Цель исследования - разработка универсального метода контроля динамики внутрижелудочной среды, позволяющего своевременно диагностировать рецидив кровотечения и отслеживать эффективность подавления желудочной секреции.
В качестве такого метода использована импедансометрия. Для исследования кислотности желудочного сока принцип импедансометрии использован в приборе Реогастрограф РГГ9-01, разработанном в Санкт-Петербурге в ОАО «Завод «Радиоприбор» [2]. Исследование проводится in vivo с помощью многоэлектродного желудочного зонда. Недостатками прибора являются ограничение исследовательских возможностей и большой диаметр зонда.
Материалы и методы исследования
В нашей работе использован Реогастрограф РГГ9-01 и аппаратно-программный комплекс (АПК), разработанный совместно с саратовскими предприятиями ООО «Медэлектроника» и ООО «Телемак», при поддержке Фонда содействия развитию малого бизнеса в научно-технической сфере (патент № 55598 и № 58927 от 17.05.2006 г.). Прибор выполнен в виде нескольких модулей и сочетает в себе возможности импедансометра, реографа и электростимулятора.
Для мониторинга внутрижелудочной среды использован режим импедансометрии.
Разработанный АПК может работать как со стандартным зондом, диаметром 7 мм, так и с зондом, диаметром 4,7 мм, имеющим 11 электродов из нержавеющей стали. Форма электродов и их расположение идентичны у обоих зондов. Новый зонд изготовлен из современных материалов на основе стандартного дуоденального зонда. Кроме того, были изготовлены двухэлектродные зонды для исследований in vitro, позволяющие одновременно проводить измерения сопротивления растворов и биологических жидкостей в 5 флаконах или пробирках.
Исследовались кровь, эритроцитная масса (Er масса), свежезамороженная плазма (СЗП) и плазмозамещающие растворы (ПЗР) (хлорид натрия 0,9 %, хлосоль, дисоль, трисоль, бикарбонат натрия). Измерение электропроводности плазмы и растворов проводилось как по отдельности (15 образцов), так и при добавлении к ним разного количества крови или Er-массы. Исследования in vivo проводились на добровольцах с соблюдением всех этических норм и после подписания ими протокола информированного согласия.
В эксперименте участвовали 15 мужчин в возрасте 20-25 лет, проходящих медицинское обследование, патология желудочно-кишечного тракта у которых была исключена. Испытуемых обследовали натощак с помощью зонда диаметром 4,7 мм с капилляром для заведения аутокрови.
Кровь в количестве 40 мл брали в ходе эксперимента из кубитальной вены. Измерение сопротивления внутрижелудочной среды проводили до и после заведения крови. Затем измерение повторяли через 1,5-2 часа после внутривенного введения 20 мг ква- матела, т.о., моделировалась ситуация рецидива кровотечения у больных с блокированной и сохраненной желудочной секрецией.
Результаты исследования и их обсуждение
Измерения проводились на частотах 10 и 200 кГц зондирующего тока. Использование двух частот объясняется особенностями прохождения электрического тока через биологическую ткань. Ток низкой частоты распространяется преимущественно по межклеточным пространствам, а при вну- трижелудочной импедансометрии только через содержимое желудка. На частотах более 100 кГц емкостная составляющая общего сопротивления тканей уменьшается, и ток распространяется через клеточные мембраны. В результате по частотной дисперсии сопротивления можно судить о соотношении вне- и внутриклеточной жидкости в тканях, а в желудке - о свойствах слизистой оболочки. При возобновлении кровотечения появление клеток крови в содержимом желудка должно изменить степень частотной дисперсии сопротивления, что можно использовать в качестве диагностического критерия рецидива геморрагии. О выраженности частотной дисперсии можно судить по коэффициенту поляризации (Кп) - отношению сопротивления при высокой частоте зондирующего тока к значению сопротивления при низкой частоте тока [3]. В растворах и биологических жидкостях, не содержащих клетки, Кп приближается к 1 (табл. 1).
Таблица 1
Импеданс и коэффициент поляризации биологических жидкостей, Ом (исследование на двух частотах зондирующего тока)
Исследуемая биологическая жидкость |
Импеданс, Ом |
Кп |
|
10 кГц |
200 кГц |
||
СЗП, 150 мл |
34,77 |
34,02 |
0,98 |
Кровь, 50 мл |
75,3 |
71,44 |
0,95 |
Эритроцитарная масса, 150 мл |
360,7 |
265,3 |
0,74 |
В крови Кп уменьшается до 0,95, а при увеличении концентрации клеток - Er-масса - снижается до 0,74.
Такое значение Кп может быть характерно для кровяного сгустка, формирующегося вокруг зонда при кровотечении. В табл. 1 указан объем жидкости, в котором измерялось сопротивление, поскольку этот показатель и расстояние до стенок флакона определяют значение сопротивления. При использовании флаконов емкостью 200 мл сопротивление оставалось неизменным на протяжении исследования при количестве жидкости более 50 мл и расположении электродов по центру сосуда.
Наличие емкостных свойств токопрово- дящей среды можно обнаружить, регистрируя сдвиг фаз между током и напряжением, что в самом простом варианте характеризуется появлением фигуры Лиссажу на экране осциллографа.
В серии опытов с ПЗР, кровью и Er -массой мы обнаружили существенное изменение фигуры Лиссажу при формировании сгустка. В неизмененной крови сдвиг фаз оказался минимальным и при данной схеме регистрации не представилось возможным обнаружить его изменения при добавлении крови к ПЗР. Следует отметить, что сдвиг фаз регистрировался в Er-массе и при контакте электродов зонда с тканями. При добавлении крови к плазмозамещающим растворам сопротивление увеличивается, поскольку сопротивление крови больше сопротивления любого из растворов (табл. 2).
Увеличение сопротивления достоверно во всех растворах (p < 0,05), а вот Кп достоверно уменьшался только в растворе хлорида натрия с ацидин-пепсином и в растворе бикарбоната натрия. Вероятнее всего соотношение путей распространения тока (вне клеток или через клетки) при изменении частоты было более значимо при нейтрализации буферными системами крови ff-ионов и OH-групп, обусловливающих высокую электропроводность указанных растворов. В остальных растворах, несмотря на возрастание общего сопротивления, такой концентрации клеточных элементов было недостаточно, чтобы изменить путь распространения зондирующего тока.
Таблица 2
Изменение импеданса плазмозамещающих растворов при добавлении крови, Ом (исследование на двух частотах зондирующего тока)
Исследуемый раствор |
Импеданс на двух частотах тока при добавлении крови, Ом |
|||||||
без крови |
4 мл крови |
7 мл крови |
10 мл крови |
|||||
10 кГц |
200 кГц |
10 кГц |
200 кГц |
10 кГц |
200 кГц |
10 кГц |
200 кГц |
|
Хлорид натрия 0,9 % - 100 мл и ацидин-пепсин |
17,2 |
16,2 |
18,5 |
17,2 |
20,0 |
18,9 |
21,7 |
20,5 |
Хлосоль, 100 мл |
29,5 |
28,9 |
30,3 |
29,4 |
31,0 |
30,1 |
31,5 |
30,6 |
Дисоль, 100 мл |
32,7 |
31,8 |
33,4 |
32,4 |
34,0 |
33,1 |
34,2 |
33,3 |
Трисоль, 100 мл |
27,6 |
26,9 |
28,5 |
27,6 |
28,7 |
27,9 |
29,8 |
28,9 |
Бикарбонат натрия, 100 мл |
11,5 |
10,9 |
11,8 |
11,3 |
12,0 |
11,6 |
12,5 |
12,1 |
Исследования in vivo подтвердили возможность регистрации с помощью импедансометрии динамики показателей кислотности желудочного сока при использовании препаратов, подавляющих желудочную секрецию, а также изменения электропроводности внутрижелудочной среды при появлении в ней крови.
Зонд во всех случаях заводили в желудок таким образом, что зоны с 1 по 8 располагались в желудке, а зона 9 - в пищеводе. По распределению значений импеданса во всех зонах можно контролировать правильность положения зонда. Наименьшие значения импеданса характерны для тела желудка (зоны 3-6). Хорошая электропроводность здесь обусловлена высокой концентрацией H+- ионов. Другие ионы (K+, Na+, Mg2+, Cl- и т.д.) вносят гораздо меньший вклад в электропроводность желудочного сока. Однако достоверно судить о значении pH можно только в диапазоне 0,9-2,2 [2]. Для зонда диаметром 4,7 мм это соответствует диапазону от 10 до 100 Ом на частоте зондирующего тока 10 кГц. Максимальное значение сопротивления характерно для электродов, размещенных в пищеводе, что обусловлено отсутствием в этой области H-ионов, а также минимальным объемом жидкости вообще. Плотное примыкание электродов к стенке пищевода в этом случае обусловливает и низкий по сравнению с телом желудка коэффициент поляризации. Влияние объема содержимого в межэлектродном пространстве на импеданс позволяет отслеживать перистальтику желудка и пищевода. Для исключения влияния перистальтики на показатели импеданса при исследовании кислотности данные регистрируются в течение 1 минуты, а затем усредняются (по 30 измерений в каждой зоне поочередно на частотах 10 и 200 кГц).
Средние значения высокочастотного и низкочастотного импеданса для всех исследуемых зон представлены в табл. 3.
Эти данные свидетельствуют, что появление крови в желудке достоверно повышает сопротивление в теле желудка на обеих частотах зондирующего тока при сохраненной желудочной секреции (p < 0,05). Достоверно увеличивается внутрижелудочный импеданс и через 1,5-2 часа после введения кваматела. Достоверными являются изменения импеданса и при введении крови на фоне блокированной желудочной секреции (p < 0,05). Это отмечено во всех 15 наблюдениях. Однако чем существенней блокирована секреция желудка, тем в большей степени изменение импеданса свидетельствует об изменении объема желудочного содержимого. С определенного значения при добавлении крови сопротивление начинает не возрастать, а снижаться. Поэтому по данным, представленным в табл. 3, не вполне корректно сравнивать значения импеданса до и после появления крови по среднему значению для всех опытов.
Если значение низкочастотного импеданса изначально оказывалось ниже 80-105 Ом (для каждой зоны свой предел) то, как при блокировании секреции желудка, так и при появлении в нем крови, этот показатель возрастал. При превышении этого предела значение импеданса с появлением крови в желудке снижалось, что свидетельствовало об увеличении объема в нем содержимого. Параллельно происходили изменения значений высокочастотного импеданса, но уже со своими пределами. Для Кп такой закономерности выявлено не было.
Таблица 3
Изменение внутрижелудочного импеданса при добавлении крови, Ом (исследование на двух частотах зондирующего тока)
Зона желудка |
Внутрижелудочный импеданс на двух частотах тока, Ом |
|||||||
исходный уровень |
при появлении крови в желудке |
на фоне введения кваматела |
кровь в желудке на фоне кваматела |
|||||
10 кГц |
200 кГц |
10 кГц |
200 кГц |
10 кГц |
200 кГц |
10 кГц |
200 кГц |
|
Зона 1 |
66,33 |
57,40 |
65,65 |
59,86 |
130,80* |
107,50* |
143,41 |
126,54 |
Зона 2 |
52,18 |
46,64* |
67,55 |
61,82* |
95,45* |
78,75* |
98,15 |
85,48 |
Зона 3 |
52,08* |
47,49* |
70,42* |
64,70* |
88,91* |
72,11* |
95,97 |
80,00 |
Зона 4 |
55,17* |
50,86* |
73,92* |
67,63* |
87,25* |
70,25* |
97,10 |
78,85 |
Зона 5 |
62,63 |
55,83 |
81,84 |
72,93 |
95,21* |
74,32* |
97,79 |
78,97 |
Зона 6 |
69,07 |
59,47 |
90,81 |
76,33 |
104,71* |
78,69* |
102,65 |
79,20 |
Зона 7 |
82,09 |
68,99 |
104,84 |
76,14 |
118,81 |
82,22 |
117,95 |
82,69 |
Зона 8 |
99,86 |
79,65 |
120,07 |
76,73 |
138,61 |
86,06 |
143,61 |
85,36 |
Зона 9 |
238,35 |
111,94 |
238,98 |
112,06 |
269,75 |
120,14 |
230,02 |
101,86 |
Примечание: *- отличия между группами достоверны.
Чтобы уменьшить случайный разброс значений импеданса по отдельным зонам и исключить влияние перистальтики и смещений зонда, можно использовать суммарный внутрижелудочный импеданс для зон 1-6. Этот показатель характеризует изменение объема содержимого желудка, что важно при возобновлении кровотечения. Однако специфичность его еще предстоит выяснить дальнейшими исследованиями.
Заключение
Таким образом, импедансометрия может использоваться в качестве контроля динамики внутрижелудочной среды у больных с кровотечениями. По изменению значений внутрижелудочного импеданса можно достаточно надежно судить о концентрации водородных ионов в реальном времени и появлении крови в содержимом желудка. Повышения специфичности результатов можно достичь, принимая в расчет изменение объема содержимого желудка и регистрируя сдвиг фаз при формировании сгустка крови вокруг электродов зонда.
Рецензенты:
- Ивачёва А.С., д.м.н., зав. кафедрой хирургии и эндоскопии ГОУ ДПО ПИУВ Росздрава, г. Пенза;
- Толстокоров А.С., д.м.н., профессор, зав. кафедрой хирургии и онкологии ФПК и ППС ГОУ ВПО Саратовский ГМУ им. В.И. Разумовского, г. Саратов.
Работа поступила в редакцию 04.05.2011.