Эфирные масла широко используются в медицине, косметологии и пищевой промышленности [5]. Компоненты эфирных масел обладают широким спектром фармакологической активности, оказывают бактериостатическое, антисептическое, дезинфицирующее, противовирусное и фунгистатическое действие [1, 5]. Увеличение секреции бронхиальных желез и возбуждение дыхательного центра обуславливают отхаркивающее действие эфирных масел. Кроме того, эфирные масла улучшают деятельность желудочно-кишечного тракта и оказывают мочегонное действие [1]. Ряд эфирных масел нормализуют деятельность сердечно-сосудистой системы и ЦНС, оказывая седативное, болеутоляющее и гипотензивное действие. Широко используются в качестве основных компонентов ароматерапии [2].
Растения рода герань, в частности герань сибирская (Geranium sibiricum L.), содержат эфирное масло, выход которого достигает до 0,3 % [4]. Однако компонентный состав масла практически не изучен. В связи с этим исследование эфирного масла герани сибирской с целью его дальнейшего возможного применения в медицинской практике является актуальным. Нами был изучен компонентный состав при помощи метода ВЭЖХ, так как данный метод обладает высокой чувствительностью и экспрессностью и обеспечивает получение достоверных и воспроизводимых результатов [6].
Целью работы явилось исследование качественного и количественного состава эфирного масла травы герани сибирской (Geranium sibiricum L.).
Объектом исследования служила воздушно-сухая измельченная трава герани сибирской, заготовленная в Курской области в 2012–2013 годах, в период массового цветения растения.
Материалы и методы исследования
Для получения и количественного определения эфирного масла навеску (50,0 г) воздушно-сухого измельченного сырья герани сибирской помещали в колбу вместимостью 1000 мл, заливали 300 мл воды очищенной, закрывали пробкой с холодильником и приемником и доводили до кипения. Время перегонки от момента закипания – 2 часа. После охлаждения определяли объем эфирного масла в приемнике [3].
Для анализа эфирного масла в виалу «Agilent» на 20 мл помещали 0,5–5 г измельченной высушенной травы герани сибирской, добавляли внутренний стандарт (тридекан) из расчета 50 мкг на навеску, далее прибавляли 10 мл воды очищенной, прикручивали крышку с холодильником с воздушным охлаждением, помещали в небольшую песчаную баню с регулируемым подогревом и нагревали в течение 2 часов. В процессе отгонки летучие вещества адсорбировались на внутренней поверхности обратного холодильника. После охлаждения системы адсорбированные вещества смывали 3 мл особо чистого пентана в сухую виалу на 10 мл. Смыв концентрировали продувкой (100 мл/мин) особо чистого азота до остаточного объема экстракта 10 мкл, который полностью отбирали хроматографическим шприцом. Дальнейшее концентрирование пробы проводили в самом шприце до объема 2 мкл.
Ввод пробы в хроматографическую колонку проводили в режиме splitless, т.е. без деления потока, что позволяет ввести пробу без потери на деление и существенно увеличить чувствительность хроматографирования.
Исследование компонентного состава эфирного масла проводили методом газо-жидкостной хроматографии на хроматографе AgilentTechnologies 6890 c масс-спектрометрическим детектором 5973N. Условия анализа: хроматографическая колонка – капиллярная ДВ-5, длиной 30 м, внутренний диаметр 0,25 мм; газ-носитеь – гелий, скорость газа-носителя – 1 мл/мин., объем пробы – 2 мкл.; скорость ввода пробы 1,2 мл/мин в течение 0,2 минут; температура термостата 50 °С с программированием 3°/мин до 250 °С; температура детектора и испарителя 250 °С.
Компоненты эфирного масла идентифицировали в результате сравнения масс-спектров веществ, входящих в исследуемое эфирное масло, полученных в результате хроматографирования с данными библиотеки масс-спектров NISTOS5 и WILLEY 2007 с общим количеством спектров более 470000 в сочетании с программами для идентификации AMDIS и NIST. Количественное содержание компонентов рассчитывали, используя метод внутреннего стандарта [7].
Результаты исследования и их обсуждение
Первоначально нами было проведено количественное определение эфирного масла объемным методом [3], в основе которого лежит перегонка с водяным паром. В результате установлено, что содержание эфирного масла в траве герани сибирской составляет до 0,06 %. Эфирное масло представляет собой легкоподвижную жидкость желтоватого цвета с приятным специфическим запахом.
Анализ эфирного масла травы герани сибирской показал на хроматограмме не менее 60 веществ, из которых идентифицировали 53 (рисунок, таблица).
Состав эфирного масла герани сибирской
|
№ п/п |
Время удерживания |
Название компонента |
Содержание компонентов в образце (мг/кг) |
|
1 |
6.734 |
гепт-2, 4-диеналь |
1,08 |
|
2 |
7.405 |
бензацетальдегид |
16,34 |
|
3 |
8.878 |
транс-линалоол оксид |
3,04 |
|
4 |
9.325 |
цис-линалоол оксид |
1,87 |
|
5 |
9.664 |
2,5-диметил-циклогексанол |
2,32 |
|
6 |
9.795 |
линалоол |
11,20 |
|
7 |
11.708 |
борне-1-ол |
2,58 |
|
8 |
12.186 |
терпинен-4-ол |
2,19 |
|
9 |
12.525 |
р-мент-8-ен-3-ол |
9,50 |
|
10 |
13.018 |
деканаль |
3,52 |
|
11 |
13.89 |
z-цитраль |
14,29 |
|
12 |
14.761 |
гераниол |
38,38 |
|
13 |
14.923 |
Е-цитраль |
6,92 |
|
14 |
16.041 |
р-кумен-3-ол |
3,31 |
|
15 |
16.303 |
карвакрол |
26,23 |
|
16 |
20.112 |
транс-кариофиллен |
24,25 |
|
17 |
20.389 |
α-копаен |
2,11 |
|
18 |
20.806 |
нерил-ацетон |
7,11 |
|
19 |
21.091 |
α-кариофиллен |
6,87 |
|
20 |
21.345 |
фарнезен |
3,73 |
|
21 |
21.615 |
α-ионон |
5,44 |
|
22 |
21.715 |
β-ионон |
8.61 |
|
23 |
21.816 |
α-аморфен |
3,25 |
|
24 |
21.9 |
гермакрен D |
3,62 |
|
25 |
22.317 |
винилциклогептилацетат |
11,01 |
|
26 |
22.594 |
5,5,8а-триметил-3,5,6,7,8а-гексагидро-2Н-хромен |
13,62 |
|
27 |
22.864 |
β-бисаболен |
15,00 |
|
28 |
23.165 |
δ-кадинен |
10,25 |
|
29 |
24.036 |
элемен |
2,07 |
|
30 |
24.36 |
неролидол |
18,45 |
|
31 |
24.545 |
спатуенол |
25,89 |
|
32 |
24.63 |
кариофилленоксид |
42,23 |
|
33 |
24.753 |
ледол |
4,69 |
|
34 |
25.285 |
1,5,5,8-тетраметил-12-оксабицикло-9,10-додека-3,7-диен |
11,53 |
|
35 |
29.125 |
миристиновая кислота |
8,99 |
|
36 |
30.312 |
пентадек-2-он |
13,60 |
|
37 |
30.706 |
пентадекановая кислота |
7,50 |
|
38 |
31.238 |
фарнезил ацетон С |
7,61 |
|
39 |
31.839 |
пальмитолеиновая кислота |
11,96 |
|
40 |
31.916 |
изофитол |
4,38 |
|
41 |
32.325 |
пальмитиновая кислота |
117,68 |
|
42 |
34.052 |
фитол |
101.36 |
|
43 |
34.275 |
линолевая кислота |
27,79 |
|
44 |
34.345 |
линоленовая кислота |
37,85 |
|
45 |
34.368 |
олеиновая кислота |
10,56 |
|
46 |
34.63 |
стеариновая кислота |
11,50 |
|
47 |
36.249 |
трикозан |
9,73 |
|
48 |
36.982 |
тетракозан |
5,00 |
|
49 |
37.282 |
пентакозан |
2,22 |
|
50 |
38.377 |
гексакозан |
76,52 |
|
51 |
40.151 |
гептакозан |
9,47 |
|
52 |
41.138 |
сквален |
43,54 |
|
53 |
41.885 |
нонакозан |
11,59 |
Компонентный состав эфирного масла герани сибирской
Результаты исследования эфирного масла герани сибирской показали, что его доминирующими компонентами являются гераниол (38,38 мг/кг), гексакозан (76,52 мг/кг), фитол (101,36 мг/кг) и пальмитиновая кислота (117,68 мг/кг).
Выводы
1. Содержание эфирного масла в траве герани сибирской составляет 0,06 %.
2. Основными компонентами эфирного масла являются фитолгераниол (38,38 мг/кг), гексакозан (76,52 мг/кг), фитол (101,36 мг/кг) и пальмитиновая кислота (117,68 мг/кг).
Рецензенты:
Раздорская И.М., д.фарм.н., профессор, заведующая кафедрой управления и экономики фармации, ГБОУ ВПО «КГМУ», г. Курск;
Сипливая Л.Е., д.биол.н., профессор, заведующая кафедрой фармацевтической, токсикологической и аналитической химии, ГБОУ ВПО «КГМУ», г. Курск.
Работа поступила в редакцию 18.02.2014.