Известно, что на фоне применения иммунодепрессантов возможен избыточный рост бактерий в кишечнике, приводящий к бактериальной транслокации; в этом отношении одним из наиболее опасных представителей является стафилококк, способный вызывать поражения любых органов и тканей, а также тяжёлые септические осложнения.
Цель настоящего исследования - оценка влияния циклофосфамида, преднизолона и метотрексата на численность стафилококков в составе кишечной микрофлоры белых мышей.
Материалы и методы. В работе использованы препараты Веро-метотрексат, 1%-ный раствор натриевой соли метотрексата для инъекций (ЗАО «Верофарм», Москва), Циклофосфан, порошок для приготовления раствора для инъекций (ОАО «Биохимик», Саранск), Преднизолон Никомед, раствор для внутривенного и внутримышечного введения (Nycomed, Австрия), питательные среды производства ГНЦ прикладной микробиологии и биотехнологии (г. Оболенск).
Исследования выполнены на 40 белых беспородных мышах-самках массой 30 ± 3 г. Контрольные и опытные группы состояли из 10 животных. Препараты вводили внутрибрюшинно. Схемы введения выбирали исходя из режимов дозирования, применяемых у человека. В соответствии с рекомендациями «Руководства по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ» (Москва, 2000) дозы, применяемые у человека, увеличивали в 11,8 раза. Циклофосфамид вводили в дозе 35,4 мг/кг ежедневно; метотрексат - 2,5 мг/кг в неделю за 2 приёма с интервалом 24 часа; преднизолон - 2,5 мг/кг ежедневно. Продолжительность введения всех препаратов составляла 6 недель. Животным контрольной группы вводили стерильную дистиллированную воду. Выделение стафилококков осуществляли на элективно-солевом агаре (г. Оболенск).
Статистическую обработку полученных данных проводили на IBM PC совместимом компьютере с помощью программ STATISTICA ® (StatSoft, Inc.) релиз 7.0 и Primer of Biostatistics (Stanton A. Glantz, McGraw Hill) версия 4.03 в среде WINDOWS ™.
Результаты. Распределение значений оцениваемых показателей отличалось от нормального, поэтому для оценки различий между группами использовали непараметрический дисперсионный анализ по критерию Крускала-Уоллиса и множественные сравнения по критерию Данна.
Через 2-4 недели после начала введения иммунодепрессантов наблюдалось статистически достоверное повышение числа стафилококков во всех опытных группах (таблицы 1 и 2). Через 6 недель количество стафилококков было статистически достоверно увеличено у мышей, получавших преднизолон и метотрексат (таблица 3).
Таблица 1. Общее число стафилококков в фекалиях мышей, получавших иммунодепрессанты (данные через 2 недели после начала введения)
|
Группа |
Медиана |
Минимум |
Максимум |
25-й процентиль |
75-й процентиль |
Квартильный размах |
|
число стафилококков в млн КОЕ/г |
||||||
|
Контроль |
1,23 |
0,79 |
2,00 |
1,09 |
1,41 |
0,32 |
|
Циклофосфан |
39,00 |
22,46 |
108,72 |
30,31 |
58,04 |
27,73 |
|
Преднизолон |
60,21 |
15,07 |
80,63 |
50,24 |
76,60 |
26,35 |
|
Метотрексат |
105,51 |
14,93 |
456,30 |
63,21 |
156,47 |
93,26 |
Таблица 2. Общее число стафилококков в фекалиях мышей, получавших иммунодепрессанты (данные через 4 недели после начала введения)
|
Группа |
Медиана |
Минимум |
Максимум |
25-й процентиль |
75-й процентиль |
Квартильный размах |
|
число стафилококков в млн КОЕ/г |
||||||
|
Контроль |
0,53 |
0,11 |
2,67 |
0,31 |
0,62 |
0,31 |
|
Циклофосфан |
7,71 |
4,09 |
16,62 |
5,90 |
15,06 |
9,16 |
|
Преднизолон |
57,10 |
5,97 |
202,11 |
7,21 |
89,28 |
82,06 |
|
Метотрексат |
7,93 |
2,23 |
40,00 |
5,34 |
10,34 |
5,00 |
Таблица 3. Общее число стафилококков в фекалиях мышей, получавших иммунодепрессанты (данные через 6 недель после начала введения)
|
Группа |
Медиана |
Минимум |
Максимум |
25-й процентиль |
75-й процентиль |
Квартильный размах |
|
число стафилококков в млн КОЕ/г |
||||||
|
Контроль |
1,48 |
0,58 |
2,05 |
0,79 |
2,00 |
1,21 |
|
Циклофосфан |
0,67 |
0,49 |
1,15 |
0,58 |
0,71 |
0,13 |
|
Преднизолон |
190,88 |
51,76 |
280,70 |
55,93 |
220,15 |
164,21 |
|
Метотрексат |
22,11 |
5,63 |
123,53 |
9,56 |
77,47 |
67,91 |
Таким образом, на фоне применения иммунодепрессантов, в особенности преднизолона и метотрексата, происходит существенное повышение содержания стафилококков в составе кишечной микрофлоры, что создаёт потенциальную опасность транслокации и развития септических осложнений. Кроме того, стафилококки способны выступать в качестве триггерного фактора иммунопатологических процессов.
Работа представлена на V научную международную конференцию «Современные проблемы экспериментальной и клинической медицины», Тайланд (Паттайа), 20-28 февраля 2008 г. Поступила в редакцию 27.12.2007.