Scientific journal

Fundamental research

ISSN 1812-7339

"Перечень" ВАК

ИФ РИНЦ = 1,674

Становление организма человека в значительной степени зависит от активности тромбоцитарного гемостаза, во многом обусловливающей адекватные реологические свойства крови [4]. В детском возрасте это особенно важно, когда активно идет рост и развитие организма и от достаточного притока крови в ткани зависит оптимальное становление физических и психических функций. При этом до сих пор недостаточно изучено состояние тромбоцитарной активности у детей 7-9 лет, обеспечивающих гемостаз. Не оценена возрастная динамика агрегационной активности их тромбоцитов под влиянием различных индукторов и их сочетаний, имеющихся в условиях кровотока. У этих детей также не оценена выраженность морфологической активности тромбоцитов in vivo, определяющая жидкостные свойства крови и текучесть ее по сосудам. В этой связи была сформулирована цель проведенного исследования: выяснить активность тромбоцитарных функций у здоровых детей 7-9 лет из благополучных семей, родители которых не имеют вредных привычек.

Материалы и методы исследования

Обследованию подвергнуты 75 здоровых детей 7-9 лет (24 ребенка 7 лет, 25 детей 8 лет и 26 детей 9 лет). У всех обследованных проводилось определение уровня внутритромбоцитарного ПОЛ по концентрации базального уровня малонового диальдегида (МДА) в реакции восстановления тиобарбитуровой кислоты [7] в модификации [3] и по уровню ацилгидроперекисей (АГП) [2], каталазы и СОД [5]. Подсчитывалось количество тромбоцитов в капиллярной крови в камере Горяева. Продукты лабилизации тромбоцитарных фосфолипидов - активаторов свертывания (фактор - тромбоцитов) оценивали по методу Е.Д. Еремина [1] с вычислением индекса тромбоцитарной активности (ИТА). Длительность агрегации тромбоцитов (АТ) определялась визуальным микрометодом по Шитиковой А.С. (1999) [6] с использованием в качестве индукторов АДФ (0,5⋅10-4 М), коллагена (разведение 1:2 основной суспензии), тромбина (0,125 ед/мл), ристомицина (0,8 мг/мл) (НПО «Ренам»), адреналина (5⋅10-6 М., завод Гедеон Рихтер). Внутрисосудистая активность стенки (ВАТ) сосуда определялась с фазовым контрастом по Шитиковой А.С. (1999). Статистическая обработка полученных результатов проведена с использованием t-критерия Стьюдента.

Результаты исследования и их обсуждение

При включении в группу исследования у всех детей определяли основные физиологические параметры, проводили морфологический и биохимический анализы крови, показавшие, что оцениваемые общие показатели у всех обследуемых находились в пределах физиологической нормы.

Содержание первичных продуктов ПОЛ-АГП в тромбоцитах у здоровых 7-летних детей составляло 1,92 ± 0,10 Д233/109тр., достоверно не меняясь к 9 годам, достигая в этом возрасте 1,88 ± 0,09 Д233/109тр. При этом уровень базального МДА в тромбоцитах - конечного продукта ПОЛ у семилетних обследованных составил 0,62 ± 0,008 нмоль/109 тр., испытывая легкую тенденцию к снижению к 9 годам жизни (0,57 ± 0,007 нмоль/109 тр.). Активность каталазы и СОД в кровяных пластинках, находившихся под наблюдением здоровых детей младшего школьного возраста имела легкую тенденцию к повышению с 7 лет (8620,0 ± 218,0 МЕ/109 тр. и 1320,0 ± 9,4 МЕ/109тр. соответственно) до 9 лет (8150,0 ± 137,2 МЕ/109 тр., 1342,0 ± 10,0 МЕ/109 тр. соответственно).

Таблица 1

Агрегационная активность тромбоцитов

Величина ИТА у семилетних обследованных составляла 22,0 ± 0,06 %, оставаясь на близком уровне до девятилетнего возраста (22,9 ± 0,12 %). Это указывало на стабильность в возрасте 7-9 лет у здоровых детей в кровяных пластинках уровня продуктов лабилизации тромбоцитарных фосфолипидов - активаторов свертывания крови. У обследованных детей 7 лет время развития АТ под влиянием коллагена составляло 34,2 ± 0,03 с., находясь на сходном уровне у более старших обследуемых (табл. 1). Аналогичная активность АТ в младшем школьном возрасте у детей отмечена под влиянием АДФ (в 7 лет 44,7 ± 0,10 с., в 9 лет 43,7 ± 0,02 с.) и ристомицина (в 7 лет 49,0 ± 0,06 с., в 9 лет 48,7 ± 0,05 с.). В более поздние сроки развивалась тромбиновая и адреналиновая АТ, составляя в 7 лет 58,0 ± 0,13 с. и 99,4 ± 0,08 с. соответственно, достоверно не меняясь у более старших обследованных (в 9 лет 56,9 ± 0,05 с. и 98,5 ± 0,10 с. соответственно).

Количество дискоцитов в крови здоровых семилетних детей оказалось на достаточно высоком уровне (82,6 ± 0,04 %) с небольшой тенденцией к снижению по мере увеличения возраста, составляя к 9 годам 82,0 ± 0,14 % (табл. 2). При этом количество диско-эхиноцитов также не менялось, находясь на уровне 12,2 ± 0,10 % у наиболее старших детей. Содержание сфероцитов, сферо-эхиноцитов и биполярных форм тромбоцитов испытывало с 7 до 9 лет статистически незначимые колебания, составляя у девятилетних детей 2,9 ± 0,08 %, 1,9 ± 0,06 % м 1,0 ± 0,10 % соответственно. Величина суммы активных форм тромбоцитов здоровых детей также оставалась стабильной между тремя (17,7 ± 0,11 %) и 6 годами (18,0 ± 0,07 %). Количество малых и больших агрегатов в кровотоке детей имело тенденцию к нарастанию с 3,04 ± 0,11 и 0,10 ± 0,001 на 100 свободнолежащих тромбоцитов в 7 лет до уровня 3,10 ± 0,04 и 0,12 ± 0,003 на 100 свободнолежащих тромбоцитов в 9 лет соответственно причем количество тромбоцитов в агрегатах у здоровых детей также нарастало с возрастом, составляя в 9 лет 5,69 ± 0,03 % против 5,77 ± 0,06 % у девятилетних, что говорит о тенденции к повышению у них активности тромбоцитов in vivo.

Таким образом, у здоровых детей младшего школьного возраста отмечается стабильно невысокая тромбоцитарная активность, способная поддерживать на оптимальном уровне у них реологические свойства крови.

Таблица 2

Внутрисосудистая активность тромбоцитов

Результаты исследования и их обсуждение

Жидкостные свойства крови и ее текучесть по сосудам зависит от большого числа факторов, к которым относится также состояние активности тромбоцитарных функций.

Выяснено, что у здоровых детей младшего школьного возраста отмечены стабильно нормальные показатели антиоксидантной активности тромбоцитов и невысокая интенсивность в них ПОЛ, что способствует у них постоянству активности кровяных пластинок. Не исключено, что это во многом связано с сохранением невысокого уровня чувствительности рецепторов тромбоцитов к экзогенным влияниям различных химических веществ в меняющихся условиях внешней среды. Невысокая плотность рецепторов на мембранах тромбоцитов обусловливается сложными приспособительными реакциями организма у обследованных, обеспечивая сохранение необходимого уровня адаптации тромбоцитарного гемостаза к условиям функционирования.

Выявленное постоянство агрегативной функции кровяных пластинок при влиянии на тромбоциты у детей 7-9 лет сильных агонистов агрегации - коллагена и тромбина может обусловливаться во многом стабильно невысокой активностью механизма активации тромбоцитов через фосфолипазу С, стимулирующую фосфоинозитольный путь через диацилглицерол и протеинкиназу С и фосфолирирование белков сократительной системы. Невысокая АТ у обследованного контингента детей, отмеченная также со слабыми индукторами агрегации - АДФ и адреналин, обусловливает невыраженную экспрессию фибриногеновых рецепторов (GPIIв-IIIа) со стимуляцией фосфолипазы А₂, регулирующей выход из фосфолипидов арахидоновой кислоты и последующий ее метаболизм. Несомненно, важную роль в поддержании невысокой активности АТ играет не только стабильность ферментных систем тромбоцитов, в т.ч. тромбоксанообразования, но и невысокая их способность к секреции АДФ и АТФ и невыраженная функциональная готовность актино-миозинового комплекса.

Постоянство ВАТ у здоровых младших школьников косвенно указывает на сохранение в крови физиологического уровня индукторов агрегации (в первую очередь тромбина, АДФ, адреналина), подтверждая невысокий уровень чувствительности к ним тромбоцитов. При этом у 7-9 летних детей в кровотоке сохраняется высокое количество интактных дискоидной формы тромбоцитов, что дополнительно указывает на невыраженную активность их рецепторов. При этом стабильность содержания в крови диско-эхиноцитов и других активных форм тромбоцитов без сомнения связано в первую очередь с постоянством невысокой экспрессии на их мембране фибриногеновых рецепторов (GP IIв - IIIа).

Таким образом, у здоровых младших школьников имеет место невысокая активность тромбоцитов, во многом обеспечивающая оптимальные реологические свойства их крови, независимо от уровня средовых воздействий на организм.

Выводы

1. У детей 7-9 лет отмечается невысокая функциональная активность тромбоцитов.

2. По мере увеличения хронологического возраста с 7 до 9 лет агрегация тромбоцитов у здоровых детей, находясь на невысоком уровне, испытывает легкую тенденцию к повышению, что, видимо, связано с нарастанием на них экзогенных влияний и усилением чувствительности к ним.

Список литературы

1. Баркаган З.С. Обоснование и клиническая оценка некоторых новых методических приемов распознавания предтромботических состояний и латентных тромбозов / З.С. Баркаган, Г.Ф. Еремин, А.В. Давыдов // Лабораторные методы исследования в современной клинике внутренних болезней : мат-лы VII пленум Всероссийского научного мед. общества терапевтов и Всероссийского научного мед. общества врачей-лаборантов. - М., 1974. - С. 36‒38.
2. Гаврилов В.Б. Спектрофотометрическое определение содержания гидроперекисей липидов в плазме крови / В. Г. Гаврилов, М.И. Мишкорудная // Лабораторное дело. - 1983. - №3. - С. 33-36.
3. Кубатиев А.А. Перекиси липидов и тромбоз / А.А. Кубатиев, С.В. Андреев// Бюлл. эксперим. биол. и медицины. - 1979. - № 5. - С. 414-417.
4. Медведев И.Н., Лапшина Е.В., Завалишина С.Ю. Активность тромбоцитарного гемостаза у детей с искривлениями позвоночника // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. - 2010. - №5. - С. 579-580.
5. Чевари С., Андял Т., Штренгер Я. Определение антиоксидантных параметров крови и их диагностическое значение в пожилом возрасте // Лабораторное дело. - 1991. - №10. - С. 9-13.
6. Шитикова А.С. Визуальный микрометод исследования агрегации тромбоцитов. В кн. Гемостаз. Физиологические механизмы, принципы диагностики основных форм геморрагических заболеваний / под ред. Н.Н. Петрищева, Л.П. Папаян. - СПб., 1999. - С. 49-53.
7. Шитикова А.С., Тарковская Л.Р., Каргин В.Д. Метод определения внутрисосудистой активации тромбоцитов и его значение в клинической практике // Клинич. и лабор. диагностика. - 1997. - № 2. - С. 23-35.
8. Schmith, J.B. Malondialdehyde formation as an indicator of prostaglandin production by human platelet / J.B. Schmith, C.M. Ingerman, M.J. Silver // J.Lab. Clin. Med. - 1976. - Vol. 88 (1). - Р. 167-172.

Рецензенты:

Смахтин М.Ю., д.б.н., профессор, профессор кафедры биохимии Курского государственного медицинского университета, г. Курск;

Фурман Ю.В., д.б.н., профессор, декан факультета социальной работы, педагогики и психологии Курского института социального образования, филиал РГСУ, г. Курск.