 %, 12-й – на 19 %; 13-й – на 16 %, 14-й – на 15 %. Эти изменения можно рассматривать как повышение устойчивости и интенсивности регуляторных процессов в конце курса восстановительного лечения.

Таким образом, полученные нами данные свидетельствуют о том, что интенсивность изменения показателей дифференциальной термометрии идет параллельно с выраженностью динамики неврологического статуса, психоэмоционального состояния и уровня качества жизни. Об этом свидетельствует и корреляционный анализ. По шкале Оригинальной при стандартном лечении выявляется соответствие с ΔТ БАТ по нескольким показателям, в том числе по показателю 5: увеличение его сопровождается увеличением баллов по шкале и, значит, улучшением состояния пациентов (коэффициент корреляции 0,56). Можно отметить соответствие между динамикой ΔТ БАТ Gi4 и психоэмоциональным состоянием у пациентов этой группы по шкале «Самочувствие» с показателем 5: при его увеличении самочувствие пациентов улучшается (коэффициент корреляции 0,32). По шкале Активность соответствие наблюдается по тому же показателю 5 (коэффициент корреляции 0,43), а также по показателю 8 (коэффициент корреляции –0,38). При анализе корреляционных связей между показателями БАТ Gi4 и неврологическими шкалами при введении кортексина выявлена максимальная положительная корреляция по 9 показателям шкалы САН и шкалы Оригинальной. При использовании в лечении Арники С6 наблюдается соответствие показателей ΔТ БАТ Gi4 с показателями по шкале NIHSS по показателю 12 (re – 0,31), по шкале Оригинальной по показателям 12 и 13 (re – 0,65 и 0,37 соответственно). Соответствие между динамикой показателей ΔТ БАТ Gi4 с показателями шкалы «Самочувствие» установлено по показателям 5 и 8 (re – 0,71 и 0,57 соответственно), шкале «Активность» показатели 5 и 8 (re – 0,65 и 0,54 соответственно), по шкале Настроение по показателям 11 и 12 (re – 0,53 и 0,33 соответственно). По шкале Бартел между показателями изменения разности температур в точке Gi4 и уровнем качества жизни прослеживается положительная корреляция по показателям 5 и 8 (re – 0,44 и 0,49 соответственно).

Следовательно, показатели дифференциальной термометрии могут быть критерием оценки действия лекарств. Наиболее важными показателями для регистрации действия аллопатического средства являются показатели, оценивающие количество регулирующих импульсаций как со знаком «+», так и со знаком «–» (1, 2, 3, 4) и длительность их – 6 и 7. При использовании гомеопатического средства информативными показателями действия являются эти же показатели, а также длительность периодов, когда отсутствуют регуляторные воздействия – 13 и 14 показатели.

Ураков А.Л., д.м.н., профессор, заведующий кафедрой фармакологии, ГБОУ ВПО «Ижевская государственная медицинская академия» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Ижевск;

Петросян С.Л., д.м.н., профессор, заведующий кафедрой инструментальных методов диагностики, ГБОУ ВПО «Воронежская государственная медицинская академия имени Н.Н. Бурденко» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Воронеж.

Работа поступила в редакцию 06.03.2015.