Одной из важнейших задач при проведении комплекса неспецифических профилактических и противоэпидемических мероприятий является объективная оценка санитарно-бактериологического состояния учреждений здравоохранения. Дезинфекция поверхностей в стоматологическом кабинете является чрезвычайно важным звеном в профилактике внутрибольничного инфицирования. Штаммы бактерий в процессе реализации механизма передачи могут находиться на объектах внешней среды, где они сохраняют жизнеспособность, а при благоприятных условиях размножаются инакапливаются, что обуславливает возможность заражения как пациентов, так и медицинского персонала.Ведущее значение имеет устойчивостьвозбудителя к воздействию неблагоприятных условий окружающей среды [1, 2]. В деятельности врачей лечебного профиля особое значение имеет умение организовать дезинфекционные мероприятия в медицинских учреждениях, которые проводят с целью предупреждения распространения внутрибольничной инфекции средипациентов и персонала.
В 1968 году Э. Сполдинг (E.N. Spaulding) разработал новый подход к дезинфекции и стерилизации изделий медицинского назначения и медицинского оборудования. Он предложил разделить все изделия на критические, полукритические и некритические в зависимости от риска инфицирования пациента при использовании того или иного оборудования или медицинского инструмента. Критические – инструменты и оборудование, проникающие через покровы и ткани организма. Полукритические – инструменты и оборудование, соприкасающиеся с неповрежденными слизистыми. Некритические – инструменты и оборудование, контактирующие только с неповрежденной кожей или находящиеся в окружении больного или медицинского персонала. В зависимости от этого медицинские устройства подлежат стерилизации или различным уровням дезинфекции (высокого, промежуточного или низкого). В кабинете стоматолога при работе с высокооборотными турбинами, ультразвуковыми приборами, применяемыми при лечении пациентов, происходит образование аэрозолей, состоящих из мельчайших капель масла, гноя, крови, слюны, микроорганизмов. Аэрозоли удерживаются в зоне дыхания врача и пациента до 30 минут и могут распространяться на расстояние до 50–80 см [5]. В связи с этим стоматологический кабинет делится на три гигиенических зоны: зона лечения – зона самого высокого уровня гигиены, в которой находятся руки врача-стоматолога, стерильный лоток и инструменты; зона разбрызгивания – зона полукритических и некритических предметов; остальная часть помещения – в ней находятся только некритические предметы.
Целью исследования были оценка санитарно-бактериологического состояния полукритических и некритических зон в поликлинических учреждениях стоматологического профиля и выявление особенностей основных выделенных штаммов.
Материалы и методы исследования
Бактериологическое исследование микробной обсемененности объектов внешней среды было проведено согласно методическим рекомендациям по санитарно-эпидемиологическому режиму [2, 3, 4, 5]. Взятие смывов производили стерильным ватным тампоном на палочках, вмонтированных в пробирки, или марлевыми салфетками, размером 5×5 см, простерилизованными в бумажных пакетах или в чашках Петри. Для увлажнения тампонов в пробирки с тампонами наливают по 2,0 мл стерильного физиологического раствора. При использовании салфеток стерильный физиологический раствор разливают в стерильные пробирки по 2,0 мл. Салфетку захватывают стерильным пинцетом, увлажняют физиологическим раствором из пробирки, после протирания исследуемого объекта помещают в ту же пробирку. При контроле мелких предметов смывы забирают с поверхности всего предмета. При контроле предметов с большой поверхностью смывы проводят в нескольких местах исследуемого предмета площадью примерно в 100–200 кв. см.
Посев производили на универсальные плотные питательные среды по методу Линцея. Для выделения стафилококков производили посев непосредственно на чашку Петри с желточно-солевым агаром (агар Чистовича). Кроме того, в качестве среды накопления использовали бульон с 6,5 % хлористого натрия, бульон с 1 % глюкозы, разлитый в пробирки по 0,5 мл, в которые засевают по 0,2–0,3 мл смывной жидкости. Засеянные пробирки инкубировали при 37 °С в течение 20–24 часов, после чего делали высев на среду Чистовича. Для выявления бактерий группы кишечных палочек производили посев на среду обогащения, для чего тампон (марлевую салфетку) погружали в 10–20 % желчный бульон или среду Кесслера. Через сутки инкубирования при 37 °С, делали пересев на среду Эндо. Идентификацию штаммов производили с учетом их морфологических и культуральных признаков. Посев воздуха производили седиментационным методом. Посевы инкубировали при температуре 37 °С в течение 24 часов, затем оставляли на 24 часа при комнатной температуре, подсчитывали количество выросших колоний и произвели перерасчет на 1 м3 воздуха. Антибиотикочувствительность определяли методом дисков. Факторы персистенции определяли по методам Бухарина О.В. [1]. Статистическую обработку проводили стандартными методами.
Результаты исследования и их обсуждение
Обнаружено, что основные выделенные штаммы относились к S.aureus. Klebsiella spp., Proteus spp. были изолированы с поверхности пола и мебели. При анализе воздуха в основном выделились штаммы золотистого стафилококка (таблица).
Результаты санитарно-бактериологического анализа помещений
Предмет исследований |
Объект |
Результаты |
1 |
2 |
3 |
Общая обсемененность воздуха (общее микробное число) |
Терапевтический кабинет Хирургический кабинет Ортопедический кабинет Техническая лаборатория Стерилизационная |
300 б/м3S.аureus 240 б/м3 S.aureus 660 б/м3 S.aureus 1020 б/м3S.aureus Нет роста |
Поверхность пола |
Терапевтический кабинет Хирургический кабинет Ортопедический кабинет Техническая лаборатория Стерилизационная |
106-107 КОЕ* S.аureus,.Klebsiella 108-109 КОЕ S. aureus, Klebsiella 108-109 КОЕ S.aureus 103-104КОЕ S.aureus, Proteus spp Нет роста |
Поверхность стен |
Терапевтический кабинет Хирургический кабинет Ортопедический кабинет Техническая лаборатория Стерилизационная |
Единичные колонии S. aureus Нет роста Единичные колонии S. aureus Единичные колонии S. aureus Нет роста |
Поверхность рабочего стола |
Терапевтический кабинет Хирургический кабинет Ортопедический кабинет Техническая лаборатория |
105-106 КОЕ S.aureus Нет роста 105-106 КОЕ 108-109КОЕS.aureus |
Установка стоматологическая |
Терапевтический кабинет Хирургический кабинет Ортопедический кабинет |
Единичные колонии S.аureus. Нет роста 102КОЕ S.аureus |
Кресло стоматологическое |
Терапевтический кабинет Хирургический кабинет Ортопедический кабинет |
Нет роста патогенной флоры Единичные колонии S. аureus. Klebsiella spp., 102 КОЕ S.аureus |
Примечание: *КОЕ – колониеобразующие единицы.
Наиболее общим качественным определением, характеризующим способность микроорганизма взаимодействовать с восприимчивым макроорганизмом является его патогенность. В качестве количественной меры патогенности традиционно используется понятие «вирулентности», отражающее интенсивность повреждающего воздействия микроба в отношении организма хозяина. Факторы персистенции – особые свойства микроорганизмов, способствующие противостоянию микроба защитным силам макроорганизма. К таким факторам микробов относятся некоторые морфологические структуры – капсула, антиоксидантные ферменты и некоторые виды активности (способность к инативации лизоцима, комплемента, интерферона) [1, 6].
Так как основная бактериальная микрофлора, выделенная в помещениях в поликлиниках стоматологического профиля, относилась к штаммам золотистого стафилококка, в дальнейшем были изучены особенности их факторов вирулентности. Значительная часть выделенных культур (35–42 %) S.aureus обладала множественной резистентностью, проявляя при этом чувствительность к препаратам цефалоспоринов (цефтриаксон, цефотаксим, цефуроксим). Кроме того, выделенные штаммы обладали высоким персистентным потенциалом. Антилизоцимной активностью (АЛА) обладало 67 %. Антиинтерфероновой активностью обладало 44 %. Антикомплементраная активность выявлена у 34 % изученных нами штаммов S.aureus.
Таким образом, при санитарно-бактериологическом исследовании состояния полукритических и некритических зон в основном выявлены штаммы золотистого стафилококка, которые характеризовались множественной устойчивостью к антибиотикам, высокой вирулентностью и персистентным потенциалом. Наличие условно-патогенных бактериальных штаммов в стоматологическом кабинете является фактором риска для пациентов и требует совершенствования подходов к дезинфекции и контролю санитарного состояния помещений в медицинских учреждениях.
Рецензенты:Хасаева Ф.М., д.б.н., профессор кафедры «Микробиология, гигиена и санитария» ФГБОУ ВПО «Кабардино-Балкарский государственный аграрный университет им. В.М. Кокова», г. Нальчик;
Борукаева И.Х., д.м.н., профессор кафедры нормальной и патологической физиологии ФГОУ ВПО КБГУ им. Х.М. Бербекова, г. Нальчик.
Работа поступила в редакцию 05.12.2014.