Scientific journal
Fundamental research
ISSN 1812-7339
"Перечень" ВАК
ИФ РИНЦ = 1,749

Демяшкин Г.А., Амиров Н.Ш.

Тема научной работы посвящена изучению актуальной проблемы мужского бесплодия на клеточном уровне с использованием современных иммуноцитохимических и иммуногистохимических методов исследования.

Исследования актуальны ввиду малой изученности особенностей общеметаболического и функционально-специфического ферментного спектров сперматогенных элементов на этапах роста, а также эндокринного аппарата семенника.

Несмотря на то, что уже известны многие локальные факторы, моделирующие действие центральных механизмов регуляции, однако они еще не объединены в сколь-либо стройную систему интраорганной регуляции. Поэтому необходимо получение новых сведений о взаимодействии известных факторов роста на этапах сперматогенеза, что позволит уточнить взаимодействие структурных компонентов семенника, центральных механизмов регуляции его функций и их модуляторов на интраорганном уровне и будет способствовать дальнейшей разработке концепции системы локальной регуляции.

Цель исследования - провести комплексный иммуноцитохимический анализ регионов развивающихся мужских половых клеток и их ближайшего тканевого микроокружения.

Объект исследования - семенники крыс в эмбриональном и постанальном развитии.

Методы исследования: световая и электронная микроскопия, морфометрия, гистохимические, иммуногистохимические, иммуноцитохимические качественный и количественный анализ.

Решение проблем бесплодия и контроля за плодовитостью у человека и животных тесно связано с изучением факторов, обеспечивающих физиологическое течение процессов спермато- и спермиогенеза в мужской половой железе, а также выявление механизмов регулирующих эти процессы.

В настоящее время накоплен значительный материал, касающийся гистофизиологии мужской гонады. Однако ещё недостаточно раскрыты факторы, обуславливающие процессы роста и гибели созревающих половых клеток в физиологических условиях, и, особенно в условиях патологии

В этом плане важным является влияние этих ауто- и паракринных механизмов и их роли в инициации как физиологических так и патологических изменений. Изучение этих вопросов, кроме теоретического, имеет также и большое практическое значение, так как знание механизмов регуляции роста и дифференцировки половых и соматических клеток семенника необходимо для оптимизации условий стимуляции спермато- и спермиогенеза в практике лечения бесплодия у мужчин, разработки новых методов репродуктивной технологии в медицине.

За последние годы нарушения генеративной и репродуктивной функций у мужчин приобрело особую медицинскую и социальную значимость, так как мужской фактор бесплодия в браке составляет 30 - 50%. В целом мужское бесплодие вызывают 16 факторов (Т.В. Овсянникова, 1995).

Злокачественные поражения мужской репродуктивной системы нарастающими темпами становится самым распространённым злокачественным новообразованием среди населения развитых стран. Так, рак предстательной железы в Европе является вторым по степени распространённости причиной смерти мужчин, страдающих каким-либо онкологическим заболеванием (Borre M., Nerstrom B., Overgaard J., 1997). В отсутствие скрининг программ и программ по раннему выявлению злокачественных поражений у многих мужчин заболевание принимает неизлечимую метастатическую форму. Гормональная терапия (самый эффективным способ лечения) и химиотерапия вызывают лишь кратковременный эффект и поэтому возникает острая необходимость разрабатывать новые стратегии лечения (Kaisary A., Tyrrell C., Peeling W., Grriffith K., 1992). Для этого нужно понимать, как клетки поражённой ткани становятся нечувствительными к андрогенам - обретают андрогенную независимость. Идёт накопление данных, подтверждающих участие факторов роста в развитии и прогрессировании ряда раковых заболеваний мужской репродуктивной системы.

Было отмечено, что некоторые онкогенные продукты, которые способствуют пролиферации и метастазированию опухолей, гомологичны факторам роста, рецепторам факторов роста, а также молекулам в проводящих импульсы путях этих рецепторов. Изучение прежде всего физиологии и биохимии семейств факторов роста, участвующих в росте здоровых клеток, а также механизмов их регуляции позволит лучше понять роль этих факторов в развитии некоторых патологических процессов (Cohen P., Peehl D., Lamson G. Rosenfeld R., 1991; Iwamura M., Sluss P., Casamento J., Cockett A., 1993; Chan J., Stampfer M., Giovannucci E. et al.. 1998; Cohen P., 1998; Cohen P., Grawes H., Peehl D., Kamarei M., Giudice L., Rosenfeld R., 1992; Fowler J.J., Tau J., Ghosh L., Mills S., Mounzer A., 1988; Kim H-G., Kassis J., Souto J., Turner T., Wells A., 1999; Culig Z., Hobisch A., Cronauer M. et al., 1996).

IGF семейство, EGF, TGF-a, семейство факторов роста фибробластов (FGF), эндотелиальные факторы роста (тромбоцитарный фактор роста, PDGF, и сосудистый эндотелиальный фактор роста, VEGF) - это некоторые факторы роста, которые являются стимулирующими регуляторами пролиферации клеток мужских половых желез. TGF-b семейство представляет главную группу факторов, подавляющих рост клеток. Факторы роста оказывают аутокринное и паракринное воздействие на стромальные, эпителиальные и половые клетки, а также они взаимодействуют с другими факторами и связующими белками, чтобы контролировать рост клеток семенников (Byrne R, Leung H, Neal D., 1996).

Имеющиеся сегодня сведения о роли факторов роста в развитии клеток мужской гонады были получены из исследований на животных и человеческой ткани, а также из исследовательских моделей, авторы которых попытались имитировать рост клеток в модели клеточных линий (in vitro) и в модели на грызунах (in vivo). По данным некоторых научных работ, посвящённых изучению факторов роста и их рецепторов в человеческой ткани семенника, были получены противоречивые результаты (Hellawell G. O., Brewster S. F., 2002). Подобное противоречие отмечается, анализируя ряд клинических исследований, где попытки соотнести уровни факторов роста со стадией заболевания следует интерпретировать с осторожностью (независимо от гистологической гетерогенности рака) (Cohen D., Simak R., Fair W., Melamed J., Scher H., Cordon-Cardo C., 1994; Connolly J. & Rose D., 1990; Nishi N., Oya H., Matsumoto K., Nakamura T., Miyanaka H., Wada F., 1996; Perry K., Anthony C., Steiner M., 1997; Story M., Hopp K., Meier D., 1996; Barrack E., 1997; Kim I., Ahn H., Zeiner D., Shaw J., Lang S., Kato M., 1996).

EGF и TGF-α оказывают аутокринное и паракринное воздействия на рост и развитие сперматогенных клеток.

При собственном исследовании роли васкулярно-эндотелиального фактора роста (ВЭФР) в структурах семенника было отмечено, что наиболее интенсивно маркируются сперматогонии. Выраженность маркирования сперматоцитов и сперматид вариабельна, что, вероятно связано со стадией их мейоза. Клетки Лейдига маркируются положительно только вблизи отрезка семенного канальца с наибольшей активностью экспрессии фактора. Сустентоциты не маркируются. Клетки стромальной ткани и миоидные клетки также иммунонегативны. Интенсивность реакции кровеносных сосудов зависит от их топографии. Согласно полученным данным можно сделать заключение: имеет место активная экспрессия васкулярно-эндотелиального фактора роста клеточными элементами сперматогенеза при параллельной активности клеток Лейдига. ВЭФР, как известно, обладая выраженным митогенным свойством для роста эндотелиоцитов, и в семеннике способствует оптимальной васкуляризации регионов микроокружения эпителиосперматогенного пласта.