По данным ВОЗ, частота бесплодных браков составляет 10-15 % от общего числа супружеских пар. Обращает на себя внимание рост удельного веса мужского фактора в структуре причин бесплодного брака (за последние 20 лет он увеличился с 30 до 50 %) [3]. Известно, что одной из частых причин нарушений мужской фертильности являются инфекционно-воспалительные заболевания органов мочеполового тракта, у мужчин с бесплодием они диагностируются в 43,3 % случаев [7]. Особое место среди инфекционных агентов воспалительных процессов мужских репродуктивных органов занимает трихомонадная инфекция [8]. Во-первых, урогенитальный трихомоноз (УТ) имеет высокий удельный вес среди инфекций, передаваемых половым путем (ежегодно в РФ регистрируется 261,0-343,0 случая мочеполового трихомоноза) [1]. Во-вторых, клиническая картина УТ, по мнению ряда авторов, в настоящее время претерпевает патоморфоз, характеризуется увеличением доли стертых и малосимптомных форм. Не до конца изучена роль атипичных форм возбудителя [10]. В-третьих, современной проблемой УТ является распространение лекарственно-устойчивых штаммов Т. vaginalis. По данным ряда авторов, неэффективность терапии трихомоноза составляет 2,2-44,1 % [5, 9]. Также установлено, что воспалительные заболевания урогенитального тракта, обусловленные трихомонадной инфекцией, сопровождаются активацией перекисного окисления липидов (ПОЛ) уже на самых ранних стадиях заболевания, независимо от локализации воспалительного процесса, способствуя дисбалансу про- и антиоксидантных систем [6]. Избыточная продукция активных форм кислорода приводит к повреждению мембраны сперматозоидов, снижению их подвижности и нарушению оплодотворяющей способности [2, 3].
Таким образом, с целью изучения патогенетических механизмов формирования нарушения мужской репродуктивной функции у мужчин с УТ мы исследовали состояние процессов перекисного окисления и антиоксидантной защиты у мужчин с хронической монотрихомонадной инфекцией.
Материалы и методы исследования
Для достижения поставленной цели нами были проанализированы концентрации продуктов перекисного окисления липидов (ПОЛ), компонентов антиоксидантной защиты (АОЗ) и показатели сперматогенеза 39 мужчин (возраст 32,04±5,37 года) с хронической монотрихомонадной инфекцией. В зависимости от наличия отклонений в спермограмме пациенты были разделены на две группы: первая группа включала 26 мужчин с патоспермией (средний возраст 32,04±5,37 года), вторая группа ‒
13 мужчин с нормоспермией (средний возраст 32,92±3,15 года). Исследование проводилось на базе НЦ ПЗСРЧ СО РАМН (директор член-кор. РАМН, профессор, д.м.н. Л.И. Колесникова). Лабораторную диагностику инфекций урогенитального тракта осуществляли на базе кафедры микробиологии, зав. каф. ‒ д.м.н., проф. Иркутского государственного медицинского университета, акад. РАМН В.И. Злобин ректор ‒ д.м.н., проф. И.В. Малов. Исследовали соскоб уретры, секрет простаты, эякулят и осадок свежевыпущенной утренней мочи согласно протоколам ведения больных инфекциями урогенитального тракта, а также Приказам № 286 от 07.12.93 и № 1570 от 04.12.86. Исследование эякулята включало макроскопическую и микроскопическую оценки, которые проводили в соответствии с рекомендациями ВОЗ (2002 г.) в ЦНИЛ Иркутского государственного института усовершенствования врачей, ректор д.м.н., проф. В.В. Шпрах, зав. лаб. ‒ к.м.н., доцент А.В. Стародубцев. Результаты сравнивали с референтными значениями руководства ВОЗ (Eliasson et al., 2002). Интенсивность процессов ПОЛ оценивали по содержанию его продуктов ‒ диеновых конъюнгатов (ДК), малонового диальдегида (МДА). Содержание малонового диальдегида (мкмоль/л) измеряли по методу В.Б. Гаврилова с соавт. (1987); определение концентраций α-токоферола и ретинола (мкмоль/л) флуориметрическим методом Черняускене Р.Ч. с соавт. (1984). Измерения проводили на спектрофлюорофотометре SHIMADZU RF-5000 (Япония). Содержание ДК (мкмоль/л) проводили по методу И.А. Волчегорского с соавт. (1989), основанном на интенсивном поглощении конъюгированных диеновых структур гидроперекисей липидов в области 232 нм. Оценку общей антиокислительной активности крови (АОА ‒ усл.ед.) проводили по методу Г.И. Клебанова с соавт. (1988). Ультразвуковое исследование органов мошонки проводили на аппарате «Aloka 500» (Япония) с абдоминальным датчиком 3,5 МГц, трансректальное ультразвуковое исследование предстательной железы, семенных пузырьков ‒ на аппарате «Aloka 1700» (Япония) с ректальным датчиком 7 МГц. В исследовании использовались вычислительные процедуры методов математической статистики, реализованные в интегрированном статистическом пакете комплексной обработки данных STATISTICA 6.1 StatSoft Inc, США. Для представления количественных данных приводили описательные статистики: среднее (М), стандартное отклонение (σ), медиана (Me), 25-й и 75-й процентили. Для объективной оценки близости распределения признаков в выборке к нормальному закону распределения использовались критерии согласия Шапиро-Уилка и Лиллиефорса. Для проверки нулевой статистической гипотезы о наличии различий между группами использовали непараметрический критерий Манна-Уитни (U-test). В качестве меры зависимости между двумя переменными использовали коэффициент корреляции Спирмана (R). Выбранный критический уровень значимости равнялся 5 % (0,05).
Результаты и их обсуждение
В первой группе первичное бесплодие в браке установлено у 33,33 % (8 чел., n=26), во второй ‒ у 18,18 % (2 чел., n=13), вторичное бесплодие в браке зарегистрировано только в первой группе у 14,29 % (3 чел., n=13). При исследовании эякулята мужчин с хронической монотрихомонадной инфекцией в 66,6 % случаев (n=26) выявлены те или иные нарушения сперматогенеза. У 11,1 % (2 чел., n=26) пациентов с отклонениями в спермограмме диагностирована олигозооспермия, у 74 % (19 чел., n=26) ‒ астенозооспермия, изолированная патология семенной плазмы ‒ у 18,5 % (4 чел., n=26). У мужчин с хронической монотрихомонадной инфекцией и патоспермией статистически значимо хуже была подвижность сперматозоидов в сравнении с пациентами с нормоспермией: подвижность категории «а» ‒ 0 (0;1 % и 3 (0;6 %, PU-test=0,03; подвижность категории «а + в» ‒ 26 (14;61 % и 70 (55;72 %), P U-test=0,01; неподвижные сперматозоиды ‒ 31 (5;42 %) и 5 (2;9 %) соответственно, PU-test=0,01. Жизнеспособность сперматозоидов в 1 группе так же была статистически значимо хуже ‒ 88 (81;96 %), в отличие от показателей во 2 группе ‒ 97 (95;98 %), PU-test=0,01. Содержание лейкоцитов в группе мужчин с хроническим УТ и патоспермией было статистически значимо больше ‒1 (0,5;3,5) млн/мл,
чем у мужчин с хроническим УТ и нормоспермией ‒ 0,5 (0,5;0,5) млн/мл, PU-test=0,01.
Результаты исследования концентраций продуктов ПОЛ и компонентов АОЗ у пациентов на фоне хронической трихомонадной инфекции в зависимости от наличия патоспермии представлены в таблице.
Показатели концентраций продуктов ПОЛ и компонентов АОЗ у мужчин
с хронической монотрихомонадной инфекцией в группах сравнения
|
Параметр |
Мужчины с УТ и патоспермией (n=26) Ме (25-й; 75-й процентили) |
Мужчины с УТ и нормоспермией (n=13) Ме (25-й; 75-й процентили) |
||
|
сыворотка крови |
эякулят |
сыворотка крови |
эякулят |
|
|
ДК, мкмоль/л |
1,9 (0,9;3,0) |
0,7(0,3;1,7) |
2,0 (1,7; 2,9) |
0,9(0,5;2,6) |
|
АОА, усл.ед. |
7,2(4,6;8,4) |
2,6(1,6;4,1) |
5,7 (4,1;11,6) |
2,4(1,1;5,4) |
|
α токоферол, мкмоль/л |
11,3(9,0;14,4) |
10,0(5,7;11,6) |
11,0(7,2;12,7) |
2,3(1,1;5,4) |
|
Ретинол, мкмоль/л |
0,5 (0,4;0,7) |
0,1 (0,1;0,5) |
0,4 (0,4;0,5) |
0,1(0,1;0,2) |
|
МДА, мкмоль/л |
1,0 (0,8;1,3) |
1,0(0,6;1,5) |
1,4(1,0;1,7) |
1,2(1,0;1,5) |
В результате изучения состояния процессов ПОЛ и АОЗ на системном и локальных уровнях нами не выявлены статистически значимые различия между группами сравнения. Однако с целью выявления функциональных взаимодействий между показателями изучаемых систем нами был произведён корреляционный анализ и выявлены следующие статистически значимые корреляционные связи. Так, в первой группе установлена средняя корреляционная связь между концентрациями МДА в сперме и показателем АОА в сыворотке крови (R=-0,55), DК в сперме и DК в сыворотке крови (R=0,45), DК в сперме и АОА сыворотке крови (R=0,51), АОА в сперме и АОА сыворотке крови (R=0,48), МДА в сыворотке крови и содержанием витамина Е в эякуляте (R=0,43); в отличие от первой группы сравнения во второй группе была выявлена только одна статистически значимая корреляционная связь между содержанием витамина Е в сыворотке крови и АОА в сперме (R=-0,65). При анализе значимых корреляционных связей между показателями спермограмм и содержанием продуктов ПОЛ-АОЗ в эякуляте в первой группе установлены средние корреляционные связи между АОА и объёмом спермы (R=-0,42), АОА и подвижностью категории «а» (R =-0,61), содержанием витамина Е и временем разжижения эякулята (R =-0,45), во второй группе исследования статистически значимых связей не выявлено. При анализе значимых корреляционных связей между показателями концентраций продуктов ПОЛ-АОЗ в сыворотке крови и показателями спермограммы в первой группе отмечено три зависимости: между МДА и рН спермы (R=0,56), DК и объёмом эякулята (R =-0,41), АОА и подвижностью категории «а» (R=-0,53);4 во второй группе ‒ две средние корреляционные связи: между МДА и объёмом спермы (R=-0,69), между МДА и подвижностью категории «а» (R= 0,64). Таким образом, в группе мужчин с хронической монотрихомонадной инфекцией и патоспермией сумма числа значимых корреляционных связей составляет 11 единиц в отличие от пациентов с нормоспермией и хроническим УТ ‒ 3 единицы.
Выводы
У мужчин с хронической монотрихомонадной инфекцией нарушение сперматогенеза диагностировано в 66,6 % случаев, при этом астенозооспермия установлена в 11,1 % случаев, изолированная патология семенной плазмы ‒ в 18,52 %, олигозооспермия ‒ в 11,1 %. У мужчин с патоспермией на фоне хронической трихомонадной инфекции статистически значимо ниже были подвижность и жизнеспособность сперматозоидов, а также присутствовало большее количество лейкоцитов в эякуляте, чем у пациентов с нормоспермией. Выявленное небольшое количество функциональных связей между показателями спермограмм и содержанием продуктов ПОЛ-АОЗ в эякуляте и сыворотке крови у пациентов с нормоспермией и хроническим УТ, возможно, указывает на сбалансированность процессов пероксидации липидов и антиоксидантной защиты организма. Установленное увеличение количества и разнообразия корреляционных взаимосвязей между изучаемыми системами у мужчин с патоспермией и хроническим УТ скорее всего свидетельствует о наличии дисбаланса в организме и росте адаптационной нагрузки. Представленные результаты корреляционного анализа доказывают сложные взаимосвязи между продуктами ПОЛ, показателями спермограмм и системой АОЗ, активность которой стремится купировать процессы ПОЛ и сформировать неспецифическую резистентность организма.
Список литературы
- Адаскевич В.П. Инфекции, передаваемые половым путем. ‒ Н. Новгород: Изд-во НГМА; Мед. книга, 2002. ‒ 416 с.
- Божедомов В.А. Причины оксидативного стресса сперматозоидов // Проблемы репродукции ‒ 2008. ‒ №6. ‒ С. 67-73.
- Быкова М.В. Нарушение редокс-баланса сперматозоидов и семенной плазмы мужчин при патоспермии: Автореф. дис. ... канд. биол. наук. ‒ Красноярск, 2008. ‒ 24 с.
- Евдокимов В.В., Селиванов Т.О. Нарушение сперматогенеза при варикоцеле. Патогенез и прогноз лечения // Андрология и генитальная хирургия ‒ 2006. ‒ №3. ‒ С.12-7.
- Захаркив Ю.Ф. Этиологическая структура воспалительных заболеваний урогенитального тракта среди социально адаптированных групп населения и роль Т. vaginalis в их возникновении в связи с устойчивостью штаммов возбудителей к действию лекарственных препаратов: Автореф. дис. канд.мед.наук. ‒ СПб., 2005. ‒ 23 с.
- Капланов В.Д. Урогенитальный трихомониаз: патогенетические аспекты и оптимизация лечения: дис....канд. мед. наук: 14.00.10, 14.00.11. ‒ Саратов, 2000.
- Кулаков В.И., Лопатина Т.В. Репродуктивное здоровье населения России // Бесплодный брак / под ред. В.И. Кулакова. ‒ М:ГЭОТАР-Медиа, 2005. ‒ С. 10-18.
- Медведев С.В. Хронический урогенитальный трихомониаз, осложнённый нарушениями репродуктивных функций у мужчин: дис. ... канд. мед. наук: ‒ Новосибирск, 2001. ‒ 114 с.
- Нарзикулов Р.М. Клинико-лабораторная оценка эффективности нового комплексного метода лечения больных мочеполовым трихомониазом: Автореф. дис. ... канд.мед.наук. ‒ М., 1990. ‒16 с.
- Теличко И.Н. Диагностика и лечение трихомоноза: микробиологические и иммунологические аспекты: Автореф. дис. д-ра мед. наук. ‒ СПб., 2007. ‒ 46 с.
Рецензенты:
Осипова Е.В., д.б.н., профессор кафедры биологии Научного центра проблем здоровья семьи и репродукции человека Сибирского отделения РАМН;
Симонова Е.В., д.б.н., профессор кафедры микробиологии ИГМУ.