В последнее время возрос интерес к фитотерапии больных дерматомикозами. Растительные препараты имеют определенные преимущества перед синтетическими лекарственными средствами: это возможность длительного и безопасного их применения, биологическое сродство между биологически активными веществами растений и физиологически активными веществами организма, поливариантность действия [1].
По данным Соколова С.Я. и Замотаева И.П. 1000 видов растений из 137 семейств обладают антимикотическим действием. Известно, что наиболее выраженной противогрибковой активностью обладают такие фенольные соединения, как кумарины, флавоноиды, феноловые кислоты, фуранохромоны [2].
Высокое содержание различных фенольных соединений наблюдается в следующих высших растениях: зверобое продырявленном, ромашке аптечной, тысячелистнике обыкновенном, хвоще полевом, черноголовке, доннике лекарственном и многих других [3].
Следует отметить, что сведения об антигрибковой активности фенольных соединений встречаются в литературе уже много лет. Так Комисаренко И.Ф. и Дмитруком С.Е. в опытах in vitro была изучена противогрибковая активность некоторых индивидуальных флавоноидов, среди которых можно выделить рутин, гиперозид, кверцетин, кверцетрин, мирицетин, лютеолин и др. Установлено, что все эти вещества задерживают рост Trichophyton rubrum и Trichophyton mentagraphytes, более устойчивыми оказались Aspergillis niger и Candida albicans [4].
В литературе также встречаются данные о противогрибковом эффекте летучих ароматических соединений, составляющих химический состав эфирномасличного лекарственного растительного сырья. Исследования противогрибкового действия эфирных масел получили большую распространенность после открытия Токиным Б.П. в 1928 году феномена фитонцидов, то есть способности растений выделять вещества, обладающие мощным бактерицидным и фунгицидным действием [5, 6].
В дальнейшем Вичкановой С.А. исследована противогрибковая активность эфирных масел, выделенных из 25 растений, и показано, что наибольшим эффектом обладали семь из них, в том числе масло заманихи, сосновое, сандаловое и другие [7].
Более детальное изучение действия эфирных масел при грибковых заболеваниях кожи встречается в работе Протопопова Ф.Ф., где автором отмечен высокий терапевтический эффект при лечении руброфитии стоп мазью, в состав которой введены эфирные масла мяты перечной, тмина обыкновенного и тысячелистника обыкновенного.
Белоусовым М.В. и Гуськовой И.Н. изучено более 60 эфирных масел растительной флоры Сибири и установлено, что все они оказывают ингибирующее влияние на патогенные возбудители: Microsporum cauis, Trichophyton rubrum, Menta graphytes [8].
Проведенный анализ литературных данных свидетельствует о целесообразности применения лекарственных растений в качестве сырьевого источника для получения БАВ противогрибкового действия. В качестве исследуемых растений нами выбраны донник лекарственный, полынь горькая, ромашка аптечная, зверобой продырявленный, душица обыкновенная, тысячелистник обыкновенный.
Согласно литературным данным содержание кумаринов в разных растительных объектах колеблется от 0,2 % до 10 % [9], в изучаемом нами растительном сырье содержание кумаринов колеблется от 0,5 % до 5 % [10].
Определение кумаринов в полученных извлечениях 70 %-ным этиловым спиртом, ПЭО - 400, пропиленгликолем 1,2 проводили спектрофотометрическим методом. Предварительно был снят спектр поглощения 0,0008 % раствора стандартного образца (СО) кумарина.
Спектр поглощения имел два четко выраженных максимума при длинах волн 276 и 312 нм, что согласуется с данными литературы [9]. Нами также были сняты спектры поглощения трех объектов исследования в 70 %-ном этиловом спирте: извлечения, полученные 70 % -ным этиловым спиртом, 100 %-ным ПЭО-400 и 70 %-ным водным раствором пропиленгликоля 1,2. На спектре наблюдался максимум при длине волны 276 нм, поэтому измерения проводили при этой длине волны. Предварительные исследования показали, что наибольшее количество кумаринов содержится в извлечении, полученном 70 % -ным этиловым спиртом, поэтому нами предлагается методика количественного определения кумарина в извлечении на 70 %-ном этиловом спирте.
Методика: 0,4 мл. извлечения на 70 %-ном этиловом спирте помещали в мерную колбу вместимостью 100,0 мл., доводили 70 %-ным этиловым спиртом до метки, перемешивали. Затем 2 мл. полученного раствора помещали в мерную колбу вместимостью 10,0 мл. и доводили тем же растворителем до метки. Измеряли оптическую плотность при длине волны 276 нм относительно 70 % -ного этилового спирта. Одновременно, в тех же условиях измеряли оптическую плотность 0,0008 % -ного раствора кумарина в 70 %-ном этиловом спирте. Количественное содержание кумарина (%) в извлечении на 70 %-ном этиловом спирте рассчитывали по формуле, учитывая оптическую плотность анализируемого раствора и раствора СО кумарина, навеску извлечения и навеску СО кумарина, взятую для анализа.
Содержание кумарина в исследуемом извлечении (исследования в 6 повторностях) составляет 0,491 %, при относительной погрешности спектрофотометрического определения ± 2,39 %, что позволяет рекомендовать данную методику для проведения количественного определения кумарина в полученном комплексном экстракте.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ:
- Морозова, Е.В. Современное состояние исследований противогрибковых парафармацевтических средств на основе фитокомпозиций и возможности использования их в виде спрея / Е.В. Морозова // Актуальные проблемы фармации: сб. науч. конф. - Владикавказ, 2007. - С. 50-53.
- Ложкин, А.В. Природные кумарины: методы выделения и анализа / А.В. Ложкин, Е.И. Саканян // Хим.-фармац. журн. - 2006. - Т. 40, №6.- С.47-55.
- Корсун, В.Ф., Лечение кожных болезней препаратами растительного происхождения: Справочник.- Минск: Беларусь, 1995.- 383с.
- Георгиевский, В.П. Биологически активные вещества лекарственных растений / В.П. Георгиевский, Н.Ф. Комиссаренко, С.Е. Дмитрук.- Новосибирск: Наука, 1990. - 336с.
- Ткачева, Н.И. Изучение фунгицидной активности некоторых эфирных масел / Н.И. Ткачева [и др.] // Фармация.- 1989.- Т.38, №3. - С.72-73.
- Токин, Б.П. Целебные яды растений. Повесть о фитонцидах. / Б.П. Токин.- 2-е изд., перераб. и доп.-Л.: Лениздат, 1974.- 244с.
- Вичканова, С.А. Ингибиторы микроорганизмов среди природных веществ растительного происхождения: автореф. дис... докт. биол. наук: 14.00.25 / Вичканова. - М., 1981.- 48с.
- Перспективы использования Сибирско-дальневосточных видов вересковых в качестве противогрибковых и диуретических средств / Т.П. Березовская [и др.] // 5 Всероссийский съезд фармацевтов (1987; Ярославль): материалы...- Ярославль, 1987.- С.409-410.
- Ладыгина, Е.Я. Химический анализ лекарственных растений: учеб. пособие для фармац. вузов / Е.Я. Ладыгина [и др.]; под ред. Н.И. Гринкевича, Л.Н. Сафронича.- М.: Высш. школа, 1983.- 176с.
- Муравьева, Д.А. Фармакогнозия: учеб. для студ. Фармац. вузов / Д.А. Муравьева, И.А. Самылина, Г.П. Яковлев.- 4-е изд., перераб. и доп.- М.: Медицина, 2007.- 656с.