Научный журнал
Фундаментальные исследования
ISSN 1812-7339
"Перечень" ВАК
ИФ РИНЦ = 1,749

УЧАСТИЕ ПРОСТАТОСПЕЦИФИЧЕСКОГО АНТИГЕНА В АКТИВАЦИИ АКРОЗИНА

Николаев А.А.
Акросома - это большая, лизосомоподобная ор­ганелла (производная комплекса Гольджи), которая локализована над ядром в апикальной части головки сперматозоида.

Акросома секретирует ферменты, которые участ­вуют в пенетрации сперматозоидами zona pellucida [Abou Haila A., Tulsiani D. R., 2000]. Сериновая про­теиназа EC 3.4.21.10 - акрозин, является одним из трех ключевых акросомальных ферментов и играет важную роль в процессе оплодотворения яйцеклетки [Николаев А. А. и др., 2002; Engel W. et al, 2000].

В отдельных работах предлагается определение ферментативной активности акрозина в качестве ди­агностического теста [Menkveld R. et al, 1996]. Од­нако, акрозин, как и другие протеолитические фер­менты, до определенного момента находится в неак­тивной форме в комплексе с ингибитором и оценка диагностической значимости этого фермента должна проводится с учетом факторов, влияющих на актив­ность акрозина.

Семенная плазма также содержит мощную про­теолитическую систему многофункционального на­значения (Watt k et all., 1986). Основным ферментом этой системы является широко известный простатос­пецифический антиген ПСА .

Цель нашей работы - исследовать возможное участие ПСА в активации акрозина.

Для реализации этой цели было проведено ис­следование уровня ПСА в семенной плазме 67 муж­чин с различными нарушениями фертильности и кон­трольной группе. Параллельно проведено исследова­ние активности акрозина.

Определение активности акрозина (EC 3.4.21.10) проводили по методу W. B. Schill [Schill W. B., 1986].

Перед проведением исследования сперматозоиды выделяли после полного разжижения эякулята, путем центрифугирования в градиенте перколла. Все рас­творы перколла готовили на буфере «HBS+BSA» с рН 8,0 (0,13 М NaCl, 0,004 М KCl, 0,001 М CaCl2, 0,0005 М MgCl2, 0,014 М фруктозы, 0,01 М N-2-гидрокси­этилпиперазин-N¢-2-этансульфоновой кислоты и 1,0 мг/мл бычьего сывороточного альбумина).

Отмытые таким образом сперматозоиды экстра­гировали 0,2 М ацетатным буфером с рН 2,4, для дис­социации комплекса акрозина с ингибитором. Отмы­тые таким образом сперматозоиды экстрагировали 0,2 М ацетатным буфером с рН 2,4, для диссоциации комплекса акрозина с ингибитором.

Активность свободного акрозина определяли по расщиплению синтетического субстрата - ВАЕЕ.

Общую активность акрозина определяли после быстрого оттаивания (при температуре 23°С в течение 30 минут) спермы, предварительно замороженной до -196°С (в жидком азоте).

Проферментную активность рассчитывали по формуле:

ПА = ОА - СА, где

ПА - проферментная активность акрозина, ОА - общая активность акрозина, СА -активность свобод­ного акрозина.

Активность акрозина выражали в международ­ных единицах на 1 миллион сперматозоидов (мкМЕ/106 сп.).

Уровень простатоспецифического антигена опре­деляли методом твердофазного иммуноферментного анализа с использованием коммерческой тест-сис­темы фирмы «Вектор-бест»

Таблица 1. Зависимость активности акрозина от концентрации ПСА в семенной плазме

Уровни ПСА

мгмл

Активность акрозина

(мкМЕ/106 сп.)

Коэффициент ПА/СА

общая

свободная

1,3 - 1,6

5,2±0,4

1,34±0,24

2,88

1,29 - 0,85

5,25±0,27

1,46±0,31

2,6

0,84 - 0,65

5,19±0,31

1,61±0,19

2,22

0,64 - 0,5

5,27±0,46

1,84±0,34

1,86

0,49 - 0,35

5,41±0,22

2,18±0,3

1,48

Полученные данные были объединены в 5 групп в зависимости от концентрации ПСА, причем в пер­вой группе (n= 21) оказался практически весь кон­трольный контингент и несколько больных с нормос­пермией. Как видно из табл.1 по мере убывания кон­центрации ПСА общая активность акрозина практи­чески не меняется, а свободная активность досто­верно отрицательно коррелирует (r= -0.56) с концен­трацией ПСА в семенной плазме. Соответственно проферментная активность акрозина уменьшается по мере снижения концентрации ПСА в семенной плазме. Что находит подтверждение в снижении ко­эффициента ПАCA - общепринятого показателя сте­пени ингибирования акрозина. (Menkveld R. et al, 1996).

Известно, что простатаспецифический антиген является сериновой протеиназой (Watt k et all., 1986) и по нашим предположениям, в соответствии с прин­ципами регуляции ферментной активности, мог бы участвовать в активации акрозина, путем ограничен­ного протеолиза.

Однако, полученные данные свидетельствуют о существовании более сложного механизма участия протеиназ семенной плазмы в активации ферментов акросомы.

Таким образом, к настоящему времени можно только констатировать участие ферментов семенной плазмы в регуляции процессов капацитации, а кон­кретные их механизмы требуют дальнейших исследо­ваний.


Библиографическая ссылка

Николаев А.А. УЧАСТИЕ ПРОСТАТОСПЕЦИФИЧЕСКОГО АНТИГЕНА В АКТИВАЦИИ АКРОЗИНА // Фундаментальные исследования. – 2004. – № 4. – С. 77-78;
URL: https://fundamental-research.ru/ru/article/view?id=5444 (дата обращения: 26.09.2021).

Предлагаем вашему вниманию журналы, издающиеся в издательстве «Академия Естествознания»
(Высокий импакт-фактор РИНЦ, тематика журналов охватывает все научные направления)

«Фундаментальные исследования» список ВАК ИФ РИНЦ = 1.074