Предупреждение и снижение физического и психологического напряжения при транспортировке кроликов – одно из важнейших условий сохранения здоровья, повышения продуктивности и снижения себестоимости продукции [1, 3]. Особенно чувствительны к стрессу парные эндокринные железы – надпочечники, мозговое вещество которых служит основным источником катехоламиновых гормонов в организме – адреналина и норадреналина. Клетки коркового вещества надпочечников служат источником кортикостероидов. Адреналин необходим для выживания, так как обеспечивает реакцию на внезапную опасность. При ее возникновении адреналин выбрасывается в кровь и мобилизует запасы углеводов для быстрого высвобождения энергии, увеличивает мышечную силу, вызывает расширение зрачков и сужение периферических кровеносных сосудов. Таким образом, направляются резервные силы для бегства или борьбы, а кроме того, снижаются кровопотери благодаря сужению сосудов и быстрому свертыванию крови [2, 6].
При развитии патологических процессов в организме надпочечники часто подвергаются изменениям и отвечают заметными морфологическими сдвигами, влияющими на работу остальных внутренних органов, в частности сердца [4]. В связи с необходимостью более глубокого изучения патоморфологии надпочечников и сердца в процессе длительной транспортировки, познания механизмов, лежащих в основе этих состояний, возрастает интерес к фундаментальным исследованиям структурно-функциональных особенностей данных органов [3, 4, 6].
Целью настоящего исследования явилось изучение гистоструктуры миокарда и надпочечников кроликов с предварительным введением в организм гомеопатического препарата «Фоспасим» на фоне длительной транспортировки и механизма их взаимодействия в основе этих состояний.
Материалы и методы исследования
Материалом для исследования послужили гистологические препараты надпочечников и сердца, а также клинико-физиологические показатели 40 кроликов весом 3,0–3,5 кг в возрасте 4 мес. калифорнийской породы опытной и контрольной групп, которые транспортировались в течение 24 часов на расстояние 840 км в 2-ярусных сетчатых клетках в авторефрижераторе при температуре + 14 °С. Температура воздуха в месте погрузки составляла –22 °С, в месте выгрузки –14 °С. Погрузка, транспортировка и выгрузка явилась для кроликов физическим, нервным и эмоциональным напряжением. Для проведения исследования были подобраны 2 группы кроликов по 20 голов в каждой, выровненных по возрасту, живой массе, физиологическому состоянию. Первой опытной группе вводили внутримышечно препарат «Фоспасим» (ООО «Хелвет») 0,4 мл/гол. дважды: перед транспортировкой и после выгрузки в первый день адаптации, далее перорально по 12–13 капель ежедневно, в течение 7 дней. Контрольная группа кроликов перевозилась без участия расслабляющего средства в идентичных условиях. После стрессорного воздействия животные были забиты щадящим методом (эфирный наркоз) и взяты срезы надпочечников и сердца. После фиксации кусочков в 10 % формалине с последующей проводкой по спиртам и заливкой в парафин срезы органов толщиной 7 мкм окрашивали современным гистологическим методом (гематоксилин-эозином). Исследование срезов органов проводили на светооптическом микроскопе «Биолан» при увеличении: окуляр 10*, объектив 20,40. Статистическая обработка полученных данных включала подсчет среднеарифметических показателей абсолютных и относительных величин (Х) и их ошибки (Sx). Достоверность отличий средних величин оценивалась методом доверительных интервалов по t-критерию Стьюдента. Всего приготовлено 350 препаратов.
Результаты исследования и их обсуждение
После транспортировки опытная группа кроликов в сравнении с контрольной находились в более спокойном состоянии, они позволяли манипуляции, связанные с выгрузкой, поедали корм. Кролики контрольной группы находились в состоянии возбуждения, оказывали активное сопротивление при выгрузке, температура тела была повышенная (41, 9 ± 0,18 °C), сердцебиение учащенное (163 ± 2,1).
При гистологическом исследовании органов опытной группы получены следующие данные: надпочечники покрыты соединительнотканной капсулой, различают корковое вещество с клубочковой, пучковой и сетчатой зонами. Мозговое вещество образовано хромаффинными клетками, расположенными в виде скопления или тяжей, а также венозные синусоиды умеренного полнокровия (рис. 1). Надпочечники контрольной группы кроликов имеют венозную гиперемию. Поскольку мозговое и корковое вещество надпочечника имеет общее кровоснабжение, застой крови определяется как в кровеносных сосудах, так и в мозговом веществе. Наиболее значимыми является венозная гиперемия мозгового вещества (рис. 2).
Рис. 1. Корковое и мозговое вещество с венозными синусами надпочечников опытной группы животных. Окраска гематоксилин-эозин. Микрофотография. Ок. 10, об. 40
Рис. 2. Полнокровие венозных синусов мозгового вещества надпочечников контрольной группы животных. Окраска гематоксилин-эозин. Микрофотография. Ок. 10, об. 40
При изучении гистоструктуры мозгового вещества надпочечников контрольной группы кроликов видно, что венозные синусоиды полнокровны, с признаками периваскулярного отека. Вырабатываемый адреналин располагается очень плотно между переполненными венозными синусоидами (рис. 3), что свидетельствует об активации надпочечников и повышении секреции, что необходимо для мобилизации организма в процессе предотвращения угрозы (шум, тряска, скученность в транспортировочных клетках во время перевозки).
Рис. 3. Плотное расположение хромаффинных клеток с полнокровными сунусами надпочечников контрольной группы животных. Окраска гематоксилин-эозин. Микрофотография. Ок. 10, об. 40
Полнокровие венозных синусоидов мозгового вещества распространяется в капилляры, снабжающие кровью корковое вещество. В результате минералкортикоиды повышают реабсорбцию ионов натрия и выделение ионов калия, глюкокортикоиды стимулируют образование глюкозы из жиров и аминокислот, повышают возбудимость нервной ткани. В результате изменяется организация мембранных структур клеток. Эти процессы могут оказывать повреждающее воздействие в результате повышения проницаемости клеточных мембран для ионов, но в умеренной степени эти изменения обеспечивают расслабление миокарда и соответственно адаптацию сердца к действию катехоламинов (адреналина, норадреналина).
Морфологические исследования сердечной ткани опытной группы животных показывают, что сердце – фиброзно-мышечный полый орган, имеет три слоя: внутренний – эндокард, средний – миокард, наружный – эпикард. Миокард состоит из клеток – кардиомиоцитов, образующих функциональные волокна, слои которых спиралевидно окружают камеры сердца. Между кардиомиоцитами располагаются прослойки рыхлой соединительной ткани, сосуды, нервы. Патоморфологические изменения в тканях органа не находили.
При гистологическом исследовании миокарда опытной группы кроликов наблюдаем следующее: ядра кардиомиоцитов хорошо видны, имеют удлиненно-овальную форму, располагаются ближе к центру цитоплазмы и своей длинной осью ориентированы параллельно сарколемме; в саркоплазме видны поперечные полосы; цитоплазма некоторых кардиомиоцитов неравномерно или очень насыщенно окрашена; сарколемма четко определялась (рис. 4).
Катехоламины обеспечивают хорошую адаптацию коронарного кровотока к повышенным нагрузкам, однако при длительном действии раздражающих факторов у контрольной группы животных в гистоструктуре миокарда сердца выявляется гиперемия, особенно венозная, что свидетельствует о сердечной недостаточности.
Застой крови в кровеносных сосудах миокарда может быть разной степени интенсивности, тем не менее они нарушают характерную гистоструктуру кардиомиоцитов (рис. 5), отдельные кардиомиоциты, прилегающие к отдельным кровеносным сосудам, подвергаются деструктивным изменениям.
При этом клетки теряют границы, особенно в зоне расположения вставочных пластинок, слабо воспринимают красители. Ядро таких кардиомиоцитов также слабо окрашивается. Однако в миокарде встречаются участки со значительным расширением просвета кровеносного сосуда с повреждениями всех структур стенки с выходом эритроцитов за пределы сосудистого русла. Это явление – результат острой очаговой дистрофии миокарда, зона ишемии выглядит светлой, а иногда определяется кровоизлияние, лейкодиапедез и эритродиапедез. Мышечные волокна теряют исчерченность, четкость границы, интенсивно окрашиваются эозином, все это свидетельствует о некробиотических изменениях.
В зоне оболочки кровеносных сосудов сердца определяется повышенное содержание ферритина, ведущего к образованию гемосидерина, т.е. гемосидероз, скорее всего, имеет местный характер и является продуктом разрушения эритроцитов. Естественно, при слабом кровоснабжении сердца очаги ишемии миокарда увеличиваются и могут привести к инфаркту сердца. Особенно тревожным остается наличие значительного кровоизлияния в эпикарде, что может привести к тампонаде сердца.
Рис. 4. Миокард сердца опытной группы животных. Окраска гематоксилин-эозин. Микрофотография. Ок. 10, об. 40
Рис. 5. Венозная гиперемия миокарда сердца контрольной группы животных. Окраска гематоксилин-эозин. Микрофотография. Ок. 10, об. 40
Выводы
Таким образом, при длительной транспортировке в организме кроликов определяется выраженное изменение васкуляризации системы надпочечников, указывающих на срочную мобилизацию энергетических и функциональных резервов всех систем организма. В целом, суммируя картину гистоструктуры миокарда и надпочечников животных, получавших гомеопатический препарат «Фоспасим» на фоне длительной транспортировки, можно говорить о его протекторном действии. В данном случае внутримышечное введение препарата в дозе 0,4 мл/гол. перед транспортировкой и после выгрузки в первый день адаптации, далее перорально по 12–13 капель ежедневно, в течение 7 дней.
Рецензенты:
Андреева А.В., д.б.н., профессор, заведующая кафедрой инфекционных болезней, зоогигиены и ветсанэкспертизы, ФГБОУ ВПО «Башкирский ГАУ», г. Уфа;
Шириев В.М., д.б.н., профессор, директор ГНУ БНИИСХ, г. Уфа.
Работа поступила в редакцию 25.07.2013.