Научный журнал

Фундаментальные исследования

ISSN 1812-7339

"Перечень" ВАК

ИФ РИНЦ = 1,674

• Авторы
• Резюме
• Файлы
• Ключевые слова
• Литература

Любимов В.Б. 1 Логачева Е.А. 2

---

1 ФГБОУ ВПО «Брянский государственный университет имени академика И.Г. Петровского»

2 ФГБОУ ВПО «Балашовский институт (филиал) Саратовского государственного университета им. Н.Г. Чернышевского»

Приводятся результаты исследований по определению устойчивости различных видов декоративных кустарников, используемых для озеленения городских территорий, создания садов и парков, к загрязнению окружающей среды токсическими выбросами промышленности и автотранспорта на территории города Балашова Саратовской области. Для определения степени устойчивости в качестве оценочных показателей применялась количественная и качественная оценка изменчивости фермента пероксидазы. Включенные в эксперимент виды были разделены на три группы по степени устойчивости к загрязнителям. К высокоустойчивым видам были отнесены Amorpha fruticosa L., Tamarix gracilis Willd, Physocarpus opulifolius L., средней степени устойчивости – Symphoricarpos albus L., Berberis thunbergii L., Philadelphus coronaries L., Amelanchier canadensis L., Lonicera tatarica L., и к низкой степени устойчивости – Sorbaria sorbifolia L., Spiraea hypericifolia L. и Crataegus sanguinea L. Анализ исследований показал, что динамика активизации и характер новообразований в изозимном спектре фермента пероксидазы листьев декоративных кустарников являются объективными биохимическими показателями устойчивости растений, произрастающих в условиях промышленного и транспортного загрязнения атмосферы городских территорий.

Статья в формате PDF

2410 KB

интродуценты

сады

парки

кустарники

устойчивость

ферменты

пероксидаза

1. Бояркин А.Н. Быстрый метод определения активности пероксидазы / А.Н. Бояркин // Биохимия. – 1961. – Т. 16, № 4. – С. 352–355.

2. Лебедева О.В. Кинетическое изучение реакции окисления о-диазинидина перекисью водорода в присутствии пероксидазы из хрена / О.В. Лебедева, Н.Н. Угарова, И.В. Березин // Биохимия. – 1977. – Т. 42, № 8. – С. 1372–1379.

3. Любимов В.Б. Определение устойчивости декоративных кустарников к загрязнению по степени активности и трансформации растительных пероксидаз / В.Б. Любимов, Е.А. Логачёва. – Брянск: Вестник РИО БГУ, 2013. – С. 133–136.

4. Любимов В.Б. Определение устойчивости декоративных кустарников к загрязнению среды / В.Б. Любимов, Е.А. Логачёва. – VI Международная научно-практическая конференция «Экологическая безопасность региона». – Брянск, 2013. – С. 104–107.

5. Неверова О.А. Использование активности пероксидазы для оценки физиологического состояния древесных растений и качества атмосферного воздуха г. Кемерово / О.А. Неверова. – 2001. – С. 122–128.

6. Савич И.М. Пероксидазы – стрессовые белки растений / И.М. Савич // Успехи современной биологии. – 1989. – Т. 107, № 3. – С. 406–417.

7. Сарсенбаев К.Н. Влияние двуокиси серы на активность и компонентный состав свободных и связанных фракций пероксидазы проростков яровой пшеницы / К.Н.  Сарсенбаев, Н.И. Мезенцева, Ф.А. Полимбетова // Физиология и биохимия культурных растений. – 1983. – Т. 15, № 1. – С. 51–55.

8. Davis B.J. Disc-electrophoresis. Method and application to human series hroteins //ann. New York Acad Sei. – 1964/–12. – № 4. – P. 404–427.

9. Zin E.N. Simple method for determining the relative activities of individual peroxidase isorimes in a tissue extract // Anal. Biochem. – 1973. – № 1. – P. 149–154.

10. Reisfeld R.A., Lewis U.I., Wiliams D.E. Disc-electrophoresis of basis proteins and peptides jn polyacrylamide gel //Nature. – 1962. – Т. 195, № 4838. – P. 281–283.

В настоящее время интродуценты, в т.ч. декоративные кустарники, широко используются для озеленения, создания защитных насаждений, садов и парков в городах с загрязненной окружающей средой токсическими выбросами от промышленности и автотранспорта. В связи с этим возникла проблема оценки устойчивости ассортимента интродуцентов, для создания насаждений на урбанизированных территориях с различной степенью загрязнения токсичными веществами [5, 15]. В научной литературе накоплены многочисленные сведения об изменчивости ферментных систем под действием химических загрязнителей. Причем наибольшая лабильность в условиях стресса характерна для окислительно-восстановительного фермента пероксидазы, широко распространенного в вегетативных органах растений различных систематических групп, входящего в состав основных клеточных структур и обладающего разной структурной специфичностью [6]. В частности, отмечается влияние химического загрязнения атмосферы на общую активность, количественные и качественные характеристики пероксидазы [7–9]. Зарегистрированы многочисленные факты глубокой трансформации пероксидазного спектра в вегетативных органах декоративных форм сосны, бересклета, барбариса и других форм и видов из разных родов под воздействием промышленного загрязнения атмосферы оксидами серы и азота [3, с. 133–136; 4, с. 104–107; 5, с. 122–128; 7, с. 51–55; 9, с. 149–154]. Однако до настоящего времени остаётся малоизученным комплексное влияние промышленного и транспортного загрязнения атмосферы на количественную и качественную характеристику растительных пероксидаз у различных видов интродуцентов, используемых для озеленения урбанизированных территорий. Не оценена и перспектива использования этих показателей для оценки газоустойчивости различных видов декоративных кустарников, интродуцированных в разные природные зоны России [3, с. 133–136; 4, с. 104–107; 6, с. 406–417].

Цель исследования

Настоящее исследование было предпринято с целью выяснения зависимости изменения активности, а также качественной и количественной изменчивости растительного фермента пероксидазы от экологически неблагоприятного воздействия, и использование данных показателей в качестве маркеров устойчивости интродуцентов, в том числе и декоративных кустарников к токсическим выбросам промышленности и автотранспорта.

Материалы и методы исследования

Исследования проводились на территории г. Балашова Саратовской области в 2011–2015 годах. Объектом исследования служили вегетативные органы растений (листья) 11 видов декоративных кустарников: Рябинник рябинолистный (Sorbaria sorbifolia L.), Спирея зверобоелистная (Spiraea hypericifolia L.), Чубушник венечный (Philadelphus coronaries L.), Ирга канадская (Amelanchier canadensis L.), Тамарикс изящный (Tamarix gracilis Willd), Аморфа кустарниковая (Amorpha fruticosa L.), Пузыреплодник калинолистный (Physocarpus opulifolius L.), Барбарис Тунберга (Berberis thunbergii L.), Жимолость татарская (Lonicera tatarica L.), Боярышник кроваво-красный (Crataegus sanguinea L.), Снежноягодник белый (Symphoricarpos albus L.). Листья для исследований отбирались с плодоносящих растений, с побегов, расположенных в средней части кроны кустарника. Исследования проводили в летний период при температуре атмосферного воздуха + 22–25 °С. Для опыта листья срезались в промышленном районе города в местах с интенсивным движением автотранспорта (более 17 единиц в минуту), а контрольные – в экологически незагрязненной местности – в районе станции юных натуралистов, удаленной от автодорог и промышленных предприятий на 500 и более метров. Определялась удельная активность пероксидазы [1, с. 352–355; 2, с. 1372–1379]. За единицу активности фермента принималось количество о-дианизидин (мкмоль), окисленного за 1 минуту на 1 г сырого вещества. Для выделения фермента из растительной ткани навеска листьев (2 г) измельчалась с помощью скальпеля, затем заливалась семикратным объемом 0,005 М трис-глицинового буфера, содержащего 30 % сахарозы, и гомогенизировалась на холоде. Гомогенат в течение часа выдерживался при температуре 4 °С и центрифугировался при скорости 8 тыс. об./минут. Надосадочная жидкость использовалась в качестве препарата пероксидазы. Электрофорез пероксидазы проводили по модифицированной методике Дэвиса и Рейсфильда [8, с. 404–427; 10, 281–283]. В цилиндрических гелях размером 0,6х7,0 см в 7,5 %-м полиакриламидном геле с использованием трис-глициновой буферной системы pH = 8,3 с охлаждением. Время проведения электрофореза – 2 часа 20 минут. Первые 20 мин сила тока на гелевую трубку не превышала 2 мА, затем усиливалась до 4 мА. По окончании электрофореза гели опускались на 30 минут в 0,02 %-й раствор солянокислого бензидина, а затем – в 0,01 %-й раствор пероксида водорода до появления голубых полос изопероксидаз. Затем реакционная смесь сливалась, а гели промывались 10 %-м раствором уксусной кислоты. Для идентификации фермента использовали промышленный препарат пероксидазы хрена. Относительная активность отдельных изомеров определялась с использованием методики Лиу, по скорости их проявления [17]. Для удобства анализа изозимных спектров катодные изопероксидазы по относительной электрофоретической активности (ОЭП) были условно разделены на три зоны: А-зона (ОЭП от 0 до 30), В-зона (ОЭП от 31 до 60) и С-зона (ОЭП от 61 до 100).

Библиографическая ссылка