Прогрессирующее развитие общества в последние годы, к сожалению, не обходится без усовершенствования оружия массового поражения и увеличения частоты военных конфликтов, террористических актов, массовых катастроф. В связи с этим остается актуальной проблема устойчивой тенденции к увеличению травматизма, где огнестрельные ранения органов опорно-двигательного аппарата составляют значительную часть [1]. В результате этого остается открытым вопрос о необходимости дальнейшего изучения современных методов лечения с учетом реактивности организма и регенерации тканей, в частности реактивности органов кроветворения.
Целью данной работы было изучение морфологических изменений тимуса на этапах заживления раны после механической травмы.
Материалы и методы исследования
В работе использованы экспериментальные животные - крысы обоих полов весом 250-350 г. Животные содержались в стандартных условиях вивария. Подопытные крысы были разделены на 2 группы: 1-я интактная - контрольная (n = 12), 2-я - опытная (n = 36). Под эфирным наркозом крысам 2-й группы наносили травму с помощью специальной установки, позволяющей дозировано передавать тканям кинетическую энергию, равную энергии удара пули калибром 5,6 мм.[2] Травма наносилась на уровне средней трети бедра с повреждением кожи, мышц и переломом большеберцовой кости. Забор материала производили на 3-и (n = 12), 15-е (n = 12) и 25-е (n = 12) сутки от начала опытов. Животных выводили из опыта под эфирным наркозом путем декапитации.
Гистологические препараты тимуса готовили по общепринятой методике, окрашивали гематоксилин-эозином. Морфометрию проводили окулярной сеткой при увеличении ×259. Морфологические исследования включали приготовление, микроскопирование и морфометрию гистологических препаратов участка механической травмы и органов лимфоидной системы - тимуса.
В тимусе определяли размеры долек органа по их длиннику и поперечнику, общую площадь дольки, площадь корковой и мозговой зоны в условных единицах, а также содержание больших, средних и малых лимфоцитов в корковом и мозговом веществе долек.
Статистический анализ проводили при помощи программ Statistica for Windows (Версия 7.0, StatSoft, Inc). Различия между выборками определяли с помощью критерия множественных сравнений Данна и дисперсионного анализа Краскеля-Уоллиса. Нулевая гипотиза отвергалась, а альтернативная принималась при р < 0,05.
Результаты исследования и их обсуждение
В результате проведенных исследований в процессе заживления раны были выявлены реактивные изменения в тимусе.
На 3 сутки после нанесения экспериментальной травмы у животных морфометрические изменения тимуса характеризовались увеличением показателя площади коркового вещества, что составило 143,3 ± 6,3 усл.ед., отмечались максимально низкие значения площади мозгового вещества ‒ 76,8 ± 5,2 усл.ед. (рис. 1).
Рис. 1. Изменения площади коркового и мозгового вещества долек тимуса в процессе заживления огнестрельной травмы конечности у крыс
Анализ уровня лимфоцитов показал увеличение количества больших и средних лимфоцитов в корковом веществе до 12,9 ± 1,8 и до 48,7 ± 2,3 % соответственно (в сравнении с контрольной группой), а содержание малых лимфоцитов снижалось, достигая минимальных значений - 38,4 ± 2,6 %,что согласовывается с данными Сапина М.Р. [4] (рис. 2).
Рис. 2. Именения содержания разновидностей лимфоцитов коркового вещества тимуса на этапах заживления механической травмы
Анализ содержания лимфоцитов в мозговом веществе тимуса показал, что количество больших и малых лимфоцитов увеличивалось относительно контрольной группы на 5,9 ± 0,9 и 39,7 ± 2,5 % соответственно, а содержание средних лимфоцитов снижалось на 6,1 % (относительно контроля) и составило 54,4 ± 2,3 %, что свидетельствует об активации иммунного ответа на формирование фазы острого воспаления и образования лейкоцитарного вала вокруг очага повреждения.
Результаты исследования подопытных животных на 15-е сутки, характеризующие пролиферативную фазу течения огнестрельного ранения, показали, что площадь коркового вещества долек тимуса снижалась до 111,8 ± 6,4 усл. ед. Этот процесс сопровождался уменьшением количества больших и средних лимфоцитов до 9,7 ± 0,9 и до 41,9 ± 2,4 % соответственно, на фоне увеличения числа малых лимфоцитов - до 48,4 ± 2,5 %. Показатель площади мозгового вещества увеличивался и составил 86,0 ± 3,7 усл. ед. Анализ содержания лимфоцитов выявил снижение числа больших и малых лимфоцитов в мозговом веществе - 4,0 ± 0,8 и 38,1 ± 2,8 % соответственно, и увеличение количества средних лимфоцитов - 55,9 ± 2,4 %. Это может свидетельствовать о начальном этапе восстановительной дифференцировки лимфоцитов и снижении выраженности иммунного ответа на течение раневого процесса.
На 25-е сутки, характеризующие адаптивную фазу течения огнестрельного ранения, отмечалось восстановление показателей коркового и мозгового вещества тимуса, которые составили 105,1 ± 4,7 и 88,7 ± 4,8 ус. ед. соответственно. Содержание больших, средних и малых лимфоцитов коркового вещества тимуса нормализовалось и составило 8,5 ± 0,9, 41,3 ± 2,7 и 50,2 ± 2,4 %, что соответствовало показателям контрольной группы. Содержание больших, средних и малых лимфоцитов мозгового вещества тимуса также приближалось к показателям интактных животных и составило 3,0 ± 0,8, 59,0 ± 1,8 и 38,0 ± 4,8 % соответственно. Результаты исследования свидетельствуют о развитии стойкой адаптивной перестройки тканей с завершением регенерации и формированием рыхлой волокнистой соединительной ткани, что, по мнению Данилова Р.К. [2], соответствует завершению репаративного процесса.
Таким образом, проведенный анализ реактивных изменений течения раневого процесса после механической травмы с передачей тканям большой кинетической энергии характеризуется закономерными реактивными изменениями в тимусе. В фазе некроза и воспаления отмечается активация иммунного ответа и интенсивный выход лимфоцитов в кровеносное русло, в очаг повреждения и формирование лейкоцитарного вала. В фазе пролиферации сохраняются признаки, характерные для фазы некроза и воспаления, но уже наблюдается уменьшение выраженности изменений, что свидетельствует о снижении миграции костно-мозговых предшественников Т-лимфоцитов и восстановлении их дифференцировки, а также степени выраженности иммунной реакции организма. В фазе адаптации происходит стойкая перестройка тканей с завершением регенераторного процесса.
Рецензенты:
Шакиров Д.Ф., д.м.н., профессор кафедры общей гигиены с экологией ГОУ ВПО «Башкирский государственный медицинский университет Росздрава», г. Уфа;
Гайнуллина М.К., д.м.н., ведущий научный сотрудник отдела охраны здоровья работающих ФБУН «Уфимский НИИ медицины труда и экологии человека», г. Уфа;
Гладилин Г.П., д.м.н., профессор, зав. кафедрой клинической лабораторной диагностики ГОУ ВПО «Саратовский ГМУ им. В.И. Разумовского Росздрава», г. Саратов.
Работа поступила в редакцию 16.06.2011.