Сосудистые заболевания головного мозга продолжают оставаться одной из важнейших проблем в современном здравоохранении, поскольку во всем мире заболеваемость, инвалидизации и смертность от данной нозологии остаются на высоком уровне. В структуре терапевтического воздействия при цереброваскулярных заболеваниях одним из направлений является эффективная и своевременно начатая нейропротекторная терапия, которая обеспечивает увеличение периода выживания нейронов в условиях повреждающего действия каскада нейрохимических реакций как при острых сосудистых катастрофах (инсульт, травма и др.), так и при хронических патологических процессах в нервной системе [1, 7]. Существует огромное количество препаратов, позиционирующихся как нейропротекторные, в том числе и препараты с ГАМКергическим механизмом действия [5, 6]. В результате исследований, проведённых на кафедре фармакологии и биофармации ФУВ ВолгГМУ, было выявлено вещество под лабораторным шифром РГПУ-195, являющееся производным ГАМК и обладающее ноотропным, анксиоседативным, антидеприсантным, стресспротективным действием [3,4]. Совокупность данных свойств позволяет предположить наличие у данного соединения и нейропротекторной активности, поэтому целью работы стало изучение возможного нейропротективного действия нового производного ГАМК–соединения РГПУ-195 в различных дозах на модели ишемии головного мозга, вызванной необратимой одномоментной окклюзии общих сонных артерий.
Материалы и методы исследования
Эксперимент проведён на половозрелых крысах-самцах массой 200–220 г. В ходе исследования были сформированы следующие группы: группа ложнооперированных животных (ЛО); контрольная группа (негативный контроль) – животные, подвергшиеся необратимой одномоментной окклюзии общих сонных артерий, получавших физиологический раствор; пять групп животных, получавших в тех же условиях исследуемое соединение РГПУ-195 в дозах соответственно 11, 22, 44 и 88 мг/кг и препарат сравнения фенибут в дозе 25 мг/кг.
Нарушение мозгового кровообращения моделировалось путём необратимой билатеральной окклюзии общих сонных артерий на наркотизированных хлоралгидратом (400мг/кг внутрибрюшинно) крысах [2]. Все препараты вводились внутрибрюшинно однократно за 30 минут до наложения лигатур на общие сонные артерии. Животным ЛО группы подводились лигатуры под общие сонные артерии без дальнейшего их затягивания.
О нейропротекторном действии исследуемого производного ГАМК (соединения РГПУ-195) судили по его влиянию на выживаемость, степень развития неврологического дефицита у животных с недостаточностью мозгового кровообращения. Неврологический дефицит регистрировался по шкале McGrow через 6, 12, 24, 48 и 72 часа после моделирования патологии. Для оценки когнитивной и мнестической функции использовались тесты: «условная реакция пассивного избегания» (УРПИ) и «тест экстраполяционного избавления» (ТЭИ), для оценки двигательной и ориентировочно-исследовательской активности – тест «открытое поле» (ОП).
Обработку данных проводили с помощью пакета программ Microsoft Excel и BioStat 2008 5.2.5.0. Результаты представлены в виде средней (M) и стандартной ошибки средней ( ± m), достоверность показателей в сравниваемых группах оценивали с помощью рангового однофакторного критерия Крускалла‒Уоллиса, критерия Данна, критерия Фишера.
Результаты исследования и их обсуждение
Необратимая окклюзия общих сонных артерий приводила к гибели животных. Суммированные данные представлены в табл. 1. Так к концу третьих суток в группе негативного контроля процент летальных исходов составил 70 %. Профилактическое однократное введение исследуемого соединения в дозе 22 и 44 мг/кг оказывало защитный эффект, о чём свидетельствовало достоверно меньшее количество летальных исходов в указанных группах (табл. 1)
Таблица 1
Летальность животных после необратимой окклюзии общих сонных артерий
Группа животных |
Доза, мг/кг |
Время после окклюзии общих сонных артерий |
|||||||||
6 ч |
12 ч |
24 ч |
48 ч |
72 ч |
|||||||
n/N |
% |
n/N |
% |
n/N |
% |
n\N |
% |
n/N |
% |
||
ЛО |
- |
0/10 |
0 % |
0/10 |
0 % |
0/10 |
0 % |
0/10 |
0 % |
0/10 |
0 % |
Контроль |
- |
5/20 |
25 % |
6/20 |
30 % |
8/20 |
40 % |
12/20 |
60 % |
14/20 |
70 % |
РГПУ-195 |
11 |
2/10 |
20 % |
3/10 |
30 % |
5/10 |
50 % |
6/10 |
60 % |
6/10 |
60 % |
22 |
1/10 |
10 % |
2/10 |
20 % |
4/10 |
40 % |
4/10 |
40 % |
4/10 |
40 %* |
|
44 |
0/10 |
0 % |
2/10 |
20 % |
3/10 |
30 % |
3/10 |
30 %* |
3/10 |
30 %* |
|
88 |
0/10 |
0 % |
3/10 |
30 % |
4/10 |
40 % |
5/10 |
50 % |
6/10 |
60 % |
|
Фенибут |
25 |
2/20 |
10 % |
4/20 |
20 % |
6/20 |
30 % |
8/20 |
40 % |
8/20 |
40 %* |
Примечание: n – количество умерших животных; N – количество животных в группе; ЛО – ложнооперированные животные; % – процент летальных исходов в группе; * – различия достоверны по сравнению с контрольной группой (p < 0,05, критерий Фишера).
Степень неврологического дефицита у животных контрольной группы после моделирования ишемии возрастала в первые 24 часа с 5,9 ± 0,63 до 7,3 ± 0,56 балла. В последующие 48 часов происходило повышение балла неврологического дефицита до 7,8 ± 0,79. У выживших животных наблюдались вялость, односторонний и двусторонние блефароптозы, общий тремор, манежные движения, парезы одной из конечностей.
У животных, получавших соединение РГПУ-195 в дозах 22 и 44 мг/кг, а также фенибут, суммарный индекс McGrow по сравнению с показателями контрольной группы был достоверно ниже (табл. 2). Так, к 72 часу наблюдений эти показатели составили соответственно 5,6 ± 1,22, 4,5 ± 1,21 и 5,15 ± 0,95 балла, что на 22; 42 и 34 % ниже, чем в контрольной группе.
При оценке двигательной и ориентировочно-исследовательской активности в тесте ОП установлено, что животные, получавшие РГПУ-195 в дозе 44 мг/кг и фенибут, пересекали большее количество квадратов и выполняли большее количество стоек и заглядываний в норки, чем животные негативного контроля (рис. 1).
В тестах УРПИ и ТЭИ через 72 часа после окклюзии общих сонных артерий у животных оценивали мнестическую функцию. Исследуемое соединение РГПУ-195 в дозе 22 и 44 мг/кг, а также фенибут в дозе 25 мг/кг увеличивали латентный период первого захода в темный отсек в тесте УРПИ, при этом уменьшали количество животных в группе, посетивших его, а также уменьшали латентный период решения экстраполяционной задачи и увеличивали число животных, решивших ее в тесте ТЭИ, по сравнению с группой негативного контроля (рис. 2).
Таблица 2
Степень неврологических нарушений у животных после окклюзии сонных артерий
Группы животных |
Доза, мг/кг |
Время после окклюзии сонных артерий |
||||
6 часов |
12 часов |
24 часа |
48 часов |
72 часа |
||
ЛО |
- |
0,3 ± 0,081 |
0 |
0 |
0 |
0 |
Контроль-ишемия |
- |
5,85 ± 0,63* |
6,85 ± 0,52* |
7,3 ± 0,56* |
7,82 ± 0,63* |
7,75 ± 0,79* |
РГПУ-195 |
11 |
5,5 ± 0,86 |
6,0 ± 0,98 |
6,9 ± 1,1 |
7,7 ± 0,99 |
7,5 ± 1,3 |
22 |
4,8 ± 0,77 |
4,9 ± 0,87 |
5,6 ± 1,21 |
5,6 ± 1,23 |
5,6 ± 1,23 |
|
44 |
4,1 ± 0,43# |
4,5 ± 0,97# |
4,5 ± 1,22# |
4,6 ± 1,20# |
4,5 ± 1,21# |
|
88 |
4,2 ± 0,48# |
5,6 ± 0,98 |
5,7 ± 1,22 |
6,2 ± 1,28 |
7,3 ± 1,12 |
|
Фенибут |
25 |
5,0 ± 0,47 |
5,72 ± 0,57 |
5,8 ± 0,70 |
5,52 ± 0,87# |
5,15 ± 0,91# |
Примечание: * – различия достоверны по сравнению с ЛО группой (p < 0,05); # – различия достоверны по критерию Данна в сравнении с группой негативного контроля (контроль-ишемия) (р < 0,05).
Рис. 1. Двигательная и ориентировочно-исследовательская активность животных через 72 часа после необратимой одномоментной окклюзии общих сонных артерий. Примечание: ДА – двигательная активность (количество пересечённых квадратов животными в тесте ОП); ОИА – ориентировочно-исследовательская активность (количество суммированных актов стоек и заглядываний в норки; * – различия достоверны по критерию Данна в сравнении с ЛО (р < 0,05); # – различия достоверны по критерию Данна в сравнении с контрольной группой (р < 0,05)
Рис. 2. Оценка когнитивной и мнестической функции животных через 72 часа после необратимой одномоментной окклюзии общих сонных артерий. Примечание: ЛП – латентный период (с); ЛО – ложнооперированные животные; * – различия достоверны по критерию Данна в сравнении с ЛО (р < 0,05); # – различия достоверны по критерию Данна в сравнении с контрольной группой (р < 0,05)
Заключение
Таким образом, необратимая окклюзия общих сонных артерий сопровождается высокой смертностью животных с развитием у них тяжелого психоневрологического дефицита. В указанных условиях максимально высокой нейропротективной активностью, реализующейся в увеличении количества выживших животных, уменьшении степени выраженности неврологических, поведенческих нарушений и благоприятным течением клинической картины обладает соединение РГПУ-195 в дозе 44 мг/кг. Полученные результаты исследований являются экспериментальным обоснованием целесообразности дальнейшего углубленного изучения производного ГАМК–соединения под лабораторным шифром РГПУ-195 в дозе 44 мг/кг в качестве потенциального нейропротектора в условиях ишемии головного мозга.
Рецензенты:
Бородкина Л.Е., д.м.н., доцент кафедры фармакологии и биофармации, ФУВ ГБОУ ВПО «Волгоградский государственный медицинский университет» Минздрава России, г. Волгоград;
Бугаева Л.И., д.б.н., профессор, заместитель директора НИИ фармакологии ГБОУ ВПО «Волгоградский государственный медицинский университет» Минздравсоцразвития России, г. Волгоград;
Работа поступила в редакцию 03.06.2013.
Библиографическая ссылка
Мазина Н.В., Волотова Е.В., Куркин Д.В. НЕЙРОПРОТЕКТОРНОЕ ДЕЙСТВИЕ НОВОГО ПРОИЗВОДНОГО ГАМК-РГПУ-195 ПРИ ИШЕМИИ ГОЛОВНОГО МОЗГА // Фундаментальные исследования. – 2013. – № 6-6. – С. 1473-1476;URL: https://fundamental-research.ru/ru/article/view?id=31762 (дата обращения: 17.08.2024).