Scientific journal
Fundamental research
ISSN 1812-7339
"Перечень" ВАК
ИФ РИНЦ = 1,749

SUBSTANTIATION OF STRUCTURE, TECHNOLOGY DEVELOPMENT AND RESEARCH OF THE PHARMACOLOGICAL PROPERTIES OF THE RECTAL SUPPOSITORIES CONTAINING ALBUMIN AND PROPOLIS EXTRACT

Simonyan E.V. 2 Shikova Y.V. 1 Osikov M.V. 2 Saedgalina O.T. 2 Grigoreva G.P. 2 Yumaguzhina A.T. 2
1 Bashkir State Medical University
2 South-Ural State Medical University
The study had been conducted to develop the technology of a new albumin dosage form with improved biopharmaceutical properties. Given the properties of drugs and on the basis of biopharmaceutical research to find the optimal composition of the base and auxiliary components. In the development of methods of quantitative determination of albumin the effect of phenolic compounds of propolis extract was defined and photometric technique based on reaction with malachite green was proposed. In the context of experimental hemorrhagic anemia which was developed in rats we examined the effects of albumin on the relief of the aftermath of the disease. It was found that the introduction of the rectal dosage form is as effective as infusion solutions of albumin. In this work we provided overview of the recovery of ceruloplasmin level after rehabilitation therapy with albumin in blood loss. At 14-th day hemoglobin level is restored to 80–88 % when administered intraperitoneally or rectally albumin.
albumin
propolis extract
anemia
ceruloplasmin
1. Gosudarstvennaja farmakopeja SSSR/MZ SSSR. M.: Medicina, 1990 (2). 397 p.
2. Kolb V.G., Kamyshnikov V.S. Opredelenie aktivnosti ceruloplazmina v syvorotke krovi modificirovannym metodom Revina. Spravochnik po klinicheskoi himii. 2-e izd. Minsk, 1982. рр. 290–292.
3. Osikov M.V., Makarov E.V., Krivohizhina L.V. Bjulleten eksperimental’noy biologii i meditsiny. 2006; 142(10): 396–399.
4. Osikov M.V., Krivohizhina L.V., Mal’tsev A.V. Efferentnaja terapija. 2006; 12(4): 36–39.
5. Rukovodstvo po jeksperimental’nomu (doklinicheskomu) izucheniju novyh farmakologicheskih veshhestv /Pod red. V.P.Fisenko. M.: Medicina, 2000. рр. 1–34.
6. Simonjаn E.V.,. Shikova Y.V, Likhoded V.A, Ushakova V.A.,. Nozhkina N.N, Klimantova M.S., Yumaguzhina A.T Nauchnye vedomosti Belgorodskogo gosudarstvennogo universiteta. Serijа: Medicina. Farmacijа. Scientific statements, Belgorod State University. Series: Medicine. Pharmacy. 2014; 26(11): 255–257.
7. Shikova Y.V., Likhoded V.A., Farkhutdinov R.R., Simonian E.V. Medicinskij vestnik Bashkortostana. – Medical Journal of Bashkortostan . 2013; 8(6): 151–153.

Экссудативная энтеропатия – патологическое состояние, характеризующееся потерей плазменных белков через желудочно-кишечный тракт; сопровождается признаками нарушения кишечного всасывания, следствием чего является развитие выраженной гипопротеинемии, отечного синдрома. Гипопротеинемия развивается в короткие сроки, т.к. синтез альбумина печенью не восполняет потери из кровяного русла в просвет кишечника. Поступление альбумина через прямую кишку может предотвратить потерю плазменных белков через желудочно-кишечный тракт.

Поэтому разработка новой лекарственной формы – ректальных суппозиториев, содержащих альбумин, является актуальной задачей. Для усиления фармакологического эффекта и улучшения процесса всасывания целесообразно вводить природные биологически активные вещества, к числу которых относится прополис. Он богат природными фенольными соединениями, обладающими комплексным
действием [7].

Целью настоящего исследования явился выбор оптимального состава, разработка технологии и исследование некоторых фармакологических свойств суппозиториев, содержащих альбумин и экстракт прополиса.

Материалы и методы исследования

Для выбора основы были исследованы гидрофильные, липофильные и дифильные основы, в состав которых входили различные по своей природе вспомогательные вещества. Суппозитории готовили массой 3,0–3,5 г с содержанием альбумина 0,05 г и спиртового экстракта прополиса – 0,3 мл. Выбор оптимального состава проводили в несколько этапов. Качество основ оценивали визуально, по времени полной деформации или растворения, согласно методикам, приведенным в ГФ XI издания, выпуск 2, с. 152 [1]. Изучение фармацевтической доступности проводили методом диффузии в агар и диализа через полупроницаемую мембрану. На основании проведенных предварительных исследований установили, что максимальное высвобождение действующих веществ наблюдается из липофильных основ. Были рассмотрены композиции, состав которых приведен в табл. 1.

Таблица 1

Составы суппозиторных основ из расчета на 10 суппозиториев

Номер
основы

Твердый жир типа А

Масло какао

Лутрол F-68

Кремофор RH-40

Эмульгатор Т2

Твин 80

1

25,0

     

2,0

 

2

25,0

       

2,0

3

25,0

 

1,0

1,0

   

4

25,0

   

2,0

   

5

25,0

     

1,0

1,0

6

25,0

 

2,0

     

7

 

25,0

   

2,0

 

8

 

25,0

     

2,0

9

 

25,0

1,0

1,0

   

10

 

25,0

 

2,0

   

11

 

25,0

   

1,0

1,0

12

 

25,0

2,0

     

Известно, что альбумин прочно связывает ионы меди, которые переносятся к печени, где активно используются для синтеза церулоплазмина (ЦП). Он является одним из основных антиоксидантов плазмы крови, проявляя как специфическую, так и неспецифическую активность [3, 4]. Специфическая активность, связанная со снижением уровня активных метаболитов кислорода, может быть реализована несколькими путями. В плазме крови ЦП окисляет Fe2+ до Fe3+, после чего окисленные ионы железа связываются трансферрином и транспортируются в гепатоциты и развивающиеся ретикулоциты. В связи с этим целесообразно было установить влияние альбумина на уровень ЦП и гемоглобина при острой кровопотере [5].

Определение проводили на белых крыcах самцах массой 200–250 г.

В каждой группе было по 10 животных. Было проведено изучение влияния суппозиториев с альбумином на купирование последствий экспериментальной геморрагической анемии у крыс. После шести кровопотерь у крыс развивалась острая анемия, выражавшаяся в снижении концентрации гемоглобина до 61 % от исходного уровня, уровень сывороточного железа снижался в 3 раза. В течение 5 суток крысам контрольной группы внутрибрюшинно в дозе 10 мг/сут вводился альбумин для инфузий, а экспериментальным животным – суппозитории с таким же количеством альбумина и экстрактом прополиса. Определение ЦП контролировали по методу Ревина в модификации Камышникова, основанному на окислении п-фенилендиамина при участии ЦП [2].

Результаты исследования
и их обсуждение

Предварительный выбор оптимального состава проводили визуально. Установлено, что суппозитории, приготовленные на масле какао, неоднородны, с заметным разделением фаз, имеют вязкую и зернистую структуру. Лекарственные формы, приготовленные с использованием твердого жира типа А, представляют однородную плотную массу, поэтому дальнейшие исследования проводили с составами 1–6. При определении времени полной деформации было установлено, что для всех суппозиториев оно находится в пределах от 8 до 13 минут, что полностью соответствует требованиям общей статьи ГФ XI издания. Для определения фармацевтической доступности методом диффузии в агар предварительно подобрали оптимальный индикатор, который будет введен в агаровый гель [6]. Наиболее яркое изменение окраски наблюдалось при использовании раствора нингидрина 1 %, который вводили в агар в количестве 5 %. Результаты представлены в табл. 2.

Для получения более достоверных результатов определяли процесс высвобождения методом диализа через полупроницаемую мембрану. Определение концентрации альбумина и экстракта прополиса проводили на спектрофотометре СФ-56 в кювете с толщиной рабочего слоя 10 мм. Для количественного определения альбумина разработана методика на основе взаимодействия с малахитовым зеленым. Использовать в данном случае реактивы, содержащие ионы меди, нецелесообразно, так как полученные результаты завышены из-за комплексообразования с фенольными соединениями прополиса. Содержание флавоноидов в пересчете на рутин определяли методом дифференциальной спектрофотометрии по реакции с алюминия хлоридом.

Таблица 2

Определение фармацевтической доступности суппозиториев с альбумином

Номер состава

15 минут

30 минут

45 минут

60 минут

120 минут

180 минут

1

13

16

18

20

21

24

2

11

14

17

18

19

21

3

14

17

19

21

22

24

4

14

16

18

20

21

22

5

11

13

14

16

19

21

6

16

20

22

24

28

30

Было установлено, что максимальное высвобождение альбумина наблюдается из суппозиториев, изготовленных по прописи 6 (за 30 минут – 86 %), что коррелирует с данными, представленными в табл. 2 (рис. 1).

pic_52.wmf

Рис. 1

На основании проведенных исследований определен состав суппозиториев: твердый жир типа А – 2,5; лутрол F 68 – 0,2; альбумин – 0,05; экстракт прополиса 10 % – 0,3 мл.

Таблица 3

Определение уровня гемоглобина после острой геморрагической анемии

Группа животных

содержание гемоглобина, г/л

до введения препаратов
(острая геморрагическая анемия)

на 7 сутки

на 14 сутки

Контроль (без введения препаратов)

 

97,76–99,08

99,11–99,65

99,92–100,36

Испытуемые животные, получавшие 10 % раствор альбумина внутрибрюшинно

 

96,46–97,75

137,71–141,09

142,0–144,6

Испытуемые животные, получавшие суппозитории альбумина

 

96,43–97,97

139,39–140,21

142,43–143,97

 

Примечание. Содержание гемоглобина у животных до начала эксперимента – 160 ± 1,03 г/л

При исследовании фармакологического эффекта суппозиториев с альбумином и экстрактом прополиса в условиях острой геморрагической анемии установили, что, начиная с 7-х суток после введения препарата, происходит увеличение уровня гемоглобина до 86 % (при введении инфузионного раствора) и 88 % – при введении суппозиториев. В контрольной группе на 7-е сутки уровень гемоглобина составил 65 %, а на 14–72 % (табл. 3)

При определении уровня ЦП установили, что ферроксидазная активность в сыворотке крови, сниженная в результате острой кровопотери, восстановилась до исходного уровня только у крыс, получавших альбумин как внутрибрюшинно, так и ректально (рис. 2).

pic_53.wmf

Рис. 2

Заключение

На основании проведенных экспериментальных исследований разработана технология новой лекарственной формы – суппозиториев ректальных с альбумином и экстрактом прополиса. Показано эффективное применение данной лекарственной формы в условиях острой кровопотери для восстановления уровня гемоглобина и церулоплазмина.

Рецензенты:

Лиходед В.А., д.фарм.н., профессор кафедры фармацевтической технологии с курсом биотехнологии БГМУ, г. Уфа, заведующий кафедрой фармации ЮУГМУ, г. Челябинск;

Синицкий А.И., д.м.н., доцент кафедры биохимии ЮУГМУ, г. Челябинск.

Работа поступила в редакцию 05.12.2014.