По официальным данным в атмосфере промышленных городов Республики Башкортостан (РБ) зарегистрирован высокий уровень химического загрязнения. Например, в г. Уфе в 2011 г. показатель Стандартного индекса (Си) (по бенз(а)пирину (БП), формальдегиду, диоксиду азота, оксиду азота, по взвешенным веществам) составлял 14, который оценивается как IV класс, очень высокий, очень опасный, неблагоприятный для здоровья, а показатель наибольшей повторяемости превышения ПДК (НП) равнялся 27 (соответствует классу – III, высокий), индекс загрязнения атмосферы (ИЗА) – 7,5, (класс – III, неблагоприятный) [1].
В процессе биологического мониторинга химического загрязнения среды в различных регионах РБ по гематологическим показателям нами, в частности, изучалось и состояние мегакариоцитарно-тромбоцитарной системы. Тромбоциты играют определенную роль в осуществлении первичного гемостаза, выполняют сорбционно-транспортную, противовоспалительную, бактерицидную и другие важные функции в организме, особенно в условиях воздействия негативных факторов среды. Поэтому целью данной работы стало исследование некоторых показателей со стороны гемостаза животных при пребывании в различных регионах РБ в сравнительном аспекте.
Материал и методы исследования
Материалом исследования служили взрослые кролики породы шиншилла, которые находились в деревянных клетках неотапливаемых сараев. В рацион входили сено из местных трав, пшеничные отруби, овес и овощи местного посева, а в качестве питья ‒ снег. Исследование проводилось в зимние месяцы (декабрь 2011 г. и январь, февраль 2012 г.). Количественные параметры тромбоцитов были определены с помощью гематологического анализатора. Было исследовано не менее 10 кроликов в каждой группе. Статистическая обработка цифровых данных проводилась по программе «Статистика» М. О. Exсel (определение достоверности различий по t-критерию Стьюдента).
Результаты исследования и их обсуждение
Количество кровяных пластинок в периферической крови кроликов пос. Горный (Чишминский район РБ) в среднем составляло 364∙109/л. В других регионах эта величина была значительно ниже: в пос. «Цех керамики» Благовещенского района РБ (в 7 км к северо-западу от г. Уфы) – 285∙109/л; в г. Белебее – 265∙109/л; в г. Уфе (в 3 км от «Химпрома») – 248∙109/л; в г. Ишимбае – 244∙109/л (рисунок, табл. 1).
Относительное содержание различных видов тромбоцитов в тромбоцитограмме у животных пос. Горный имело следующее значение: юные – 1,19 %, зрелые – 87,1 %, старые – 4,1 %, формы раздражения – 7,6 %. В остальных регионах у кроликов имело место снижение количества зрелых, старых и соответственно увеличение относительного числа юных и форм раздражения тромбоцитов. Эти сдвиги в большей степени были выражены в городах Ишимбае, Уфе и несколько в меньшей степени в пос. «Цех керамики» и г. Белебее. Например, в г. Уфе юные составляли – 9,3 %, зрелые – 71,2 %, старые – 3,8 %, формы раздражения – 15,7 %. (табл. 1).
Индекс сдвига тромбоцитограммы, который определялся отношением юных форм к остальным видам тромбоцитов, у животных, содержавшихся в пос. Горный, равнялся в среднем 0,012, в пос. «Цех керамики» – 0,074, г. Белебее – 0,084, г. Уфе – 0,10, г. Ишимбае – 0,10.
Таким образом, количество тромбоцитов и тромбоцитограмма у кроликов, находившихся в пос. Горный, соответствовали общепринятым нормам [2, 3, 4]. А в других регионах Республики Башкортостан отмечалась относительная тромбоцитопения со сдвигом тромбоцитограммы «влево».
Таблица 1
Сводные показатели кровяных пластинок кроликов в разных регионах Республики Башкортостан (М ± m; n = 10;* – Р< 0,05 в сравнении с данными п. Горный)
Показатели крови |
Пос. Горный |
Пос. «Цех керамики» |
Город Белебей |
Город Уфа |
Город Ишимбай |
М ± m |
М ± m |
М ± m |
М ± m |
М ± m |
|
Тромбоциты (∙109 /л) |
364,3 ± 8,3 |
285,3 ± 7,6* |
265,4 ± 7,9* |
248,7 ± 7,1* |
244,9 ± 7,2* |
Индекс сдвига тромбоцитограммы |
0,012 ± 0,0003 |
0,074 ± 0,0007* |
0,084 ± 0,001* |
0,10 ± 0,002* |
0,10 ± 0,002* |
Юные формы (%) |
1,19 ± 0,05 |
6,9 ± 0,17 |
7,8 ± 0,2 |
9,3 ± 0,27 |
9,5 ± 0,26 |
Зрелые формы (%) |
87,1 ± 2,3 |
73,3 ± 1,8 |
69,8 ± 1,6 |
71,2 ± 1,7 |
69,8 ± 1,8 |
Старые формы (%) |
4,1 ± 0,13 |
3,4 ± 0,11 |
3,5 ± 0,12 |
3,8 ± 0,13 |
3,6 ± 0,11 |
Формы раздражения (%) |
7,6 ± 0,19 |
16,4 ± 0,41 |
19,9 ± 0,45 |
15,7 ± 0,37 |
17,1 ± 0,42 |
Время свертывания крови (мин) |
3,08 ± 0,05 |
35 ± 0,04* |
3,6 ± 0,03* |
4,1 ± 0,06* |
4,2 ± 0,07* |
Средние количества тромбоцитов (∙109 /л): 1 – пос. Горный; 2 – пос. «Цех керамики»; 3 – г. Белебей; 4 – г. Уфа; 5 – г. Ишимбай
Изучение времени свертывания крови также выявило разницу в показателях между животными, содержащимися в пос. Горный и в остальных регионах. Так, у кроликов в пос. Горный время свертывания крови в среднем равнялось 3,08 мин. В остальных регионах отмечалось увеличение этого показателя в следующей последовательности: пос. «Цех керамики» – 3,5 мин, г. Белебей – 3,6 мин, г. Уфа – 4,1 мин, г. Ишимбай – 4,2 мин (табл. 1).
Параллельно была определена теснота связи признаков форм раздражения тромбоцитов и времени свертывания крови по методу парной корреляции у кроликов, содержавшихся в пос. Горный. Сопоставление величин коэффициента критической (0,63) и коэффициента фактической (0,67) выявил статистически достоверную умеренную тесноту отрицательной связи между изучаемыми признаками (Р < 0,05) (табл. 2).
Для уточнения особенностей индивидуальной адаптации организма к негативному влиянию химических факторов малой интенсивности внешней среды велось динамическое наблюдение за животными в течение трех месяцев во всех трех зонах. 1 зона – интенсивного загрязнения; 2 зона – умеренного загрязнении и 3 зона – относительно минимального загрязнения. В 1 зоне (3 км от УПО «ХИМПРОМ» г. Уфы) содержание в крови тромбоцитов равномерно уменьшалось, средний размер их постепенно увеличивался, индекс сдвига тромбоцитограммы также прогрессивно повышался. Время же свертывания крови в этот период наблюдения постепенно увеличивалось (табл. 3).
Таблица 2
Теснота связей по коэффициентам парной корреляции (r) форм раздражения тромбоцитов и времени свертывания крови у кроликов пос. Горный (rфакт = 0,67 > rкрит = 0,63, Р < 0,05 при степени свободы n = 2)
1 |
8,23 |
2,52 |
0,634 |
–0,423 |
0,401956 |
0,178929 |
–0,26818 |
|
2 |
8,11 |
2,66 |
0,514 |
–0,283 |
0,264196 |
0,080089 |
–0,14546 |
|
3 |
7,93 |
2,71 |
0,334 |
–0,233 |
0,111556 |
0,054289 |
–0,07782 |
|
4 |
7,81 |
2,83 |
0,214 |
–0,113 |
0,045796 |
0,012769 |
–0,02418 |
|
5 |
7,68 |
2,91 |
0,084 |
–0,033 |
0,007056 |
0,001089 |
–0,00277 |
|
6 |
7,48 |
3,11 |
–0,116 |
0,167 |
0,013456 |
0,027889 |
–0,01937 |
|
7 |
7,32 |
2,23 |
–0,276 |
–0,713 |
0,076176 |
0,508369 |
0,196788 |
|
8 |
7,26 |
3,34 |
–0,336 |
0,397 |
0,112896 |
0,157609 |
–0,13339 |
|
9 |
7,12 |
3,47 |
–0,476 |
0,527 |
0,226576 |
0,277729 |
–0,25085 |
|
10 |
7,02 |
3,65 |
–0,576 |
0,707 |
0,331776 |
0,499849 |
–0,40723 |
|
1,59144 |
1,79861 |
–1,13248 |
||||||
–0,6694 |
Примечание. Результат (r) –0,6694.
Таблица 3
Сводные показатели крови кроликов 1 зоны (3 км от УПО «ХИМПРОМ» (М ± m; n = 10; * – р < 0,05 в сравнении с исходным уровнем)
Показатели |
Исходный уровень |
Через 10 суток |
Через 30 суток |
Через 60 суток |
Через 90 суток |
Количество тромбоцитов (∙109) |
363,1 ± 7,2 |
239,2 ± 6,8* |
412,3 ± 8,3* |
256,9 ± 6,1* |
245,1 ± 6,5* |
Индекс сдвига тромбоцитограммы |
0,012 ± 0,0003 |
0,033 ± 0,0006* |
0,039 ± 0,0008* |
0,045 ± 0,0008* |
0,043 ± 0,0009* |
Средний размер тромбоцитов (МКМ) |
2,8 ± 0,061 |
3,4 ± 0,068* |
3,6 ± 0,071* |
3,3 ± 0,069* |
3,4 ± 0,055* |
Время свертывания крови (мин) |
3,2 ± 0,05 |
3,8 ± 0,04* |
4,1 ± 0,06* |
4,4 ± 0,04* |
4,3 ± 0,04* |
Таблица 4
Сводные показатели крови кроликов 2 зоны (7 км от нефтеперерабатывающего комплекса) (М ± m; n = 10; * – р < 0,05 в сравнении с исходным уровнем)
Показатели |
Исходный уровень |
Через 10 суток |
Через 30 суток |
Через 60 суток |
Через 90 суток |
Количество тромбоцитов (∙109) |
336,8 ± 7,1 |
312,1 ± 7,3* |
361,9 ± 7,8* |
281,8 ± 6,5* |
289,1 ± 6,6* |
Индекс сдвига тромбоцитограммы |
0,012 ± 0,0004 |
0,037 ± 0,0007* |
0,036 ± 0,0006* |
0,038 ± 0,0005* |
0,037 ± 0,0006* |
Средний размер тромбоцитов (МКМ) |
2,7 ± 0,055 |
3,3 ± 0,059* |
3,2 ± 0,058* |
3,5 ± 0,061* |
3,6 ± 0,063* |
Время свертывания крови (мин) |
3,1 ± 0,06 |
3,6 ± 0,05* |
3,8 ± 007* |
3,6 ± 0,05* |
3,7 ± 0,06* |
Таблица 5
Сводные показатели крови кроликов 3 зоны (пос. Горный Чишминского района РБ (М ± m; n = 10; * – р < 0,05 в сравнении с исходным уровнем)
Показатели |
Исходный уровень |
Через 10 суток |
Через 30 суток |
Через 60 суток |
Через 90 суток |
Количество тромбоцитов (∙109) |
363,1 ± 7,2 |
366,2 ± 6,1 |
362,3 ± 7,3 |
364,9 ± 6,2 |
365,1 ± 6,6 |
Индекс сдвига тромбоцитограммы |
0,012 ± 0,0003 |
0,013 ± 0,0005 |
0,014 ± 0,0006 |
0,014 ± 0,0007 |
0,013 ± 0,0008 |
Средний размер тромбоцитов (МКМ) |
2,8 ± 0,061 |
2,9 ± 0,061 |
2,6 ± 0,072 |
2,7 ± 0,061 |
2,6 ± 0,051 |
Время свертывания крови (мин) |
3,2 ± 0,05 |
3,4 ± 0,04 |
3,1 ± 0,05 |
3,4 ± 0,03 |
3,3 ± 0,03 |
Наблюдаемые сдвиги отражали усиление катаболического процесса при одновременном повышении ответного анаболического процесса со стороны мегакариоцитарно-тромбоцитарной системы в условиях интенсивного химического загрязнения окружающей среды
В 2 зоне умеренного загрязнения среды (7 км от нефтеперерабатывающего комплекса г. Уфы) изменения описываемых выше показателей носили неоднозначный характер. Содержание тромбоцитов в крови сначала (через 10 суток) понизилось, в последующие сроки постепенно повышалось и оказалось выше исходного уровня. Эти сдвиги, вероятно, обусловлены активизацией пролиферативного процесса после первоначального преобладания деструкции. Показатели индекса сдвига тромбоцитограммы и среднего размера тромбоцитов во всех сроках наблюдения были выше исходного уровня, указывая на оживление тромбоцитопоэза. Одновременно несколько увеличивалось время свертывания крови (табл. 4).
В 3 зоне (пос. Горный Чишминского района РБ) со стороны изучаемых показателей статистически достоверные изменения за время наблюдений не были регистрированы (табл. 5).
Выводы
1. Изменения в системе гемостаза у кроликов, которые содержались в промышленных центрах, связаны с уровнем химического загрязнения среды и проявлялись в уменьшении содержания тромбоцитов, увеличении индекса сдвига тромбоцитограммы и ускорении времени свертывания крови.
2. Показатели гемостаза, наблюдаемые у животных, содержавшихся в городских условиях, в совокупности указывали, с одной стороны, на раздражение мегакариоцитарно-тромбоцитарного звена, а с другой – на снижение функциональной активности, вероятно, вследствие преобладания деструктивной фазы над репаративной в регенерационном процессе.
3. Степень изменений со стороны тромбоцитов, вероятно, находилась в пропорциональной зависимости от уровня загрязнения окружающей среды.
Рецензенты:Миннебаев М.М., д.м.н., профессор кафедры патофизиологии, ГБОУ ВПО «Казанский государственный медицинский университет», г. Казань;
Овсянников В.Г., д.м.н., профессор, зав. кафедрой патофизиологии, ГБОУ ВПО «Ростовский государственный медицинский университет», г. Ростов-на-Дону.
Работа поступила в редакцию 02.03.2015.