Научный журнал

Фундаментальные исследования

ISSN 1812-7339

"Перечень" ВАК

ИФ РИНЦ = 1,674

• Авторы
• Резюме
• Файлы
• Ключевые слова
• Литература

Шугаева К.Я. 1 Османова А.А. 1 Магомедов М.А. 1 Магомедов Х.М. 1

---

1 ГБОУ ВПО «Дагестанская государственная медицинская академия»

В эксперименте на 140 белых беспородных крысах обоего пола, массой 180–200 г воспроизведена модель раннего посткомпрессионного периода синдрома длительного сдавления (РПП СДС) с последующей опытной (перфтораном – ПФ) и контрольной (физиологическим раствором) его коррекцией. Установлено, что через 3 суток моделирования РПП СДС в подколенных (ПКЛУ), поясничных (ПЛУ) и брыжеечных (БЛУ) лимфатических узлах развиваются однонаправленного характера, различной интенсивности морфологические изменения структурно-функциональных зон с нарушением клеточного состава. Через 3 суток после реперфузии и коррекции РПП СДС инфузией ПФ обнаружено более выраженное, чем в контроле, восстановление структурно-функциональной организации как регионарных от области компрессии, так и отдаленных от него лимфатических узлов, что свидетельствует о более полной реализации их компенсаторных возможностей и активации процессов бласттрансформации.

Статья в формате PDF

310 KB

синдром длительного сдавления

ранний посткомпрессионный период

коррекция перфтораном

морфология лимфатических узлов

1. Автандилов Г.Г. Медицинская морфометрия. – М.ː Медицина,1990. – 383 с.

2. Ардашева Е.И. Применение перфторана с целью профилактики и лечения компрессионной травмы мягких тканей конечностей (эксперим. иссле-е): – дис. … канд. мед. наук. – Кемерово, 2002.

3. Бородин Ю.И., Сапин М.Р., Этинген Л.Е. Частная анатомия лимфатической системы. – Новосибирск: Изд-во ИК и ЭЛ СО РАМН, 1995. – 362 с.

4. Мусселиус С.Г. Краш-синдром (этиология и патогенез) / С.Г. Мусселиус, А.В. Орлов // Фельдшер и акушерка. – 1990 – № 2 – С. 28–30.

5. Османова А.А. Динамика микроциркуляторного русла фиброзных мембран при компрессионной травме мягких тканей конечностей и коррекции инфузией. (эксперим. исслед.): дис. … канд. мед. наук. – Волгоград, 2010.

6. Lowe K.C. Perfluorochemical oxygen carries and ishaemic tissues // Adv. Exp. Med. Biol. – 1990. – P. 257–266.

7. Michaelson M. Crush injury and crush syndrome // World J. Surg. – 1992. – Vol. 24, № 3. – P. 205–207.

8. Musselius S.G., Putinsev M.D., Enileev R.H. // Adviser Expert System in the Myorenal Syndrome: EDTA Congress, 20-th. – Glasgow, 1993. – P. 78–93.

9. Riess J.G. Fluorocarbon emulsions as injectable oxygen carries // Rev. Fr. Transfus. Haemobiol. France. – 1992 – Vol. 35. – P. 391–404.

10. Riess J.G. Oxygen Carriers («Blood Substitutes») – Raison d’Etre, Chemistru, and Some Physiology // Chem Rev. – 2001. – Vol. 101. – Р. 2797–2919.

Несмотря на большое количество публикаций, посвященных изучению патогенеза, клинической картины и лечения синдрома длительного сдавления (СДС), эти вопросы все еще далеки от окончательного решения. В то же время вероятность стихийных бедствий и катастроф по-прежнему сохраняется на высоком уровне, поэтому проблема изучения СДС не только не потеряла своей актуальности, но и в последнее десятилетие перемещается в число приоритетных, учитывая высокую сейсмическую активность земли, повышение техногенных и автокатастроф [1, 2, 4, 5, 7, 8]. Несмотря на значительные успехи в изучении патогенеза процессов ишемии и реперфузии при СДС, работ, посвященных экспериментальному моделированию СДС, изучению тонких механизмов развития его посткомпрессионного периода и перестройке лимфатического русла, на сегодняшний день немного [2, 3, 5, 8].

Следует отметить особый интерес современных исследователей к поиску новых эффективных способов лечения и профилактики осложнений посткомпрессионного периода СДС. В частности, известно, что использование плазмозаменителя – перфторана, обладающего газотранспортными и полифункциональными свойствами, в коррекции последствий РПП СДС тяжелой степени позволяет улучшить показатели гемодинамики, реологии крови, а также микроциркуляторного русла фиброзных мембран [2, 5, 6, 9, 10].

Цель исследования – провести морфологический анализ лимфатических узлов крыс в раннем посткомпрессионном периоде синдрома длительного сдавления (РПП СДС) на фоне коррекции его инфузией перфторана (ПФ).

Материал и методы исследования

Работа выполнена на материале, полученном от 140 белых беспородных крыс обоего пола, массой 180–200 г, распределенных на 4 экспериментальные группы:

I – интактные животные – (20);

II – РПП СДС без коррекции – (40);

III – модель РПП СДС + коррекция физ. р-ра (контроль) – (40);

IV – модель РПП СДС + коррекция ПФ (опыт) – (40);

Воспроизведение модели РПП СДС тяжелой степени достигалось по известной методике путем сдавления 2-х тазовых конечностей крыс в специальных тисках в течение 8 часов. Эксперименты проводились под кетаминовым наркозом (в/м, из расчета 25 мг/г массы тела). Сразу после декомпрессии животным 3 и 4 группы в течении 3 суток (1 раз в сутки) проводилась внутривенная и лимфотропная инфузия плазмозаменителей. В опытной группе в хвостовую вену крысы вводили 10 % эмульсию ПФ (из расчета 2,0 мг/кг массы тела), одновременно ПФ вводили в количестве 0,2–0,4 мл в межпальцевые промежутки тазовых конечностей. В контрольной (III) группе животным вводили аналогичным способом такое же количество физиологического раствора.

Через 3 суток животные забивались под наркозом путем декапитации. Подколенные (ПКЛУ), поясничные (ПЛУ) и брыжеечные (БЛУ) лимфатические узлы фиксировались в 12 % нейтральном формалине. После парафиновой проводки изготавливали срезы толщиной 5–7 мкм, которые окрашивали гематоксилин-эозином. Морфометрический анализ лимфатических узлов проводили по Г.Г. Автандилову (1990), методом точечного счета с использованием бинокулярного микроскопа «МБС-9» с окулярным микрометром и вмонтированной в окуляр морфометрической сеткой (при ув. 8×7; 10×90). Клеточный состав функциональных зон лимфатических узлов подсчитывался на срезах в 5 полях зрения с последующим перерасчетом на 1 мм2 площади среза в %. Микроскопия и микрофотосъемка препаратов проводились с использованием микроскопа «Wilomed» (Германия), сопряженного через видеокамеру с компьютером, при ув. 10×20; 10×10.

Все количественные данные подвергались статистической обработке, используя пакет прикладных программ «Statistika» фирмы Sfatsoft, (2001), v.6.0. Значимость различия параметрических данных оценивали используя t-критерий Стьюдента. Непараметрические данные обработаны с использованием критерия х2. Критическим считался уровень статистической значимости Р ≤ 0,05. Показатели полученные при введении физ. р-ра или ПФ при СДС, сравнивали с данными СДС без коррекции.

Результаты исследования и их обсуждение

Через 3 суток после декомпрессии без инфузии плазмозаменителей у крыс наблюдается изменение соотношения структурно-функциональных зон ПКЛУ, ПЛУ и БЛУ, по сравнению с таковыми интактной группы. При этом общая площадь лимфатических узлов в среднем уменьшается на 13 % (по сравнению с интактными; Р ≤ 0,05), площадь коркового вещества практически во всех ЛУ уменьшается (максимально в ПКЛУ на 22,8 % (Р ≤ 0,05), по сравнению с интактной группой), а площадь мозгового вещества исследованных ЛУ максимально снижается в БЛУ (на 20 %, по сравнению с интактными; Р ≤ 0,05). Через 3 суток после реперфузии в корковом веществе исследованных ЛУ отмечается незначительный рост количества первичных и вторичных лимфоидных узелков, сопровождающийся существенным увеличением их размеров, по сравнению с интактной группой (табл. 1). Практически во всех исследованных ЛУ на фоне разрыхления, утолщения их капсулы наблюдается расширение краевых и мозговых синусов. Увеличиваются в размерах мозговые тяжи указанных ЛУ, особенно в ПКЛУ (на 2,4 %, по сравнению с интактными; Р ≤ 0,05). Отмечалось наибольшее снижение корково-мозгового индекса в ПКЛУ (на 27,4 %, по сравнению с интактными; Р ≤ 0,05) и индекс Мт/Мс в БЛУ уменьшался на 35 % (по сравнению с интактными) (табл. 1). Состояние цитоархитектоники исследованных ЛУ через 3 суток после реперфузии (без коррекции) представлено в табл. 2. Из таблицы видно, что в герминативных центрах вторичных лимфоидных узелков исследованных ЛУ снижается количество бластных форм средних лимфоцитов, с параллельным ростом малых форм. В ПКЛУ, по сравнению с интактными, средние лимфоциты снижаются в 1,5 раза, в БЛУ – 3 раза, а наибольший рост малых лимфоцитов регистрируется в ПКЛУ. Здесь же существенно возрастает число макрофагов, незначительно увеличивается количество деструктивно измененных клеток. В данной группе эксперимента цитоархитектоника паракортикальной зоны исследованных ЛУ отличалась заметным, по сравнению с интактной группой, ростом числа средних лимфоцитов (в ПКЛУ – 2 раза), увеличением количества макрофагов (в БЛУ – 2 раза).

В мозговых синусах и мозговых тяжах исследованных лимфатических узлов данной группы экспериментов наблюдается увеличение плазматических клеток и макрофагов, по сравнению с интактной группой (табл. 2).

Через 3 суток после декомпрессии и коррекции инфузией физиологического раствора (контроль), во всех исследованных лимфатических узлах обнаружено определенное увеличение площади коркового вещества с дальнейшим снижением мозгового вещества (табл. 1). Одновременно практически во всех ЛУ наблюдается уменьшение числа лимфоидных узелков и их диаметра, размеров краевого синуса с параллельным ростом площади мозговых синусов (табл. 1). Оценка К/М и Мт/Мс индексов через 3 суток после контрольной коррекции РПП СДС показала достоверное снижение К/М (по сравнению с группой без коррекции) практически по всем ЛУ на 4–19 %, (Р ≤ 0,05) с ростом индекса Мт/Мс на 7–60 % (по сравнению с группой без коррекции; Р ≤ 0,05) (табл. 1). Оценка клеточного состава функциональных зон изученных ЛУ показала, что через 3 суток после реперфузии и контрольной коррекции в герминативных центрах вторичных лимфоидных узелков основную массу клеток составляют малые, средние лимфоциты, макрофаги и деструктивно измененные клетки, а мозговые синусы исследованных ЛУ содержат зрелые плазматические клетки, макрофаги и малые лимфоциты. В мозговых тяжах на данном сроке контрольной коррекции РПП СДС наблюдается уменьшение количества плазмоцитов и макрофагов (табл. 3).

Анализ микропрепаратов исследованных ЛУ через 3 суток после реперфузии и инфузии перфторана (опыт) показал определенные особенности их позитивной структурной перестройки, более выраженные, чем в контрольной группе (после инфузии физ. р-ра) с наибольшим приближением показателей к интактным значениям. Так, площадь коркового вещества исследованных ЛУ по сравнению с контролем увеличивается в ПКЛУ на 18 %, в БЛУ на 7 % и в ПЛУ на 0,3 % (Р ≤ 0,05).

Таблица 1

Морфометрическая характеристика относительных размеров структурно-функциональных зон подколенных, поясничных и брыжеечных лимфатических узлов крыс через 3 суток коррекции РПП СДС (М ± m; n = 30; в %; Р ≤ 0,05)

Примечание. К/М индекс – корково-мозговой индекс. Мт/Мс – индекс соотношения мякотных тяжей к мозговым синусам; Р ≤ 0,05 – по сравнению с контролем.

Площадь мозгового вещества исследованных ЛУ, по сравнению с контрольной группой в ПКЛУ больше на 2,5 %, в ПЛУ на 21 %, а в БЛУ на 7,5 % (Р ≤ 0,05) (табл. 1). Количество лимфоидных узелков с центрами размножения, по сравнению с контролем уменьшается в ПКЛУ на 33 %; в ПЛУ и БЛУ на 2,7 % (Р ≤ 0,05). Количество лимфоидных узелков без центров размножения по сравнению с контролем возрастает в БЛУ на 60 %; и в ПКЛУ на 18 % (Р ≤ 0,05). Аналогичным образом обнаруживается и превосходство площади указанных лимфоидных узелков при сравнении их с контрольной группой эксперимента. После реперфузии и коррекции ПФ отмечается значительное, по сравнению с контролем, уменьшение площади краевого, корковых, промежуточных и мозговых синусов практически во всех исследованных объектах. Необходимо отметить, что через 3 суток после реперфузии и коррекции ПФ показатели К/М и Мт/Мс индексов исследованных ЛУ достигают значений, наиболее близких в интактной группе наблюдения (табл. 1). На данном сроке коррекции СДС ПФ возрастает толщина капсулы исследованных ЛУ, которая максимально (по сравнению с контролем) приближается к интактным показателям, по нормализации которой, по-видимому, можно косвенно судить о степени восстановления их размеров.

Таблица 2

Клеточный состав структурно-функциональных зон подколенных, поясничных и брыжеечных лимфатических узлов крыс через 3 суток после воспроизведения РПП СДС (М ± m; n = 30; в %; Р ≤ 0,05)

Примечание. Р ≤ 0,05 – по сравнению с контролем.

Анализ цитоархитектоники функциональных зон исследованных ЛУ через 3 суток после реперфузии и коррекции ПФ показал, что их герминативные центры в основном представлены средними, малыми лимфоцитами, макрофагами и деструктивными клетками (табл. 3), которые по сравнению с аналогичным контролем достоверно возрастают в 1,5–2 раза, максимально приближаясь к интактным значениям. Паракортикальная зона исследованных ЛУ на данном этапе опытной коррекции представлена возрастающим (по сравнению с контролем) числом малых лимфоцитов, макрофагов и ретикулярных клеток. При этом количество деструктивно измененных клеток в ней существенно уменьшается. В мозговых синусах исследованных ЛУ через 3 суток после коррекции СДС ПФ наблюдается превосходящий в контроле рост лимфоцитов и макрофагов, а также снижение числа плазмоцитов, деструктивно измененных клеток. Мозговые тяжи исследованных ЛУ в основном содержат плазматические клетки и макрофаги, число которых (при сравнении с контролем) наиболее близко к таковым в интактной группе наблюдения (табл. 3).

Таблица 3

Клеточный состав структурно-функциональных зон подколенных, поясничных и брыжеечных лимфатических узлов крыс через 3 суток после коррекции РПП СДС (М ± m; n = 30; в %; Р ≤ ,05)

Примечание. Р ≤ 0,05 – по сравнению с контролем.

Таким образом, вышеизложенное позволяет сделать выводы:

– При экспериментальном моделировании РПП СДС тяжелой степени без коррекции через 3 суток в ПКЛУ, ПЛУ и БЛУ развиваются однонаправленного характера, различной степени интенсивности морфологические изменения их структурно-функциональных зон с нарушением клеточного состава. Наиболее выраженные изменения наблюдаются в ПКЛУ и ПЛУ.

– Через 3 суток после реперфузии и контрольной коррекции РПП СДС инфузией физиологического раствора сохраняется значительное расширение краевых и мозговых синусов, истончение капсулы исследованных ЛУ, а в функциональных зонах большое количество деструктивно измененных клеток, что позволяет судить о малой эффективности проводимой инфузионной терапии.

– Через 3 суток после реперфузии и опытной коррекции РПП СДС инфузией перфторана происходит более выраженное, чем в контроле, восстановление структурно-функциональной организации как регионарных от области компрессии, так и отдаленных от него ЛУ с значительным увеличением средних, малых лимфоцитов, макрофагов и снижением числа деструктивно измененных клеток. Из этого следует, что инфузия ПФ в РПП СДС способствует более полной реализации компенсаторно-приспособительных возможностей и активации процессов бласттрансформации в исследованных ЛУ.

Рецензенты:

Бакуев М.М., д.м.н., профессор, заведующий кафедрой гистологии, ГБОУ ВПО «Дагестанская государственная медицинская академия» Минздрава России, г. Махачкала;

Ахмадудинов М.Г., д.м.н., профессор, заведующий кафедрой оперативной хирургии и топографической анатомии, ГБОУ ВПО «Дагестанская государственная медицинская академия» Минздрава России, г. Махачкала.

Работа поступила в редакцию 23.07.2014.

Библиографическая ссылка