Около 40 % новых химических соединений обладают низкой растворимостью в воде и вследствие этого низкой биодоступностью. Различные технологические подходы применяют для повышения растворимости и биодоступности лекарственных веществ (ЛВ): уменьшение размера частиц, комплексообразование, твердые дисперсные системы, самоэмульгирующиеся системы доставки и ряд других. Однако каждый из подходов имеет свои достоинства и ограничения.
ГБ-115 – триптофан-содержащий дипептидный аналог эндогенного тетрапетида ХЦК-4. ГБ-115, антагонист ХЦК-2 рецепторов, оригинальное пептидное соединение, селективный анксиолитик с модулирующим влиянием на функциональную активность холецистокининовой системы [4].
ГБ-115 является труднорастворимым ЛВ, растворение в свою очередь – это этап, ограничивающий скорость всего процесса всасывания. Улучшения растворимости ГБ-115 возможно добиться с помощью увеличения поверхности контакта лекарственной формы (ЛФ) с желудочно-кишечными жидкостями. Одним из методов увеличения поверхности контакта является нанесение покрытия с диспергированным в нем ГБ-115 на пеллеты.
ГБ-115 – амид N-(6-фенилгексаноил)глицил-L-триптофана, разработан в ФГБУ «НИИ фармакологии имени В.В. Закусова» РАМН; покрытие AquaPolish® D clear Project MR 3178 (BIOGRUND, Германия), в состав которого входят гидроксипропилметилцеллюлоза 6 (ГПМЦ), гидроксипропилцеллюлоза, микрокристаллическая целлюлоза (МКЦ) и тальк. Вискозиметр: Brookfield DV-E (США) с адаптером (small-spindle-adapter), шпиндель: SC4-18; код: 18; корзинка: 13R; объем: 6,7 мл; скорость вращения (1/с): 1,32×n; прибор для определения прочности пленок на разрыв: Texture Analyser TA-XT2 (Texture Technologies, США), прибор для нанесения покрытия: Aircoater 025 (InnoJet, Германия), форсунка: IRN2.
Перед определением вязкости суспензию покрытия с ГБ-115 на некоторое время помещали в ультразвуковую баню.
Пленку для определения прочности готовили следующим образом: суспензию пленочного покрытия наносили на предметное стекло, высушивали до полного испарения растворителя в сушильном шкафу, высушенную пленку снимали шпателем.
Процесс приготовления суспензии покрытия включал следующие стадии: приготовление суспензии самого покрытия AquaPolish® D clear Project MR 3178, которое заключалось в суспендировании порошка покрытия в воде в течение 30 мин, и добавлении к полученной суспензии
ГБ-115. Для приведения пеллет в соответствие с разделом «Описание» проводили дополнительное диспергирование субстанции ГБ-115 в суспензии покрытия с помощью Ultra Turrax T 50 basic (Германия).
Условия нанесения покрытия: содержание твердых веществ в покрытии составило 10 %, загрузка 150 г; распыляемый воздух: 1,5 бар; температура на входе: 42,2 °С; время покрытия – около 5 ч.
Фармакологические эксперименты были выполнены на 530 беспородных белых крысах-самцах массой 220–260 г. Оценку анксиолитической активности субстанции и ЛФ ГБ-115, их влияние на выраженность тревоги у контрольных и опытных крыс выполняли, используя тест «приподнятый крестообразный лабиринт» (ПКЛ) в базовой модификации. Данный тест рассматривается как наиболее специфический для выявления анксиолитической активности биологически активных соединений. Процедура тестирования в ПКЛ выполнялась в течение 5 мин. Регистрировали стандартные показатели активности животных в ПКЛ, наиболее адекватно характеризующие анксиолитическую активность – число заходов в открытые рукава лабиринта и время пребывания в них [5].
Суспензию субстанции ГБ-115 и ее ЛФ готовили ex tempore. Полученные суспензии вводили животным перорально (внутрижелудочно) в объеме 1 мл/1 кг массы тела. В качестве контроля вводили равные объемы растворителя (дистиллированная вода + твин-80) для субстанции или водный раствор плацебо + твин-80 при изучении ЛФ. Полученные результаты обрабатывали статистически, используя непараметрический критерий «Mann-Whitney – U-test» и описательную статистику для оценки средних значений и различий внутри групп.
Экспериментальная часть
Нами проведено исследование по нанесению пленочного покрытия с диспергированным в нем ГБ-115 на пеллеты. В качестве плацебо для покрытия использованы готовые пеллеты из МКЦ Cellets 1000 (Harke, Германия) диаметром 1000–1400 мкм. В связи с тем, что необходимо обеспечить быстрое высвобождение ГБ-115, в экспериментальной лаборатории компании BIOGRUND (Германия) разработана оригинальная композиция покрытия «AquaPolish® D clear Project MR 3178», специально предназначенного для включения ГБ-115 и нанесения на пеллеты.
Для пленочных покрытий определяли вязкость пленкообразующего раствора с содержанием твердого вещества 10 % в воде, значение которой составило 78,1 мПа∙с. Прочность пленочного материала оценивали с помощью теста на проникновение для определения предела прочности пленочного материала. Силу прикладывали к образцу пленки для деформации до предела прочности, значение прочности составило 30,967.
Состав покрытия с ГБ-115 для нанесения на пеллеты из МКЦ включал: ГБ-115 – 0,67 %, AquaPolish® D clear Project MR 3178 – 9,33 %, вода – 90,00 %.
Покрытие наносили на пеллеты до прироста массы 10 %. В ходе эксперимента получены пеллеты с пленочным покрытием, в состав которого входит ГБ-115. Необходимая доза ГБ-115 (1 мг) содержится в 150 мг пеллет, которыми можно наполнить твердые капсулы или спрессовать в таблетки с добавлением наполнителей. Использование мелкодисперсной субстанции ГБ-115 в сочетании с дополнительным диспергированием с применением Ultra Turrax T 50 basic позволило добиться однородного распределения частиц ГБ-115 по поверхности пеллет и обеспечить соответствие готовых ЛФ разделу «Описание».
Внешний вид и микроскопия пленок, а также внешний вид готового продукта представлены в таблице.
Для подтверждения эффективности разработанной ЛФ ГБ-115 проводили фармакологический эксперимент на крысах.
Фармакологический эксперимент
на крысах после перорального введения субстанции и ЛФ ГБ-115
Субстанция ГБ-115 при введении в дозе 0,3 мг/кг через 30 мин в тесте ПКЛ существенно и значимо увеличивала число заходов в открытые рукава в 2,8 раза (P < 0,001) и в дозе 0,7 мг/кг через 45 мин – в 1,8 раза (P < 0,05); при этом время пребывания в открытых рукавах через 30 мин после введения данной субстанции в дозе 0,3 мг/кг возрастало в 3,6 раза, P < 0,01.
Фармакологическое изучение ЛФ ГБ-115 показало наличие выраженной анксиолитической активности у данной композиции – число заходов в открытые рукава возрастало в 2,1 раза через 45 мин после введения в дозе 0,3 мг/кг, P < 0,05 (рисунок). Более выраженно увеличивалось время пребывания в открытых рукавах – через 45 мин после введения дозы 0,3 мг/кг – в 3,2 раза, после введения дозы 0,9 мг/кг – в 3,9 раза, P < 0,01. Эффект ЛФ ГБ-115 в дозе 0,3 мг/кг был продолжительным – через 60 мин после введения в дозе 0,3 мг/кг время пребывания в открытых рукавах превышало соответствующий показатель для контрольной группы (плацебо) в 3,7 раза, P < 0,01.
Характеристика покрытых пеллет
|
Лекарственная форма |
Внешний вид пленки |
Микроскопия |
Внешний вид готового продукта |
|
Пеллеты |
|
|
|
\
а
б
Влияние ЛФ ГБ-115 на число заходов крыс
в открытые рукава ПКЛ (а) и время пребывания в них (б)
Полученные результаты позволяют заключить, что изученная ЛФ ГБ-115 демонстрирует выраженную анксиолитическую активность по специфическим показателям – числу заходов в открытые рукава ПКЛ и времени пребывания в них.
Рецензенты:
Пятин Б.М., д.фарм.н., профессор; руководитель опытно-технологического отдела; ФГБНУ «НИИ фармакологии имени
В.В. Закусова», г. Москва;
Жердев В.П., д.м.н., профессор, заведующий лабораторией фармакокинетики; ФГБНУ «НИИ фармакологии имени
В.В. Закусова», г. Москва.
Работа поступила в редакцию 19.12.2014.