Научный журнал

Фундаментальные исследования

ISSN 1812-7339

"Перечень" ВАК

ИФ РИНЦ = 1,674

• Авторы
• Резюме
• Файлы

Сизова Е.Н., Циркин В.И.

В опытах на 89 продольных полосках рога матки небеременных крыс показано, что ликвор женщин и мужчин в разведении 1:50 (но не в разведениях 1:100, 1:500, 1:103, 1:104, 1:106, 1:108, 1:1010, 1:1012) повышает способность адреналина (10-9 или 10-8 г/мл) ингибировать спонтанную сократительную активность полосок. Это говорит о наличии в ликворе человека эндогенного сенсибилизатора β-адренорецепторов. Выявлена также способность ликвора оказывать миоцитингибирующий (1:50-,…, 1:1010) и β-адреноблокирующий (1:104, ликвор мужчин) эффекты, природа которых требует дальнейших исследований.

Статья в формате PDF

293 KB

Материал и методы

Исследован ликвор 10 мужчин и 10 женщин. Оценку β-адреномодулирующей активности 9 разведений ликвора (1:50, 1:100, 1:500, 1:10³, 1:10⁴, 1:10⁶, 1:10⁸, 1:10¹⁰, 1:10¹²) проводили по методике [15] на 89 продольных полосках (длиной 6-8 мм и шириной 2-3 мм) рога матки небеременных крыс (n=17), находящихся в фазе метаэструса или диэструса. Регистрацию сократительной активности (СА) полосок осуществляли на «Миоцитографе» [15] при 38^оС и пассивной аэрации его рабочих камер (объемом 1мл) при непрерывной перфузии полосок раствором Кребса со скоростью 0,7 мл/мин и их исходной нагрузке в 4,9 мН. Раствор Кребса содержал (в мМ) NaCl-136, КCl-4,7, CaCl₂-2,52, MgCl₂-1,2, KH₂PO₄-0,6, NaHCO₃-4,7, C₆H₁₂O₆-11,0 (рН -7,4). О наличии у ликвора способности оказывать β-адреномодулирующее действие судили по изменению β-адренореактивности полосок. Ее определяли по сократительной реакции спонтанно активных полосок на адреналин (10^-9 или 10^-8 г/мл). Тестирование адреналином проводили трижды (по 10-минут, с 10-20-минутными интервалами), в том числе до, на фоне и после 20-минутного воздействия одного из 9 разведений ликвора (рис., панели А и Б). Результаты исследования подвергнуты статистической обработке, а различия, оцениваемые по критерию Стьюдента, считали достоверными при р<0,05.

Результаты исследований и их обсуждение

Полоски обладали спонтанной СА (рис.): на 10-минутном интервале они генерировали 5,8-12,0 сокращений с амплитудой 4,9-12,0 мН, а их суммарная СА достигала 42,1-110,0 мН/10мин. Адреналин (10^-9 и 10^-8 г/мл) при 1-м тестировании (рис.) обратимо угнетал частоту сокращений (до 65,3-88,9% от исходного уровня), их амплитуду (до 42,4-95,2%) и суммарную СА (до 50,4-88,0%), что, согласно [8,15], объясняется активацией β-адренорецепторов.

Влияние ликвора на спонтанную СА полосок зависело от степени его разведения и, в определенной степени, от пола исследуемых. У женщин почти все разведения ликвора (1:50, 1:100, 1:500, 1:10³, 1:10⁴, 1:10⁶, 1:10⁸, 1:10¹⁰) как правило, достоверно уменьшали СА. Например, суммарная СА при их воздействии снижалась соответственно (М±m) до 79,2±6,63%*, 82,7±8,57%, 60,6±11,3%*, 70,4±14,8%, 83,8±6,61%*, 67,5±8,03%*, 76,2±12,5% и 77,5±8,85%* от фонового уровня (символ *здесь и далее означает достоверное изменение в сравнении с исходным уровнем, p<0,05). Разведение 1:10¹² ликвора женщин не влияло на СА полосок (суммарная СА составила 92,0±9,02%). У мужчин разведения ликвора 1:50, 1:100, 1:500, 1:10³, 1:10⁴ не вызывали достоверного снижения СА: суммарная СА составила соответственно 89,1±5,40%, 88,3±16,50%, 91,3±10,30%, 84,0±8,65% и 81,2±9,23% от фонового уровня. В то же время разведения 1:10⁶, 1:10⁸, 1:10¹⁰ и в, определенной степени, 1:10¹² достоверно уменьшали ее (в частности, снижали суммарную СА соответственно до 73,6±12,40%*, 87,8±6,14%*, 76,4±9,61%* и 77,8±13,30% от фонового уровня). Эти результаты согласуются с данными [3,9,13,15,16] о способности больших (1:10³ и выше) разведений сыворотки крови человека оказывать миоцитингибирующий эффект в опытах с миометрием крысы; этот эффект в большей степени выражен у сыворотки крови женщин, а его наличие объясняется содержанием в крови эндогенного ингибитора сократимости миоцитов. Очевидно, что ликвор человека также содержит его. Не исключено, что эндогенный ингибитор сократимости миоцитов, содержащийся в ликворе, представляет собой комплекс молекул, среди которых имеется и агонисты β-адренорецепторов, так как их блокада обзиданом (10^-6 г/мл) снимает ингибирующее действие ликвора (рис., панель В). Следует подчеркнуть, что ни одно из разведений ликвора (в том числе 1:50 и 1:100) не усиливало спонтанную СА полосок, это существенно отличает ликвор от сыворотки крови, 10-, 50- и 100-кратные разведения которой, согласно [3,9,13,15,16], повышают тоническую и фазную СА миометрия крысы, что объясняется наличием в крови эндогенного активатора сократимости миоцитов. Это позволяет заключить, что в ликворе такой фактор отсутствует.

Влияние ликвора на β-адренореактивность тест-объекта зависела от кратности его разведения - и у женщин, и у мужчин 50-кратное разведение достоверно усиливало ингибирующее влияние адреналина, т.е. проявляло β-адреносенсибилизирующую активность. Так, при 1-м тестировании адреналин снижал суммарную СА в опытах с ликвором женщин до 71,8±9,16%* от фонового уровня, а в опытах с ликвором мужчин - до 88,0±7,99%*, а при 2-м тестировании (т.е. на фоне ликвора) соответственно - до 27,2±9,31%*^а и 49,8±11,9%*^а (символ ^а здесь и далее означает достоверность различия с 1-м тестированием адреналином, р<0,05); при 3-м тестировании он снижал ее соответственно до 76,6±11,1%* и 92,1±4,12%. Это означает, что 50-кратное разведение ликвора содержит ЭСБАР. Все остальные разведения ликвора женщин и мужчин (1:100, 1:500, 1:10³, 1:10⁴, 1:10⁶, 1:10⁸, 1:10¹⁰, 1:10¹²), как правило, не проявляли β-адреномодулирующую активность. Например, в опытах с 10³-кратным разведением ликвора женщин при 1-м, 2-м и 3-м тестированиях адреналин снижал суммарную СА соответственно до 68,3±6,73%*, 63,9±12,9%* и 83,3±9,96% от фонового уровня. Исключение составило 10⁴-кратное разведение ликвора мужчин - оно достоверно снижало реакцию полосок на адреналин, т.е. проявляло β-адреноблокирующее действие: например, суммарная СА полосок при 1-м, 2-м и 3-м тестированиях адреналином снижалась соответственно до 51,5±11,6%*, 79,2±5,19%*^а и 96,7±3,33% от исходного уровня. Ранее нами было показано [13,14], что небольшие (1:10, 1:50) разведения сыворотка крови человека способны проявлять β-адреноблокирующую активность (это объяснялось наличием в крови эндогенного блокатора β-адренорецепторов), причем сыворотка крови мужчин такую активность проявляла чаще, чем сыворотка женщин. Не исключено, что выявленная нами способность ликвора мужчин проявлять β-адреноблокирующую активность также связана с наличием у мужчин в ликворе эндогенного блокатора β-адренорецепторов.

В целом, учитывая данные о том, что сыворотка крови человека проявляет β-адреносенсибилизирующую активность в разведениях вплоть до 1:10³-1:10⁴ [3,9,13,15,16], а ликвор - лишь в разведении 1:50, результаты исследований позволяют заключить, что в ликворе женщин и мужчин (как и в сыворотке крови) имеется ЭСБАР, но его содержание в ликворе меньше (в 20-200 раз). Не исключается, что ликвор может содержать и эндогенный блокатор β-адренорецепторов, уровень которого у мужчин, вероятно, больше, чем у женщин.

При исследовании механизма действия ЭСБАР, выявляемого в ликворе человека, показано, что подобно ЭСБАР, содержащемуся в сыворотке крови, он способен проявлять свое действие на фоне калиевой контрактуры, т.е. в условиях деполяризации клети гиперкалиевым раствором (рис., панель Г). С учетом данных [4,12,13], это позволяет предположить, что основными компонентами ЭСБАР ликвора (как и крови) являются гистидин, триптофан и тирозин. Очевидно, что эти аминокислоты способны повышать β-адренореактивность нейронов мозга и тем самым изменять их ответы на адренергические медиаторы. Не исключено, что в основе известного положительного клинического эффекта триптофана [10] и тирозина [19] при депрессивных состояниях лежит их β-адреносенсибилизирующая активность. Следует отметить, что наша попытка [1] экспериментально доказать способность гистидина повышать β-адренореактивность нейронов изолированной коры мозжечка крысы пока не дала положительного результата, хотя в этих опытах была выявлена способность гистидина повышать устойчивость нейронов к гипоксии. Полагаем, что дальнейшее изучение вопроса о роли ЭСБАР (как и других эндогенных модуляторов хемореактивности) в деятельности нейронов мозга в условиях нормы и патологии, а также использование гистидина, триптофана, тирозина, предуктала, милдроната и других возможных экзогенных сенсибилизаторов β-адренорецеп-торов для профилактики и лечения заболеваний, вызванных дефицитом β-адренергических влияний, может стать одним из перспективных направлений в неврологии и психиатрии.

Панель А.

Панель Б.

Панель В.

Панель Г.

Рисунок. Сократительные эффекты адреналина (10^-8 г/мл; АДР-8), обзидана (10^-6 г/мл; ОБЗ-6), 100-кратного (панель А), 10³-кратного (панель Б) и 10⁴-кратного (панель В) разведений ликвора человека в опытах со спонтанно активными (панели А, Б и В) продольными полосками рога матки небеременной крысы, а также в опытах с полосками, сократительная активность которых повышена гиперкалиевым (60 мМ КСl; панель Г) раствором Кребса. Калибровка - 10 мН, 10 мин.

Литература

1. Власова И.Г., Циркин В.И. Мат. I международн. конф. // «Хроноструктура и хроноэкология репродуктивной функции» - М.- изд-во РУДН.- 2000.- С.49-51.
2. Мальчикова С.В., Сизова Е.Н., Циркин В.И. и др. // Рос. кардиол. журн.- 2003.- №3.- С.33-39.
3. Мальчикова С.В., Сизова Е.Н., Циркин В.И., Гуляева С.Ф., Трухин А.Н. //Рос. физиол. журнал им. И.М. Сеченова. 2003.- Т.89, №5.- С.556-563.
4. Ноздрачев А.Д., Туманова Т.В., Дворянский С.А. и др. Доклады РАН.// 1998.- Т.363, №1.- С.133-136.
5. Подтетенев А.Д., Братчикова Т.В., Котайш Г.А. Регуляция родовой деятельности.- М.: Изд-во РУДН, 2003; 53.
6. Подтетенев А.Д., Сизова Е.Н., Циркин В.И. и др. //Новые технологии в акушерстве и гинекологии: сб. матер. научно-практ. конф. акушеров-гинекологов Московского региона.- М.- ГВКГ им. Н.Н. Бурденко.- 2002.- С.46-51.
7. Проказова Н.В., Звездина Н.Д., Суслова И.В. и др. //Рос. физиол. журн. им. И.М. Сеченова. 1998; 84: 10: 969-978.
8. Сергеев П.В., Шимановский Н.Л., Петров В.И. Рецепторы физиологически активных веществ.- Волгоград, изд-во «Семь ветров». 1999; 640.
9. Сизова Е.Н., Циркин В.И., Подтетенев А.Д. и др. // Рос. кардиол. журн.- 2002.- №2.- С.50-56.
10. Сметник В.П., Тумилович Л.Г. Неоперативная гинекология. В 2-х книгах. С-Пб. 1995. Книга 1: 223; Книга 2: 200.
11. Суслова И. В., Коротаева А. А., Проказова Н. В. // Доклады РАН.- 1995.- Т.342, №2.- С.273-276.
12. Туманова Т.В., Циркин В.И., Дворянский С.А. //Сб. научн.тр. Киров: КГМА.- 2001.- С.48-51.
13. Циркин В.И., Дворянский С.А. Сократительная деятельность матки (механизмы регуляции). Киров. 1997; 270.
14. Циркин В.И., Дворянский С.А., Братухина С.В. и др. // Бюл. эксп.. биолог. и мед. 1997.- Т.123, №3.- С.248-252.
15. Циркин В.И., Дворянский С.А., Ноздрачев А.Д. и др. // Доклады РАН. 1997.- Т.352, №1.- С.124-126.
16. Циркин В.И., Ноздрачев А.Д., Сазанова М.Л. и др. // Доклады РАН.- 2003.- Т.388, №5.- С.704-707.
17. Циркин В.И., Ноздрачев А.Д., Сизова Е.Н. и др. // Доклады РАН.- 2002.- Т.383, №5.- С.698-701.
18. Циркин В.И., Сизова Е.Н., Подтетенев А.Д. и др. // Рос. кардиол. журн.- 2002.- №1.- С.45-52.
19. Tyrrell H. A., Maher T. J. Tyrosine: // J. Nutr. and Environ. Med.- 1998.-V.4.- P.349-359.

Библиографическая ссылка