Scientific journal

Fundamental research

ISSN 1812-7339

"Перечень" ВАК

ИФ РИНЦ = 1,674

В настоящее время наблюдается прогрессивный рост распространённости заболеваний носа и околоносовых пазух. Воспаление верхнечелюстной пазухи является одной из самых распространенных ЛОР-патологий, как на территории РФ, так и за ее пределами. Так, в России пациенты с гайморитом составляют 20-30 % среди всех госпитализированных в ЛОР-отделения. Еще более значительный удельный вес (до 40 %) занимает синусит среди амбулаторных пациентов ЛОР-кабинетов больниц и поликлиник. Многие исследователи указывают на то, что уровень заболеваемости не имеет тенденции к снижению, лечение проводится не всегда адекватно, растет число случаев острого риносинусита, который переходит в хроническую форму. [1, 2, 4, 5, 6, 11]. Зачастую применяются массивные и длительные курсы антибиотикотерапии, способные вызвать множество осложнений, таких как дисфункция желудочно-кишечного тракта (ЖКТ) и печени, развитие резистентности к патогенным микроорганизмам, аллергические реакции, нефротоксичность, фотосенсибилизацию, эмболию, ототоксичность [7, 12]. Хорошо известно, что лечение больных хроническим гнойным риносинуситом (ХГРС), который плохо поддается или не поддается медикаментозному и хирургическому лечению, является серьезной проблемой, хотя в настоящее время, спектр лечебных мероприятий при данной патологии очень широк и включает антибиотикотерапию, применение деконгестантов, орошение полости носа соляными растворами, использование назальных и системных кортикостероидов [3, 10]. На этом фоне актуальным является поиск способа, позволяющего уменьшить сроки лечения и избежать развития осложнений, связанных с дефектами местного звена иммунитета.

Цель работы - выяснить эффективность предложенного принципа лечения хронического гнойного риносинусита.

Материалы и методы исследования

За основу предлагаемого нами метода лечения был взят запатентованный способ, разработанный Н.Ю. Логиной «Способ лечения хронических рецидивирующих заболеваний слизистой носа и околоносовых пазух методом эндоназальной аутолимфоцитотерапии» (патент RU 2403071 С1), включающий получение аутологичных лимфоцитов из венозной крови больного, их культивирование совместно с иммуномодулятором и введение в придаточные пазухи носа, посредством установленного ЯМИК-катетера, после предварительной эвакуации содержимого. Ввиду сложности и дороговизны процесса получения аутологичных лимфоцитов было предложено некоторое упрощение указанной методики. Ежедневно, на протяжении всего курса лечения, у пациентов в утренние часы забирали кровь из локтевой вены в пробирки с гепарином. В полученные образцы добавляли 0,01 %-й раствор тимогена (10 мкг на 1 мл крови) и инкубировали пробирки в течение часа при комнатной температуре, затем центрифугировали при 1500 об/мин. При помощи микродозатора из пробирок забирали две верхние фракции - плазму крови и слой лейкоцитов, разводили физиологическим раствором в соотношении 1:10 и вводили пациентам в гайморовы пазухи посредством заранее установленных дренажей. Предварительно пазухи промывали 0,9 % раствором натрия хлорида в объеме 20 мл. Необходимо отметить, что описанный способ терапии проводили на фоне продолжающегося, «стандартного» медикаментозного лечения.

Под нашим наблюдением находилось 30 пациентов в возрасте от 16 до 45 лет, проходивших лечение в стационарах г. Читы, которые были разделены на две группы: 15 пациентов, получавших т.н. «традиционную» терапию, включающую системный антибиотик, установку дренажа гайморовой пазухи\пазух с последующим ежедневным промыванием физиологическим раствором; 15 больных, получавших т.н. «оригинальную» терапию, которая заключалась в назначении «традиционной» терапии в сочетании с оригинальной методикой лечения, описанной выше. Контрольную группу составили 10 практически здоровых добровольцев. У здоровых и больных ХГРС после установки диагноза производили забор крови и носового секрета. Для получения смывов из полости носа пациенту в каждый общий носовой ход на 10 минут вводили сухие ватные тампоны, которые после извлечения переносили в пробирку, содержащую 1 мл 0,9 %-го раствора натрия хлорида. Через 30 мин тампоны тщательно отжимали, и полученный смыв использовали для определения уровня цитокинов [8].

Концентрацию цитокинов в сыворотке крови назальном секрете определяли методом ИФА (реактивы фирмы «Вектор-Бест», Новосибирск).

Уровень аутоантител (аАт) к цитокинам определяли оригинальным способом: лунки полистироловых планшетов сенсибилизировали антигенами: IL-1β; IL-2; IL-6; IL-8; IL-10; IF-α (реактивы фирмы «Вектор-Бест», Новосибирск) в количестве 20 мкг в объеме 200 мкл забуференного физиологического раствора (рН 7,4). После этого лунки планшетов трижды отмывали дистиллированной водой и вносили исследуемую жидкость (сыворотка крови, назальный секрет). После инкубации в течение 30 минут при комнатной температуре лунки планшетов вновь отмывали дистиллированной водой и вводили реактивы тест-систем («Вектор-Бест», Новосибирск) для выявления IgG в сыворотке крови и IgAs в назальном секрете.

Статистическая обработка результатов исследования проводилась с использованием пакета программ «BIOSTAT».

Течение местного гнойно-воспалительного процесса отражается на балансе цитокинов в сыворотке крови (табл. 1)

Содержание цитокинов в сыворотке крови больных ХГРС до и после лечения

Прямая зависимость между уровнем IL-2 и IL-10 и уровнем аАт класса IgG к ним в сыворотке крови больных ХГРС свидетельствует о потреблении этих групп цитокинов и их элиминации указанными аАт. Как видно из табл. 1 и 2, как в сыворотке крови, так и особенно в назальном секрете у больных увеличивается концентрация IL-1β, IL-4, IL-6 и IF-α по сравнению с группой контроля. Уменьшается концентрация IL-8. Следует обратить внимание на то, что в сыворотке крови больных не определяются IL-2 и IL-10, в то время как в назальном секрете эти цитокины регистрируются 0,18 ± 0,07 и 0,62 ± 0,39 пг/мл соответственно (табл. 2). Полученные факты свидетельствуют о возможности проникновения интерлейкинов из местного воспалительного очага в общий кровоток.

Содержание цитокинов в назальном секрете больных ХГРС до и после лечения

У пациентов, получавших «традиционную» терапию, повышается уровень всех определяемых цитокинов в сыворотке крови и IL-1β, IL-2, IL-4, IL-10, IF-α в назальном секрете. Таким образом, видим, что традиционная терапия сопровождалась повышением уровня как про-, так и противовоспалительных цитокинов в сыворотке крови, и в назальном секрете.

При оригинальном способе лечения регистрировали еще большее увеличение концентрации про- и антивоспалительных цитокинов, как в сыворотке крови, так и назальном секрете (см. табл. 1, 2). Выявленные сдвиги позволяют заключить, что предварительная активация клеток крови тимогеном с последующим их введением в воспаленные пазухи носа сопровождается более быстрым увеличением уровня провоспалительных цитокинов и клиническим улучшением. У больных, которых лечили оригинальным методом, гайморовы пазухи были санированы на 3-5 сутки, в то время как традиционная терапия давала положительный эффект на 7-8 день. Вероятно, инкубация крови с тимогеном сопровождалась активацией иммунокомпетентных клеток, что в последующем при введении активированных лейкоцитов в околоносовые пазухи приводило к их быстрой санации.

Концентрация IL-1β в назальном секрете у больных ХГРС увеличивается практически в 8 раз, также значительно возрастает уровень IL-2, IL-6, IL-8, IF-α. Следует отметить, что при ХГРС содержание IL-4 и IL-10 уменьшается, что, вероятно, связано с потреблением этой группы цитокинов и их элиминацией антителами класса sIgA.

Таким образом, цитокиновый профиль в назальном секрете подвергается более резким изменениям, нежели чем в системном кровотоке, что свидетельствует о преимущественно местном образовании про- и противовоспалительных цитокинов и в целом отражает степень остроты воспалительного процесса.

В специальных исследованиях мы изу­чали динамику уровня аАт и различных антигенов на фоне лечения ХГРС традиционными и оригинальными методами. Следует сразу указать, что в сыворотке крови исследовались аАт класса IgG, а в назальном секрете sIgА. Полученные данные приведены в табл. 3 и 4.

Как следует из представленных данных, уровень аАт класса IgG к IL-1β, IL-2, IL-4, IL-10, IF-α увеличивался в сыворотке крови как на фоне «традиционного», так и на фоне «оригинального» лечения. Такой сдвиг может свидетельствовать в пользу специфического иммунного ответа к данным интерлейкинам, и, следовательно, усилению их элиминации из организма. На наш взгляд, такая реакция может отображать интенсивность саногенетических реакций, направленных на уменьшение степени воспаления. Выявлено, что концентрация аАт к противовоспалительным цитокинам (IL-4, IL-10) возрастает в сыворотке крови, как при «традиционном», так и при «оригинальном» методах лечения. В назальном секрете, напротив, отмечается снижение уровня аАт к указанным интерлейкинам, что может свидетельствовать в пользу незначительной элиминации insitu противовоспалительных цитокинов в финале воспаления. Уровень аАт к IF-α после лечения уменьшается в назальном секрете и увеличивается в сыворотке крови.

Содержание аАт к цитокинам в сыворотке крови больных ХГРС до и после лечения

Таблица 4

Содержание аАт к цитокинам в назальном секрете больных ХГРС до и после лечения

Приведенные данные позволяют с большей долей вероятности указывать на роль аАт во взаимодействии с цитокинами в патогенезе местного воспаления. Таким образом, динамические сдвиги содержания аАт в сыворотке крови при использовании предлагаемого принципа лечения ХГРС носят более консолидированный характер, чем в назальном секрете, и в сочетании с однонаправленными изменениями уровня исследуемых цитокинов свидетельствуют о возможности регуляции их количества посредством образования иммунных комплексов с их последующей элиминацией. Динамика уровня аАт в назальном секрете на фоне «оригинальной» терапии, напротив, носит разнонаправленный характер, что также может свидетельствовать о наличии механизмов регуляции с участием местно-синтезированных аАт и высокой скорости протекания указанных процессов.

Нами установлено, что предлагаемый способ терапии, по сравнению с традиционным лечением, сопровождается быстрой санацией ОНП у больных с ХГРС. Следует еще раз указать, что при предложенном способе лечения у больных увеличивается количество как про-, так и противовоспалительных цитокинов в сыворотке крови, а в назальном секрете существенно снижается концентрация IL-1β, IL-6, IL-8. Подобные сдвиги могут свидетельствовать о быстрой санации местного воспалительного процесса. Однако в системном кровотоке уровень цитокинов продолжает оставаться высоким и, вероятнее всего, отражает реакцию цитокин-продуцирующих клеток, активированных различными триггерами, резорбированными в кровоток из очага гнойного поражения.

Кузник Б.И., д.м.н., профессор, заведующий кафедрой нормальной физиологии ГБОУ ВО ЧГМА Минздравсоцразвития Российской Федерации, г. Чита;

Степанов А.В., д.м.н., заведующий кафедрой безопасности жизнедеятельности и медицины катастроф ГБОУ ВПО ЧГМА Минздравсоцразвития Российской Федерации, г. Чита.

Работа поступила в редакцию 03.12.2012.