Одной из наиболее остро стоящих проблем, возникающих при назначении пациентам иммунодепрессантов и цитостатиков, является высокий риск развития инфекционных осложнений, вызванных условно-патогенными микроорганизмами, в том числе представителями нормальной микрофлоры организма человека, в число которых входят энтерококки. Вместе с тем, некоторые непатогенные штаммы энтерококков обладают широким спектром антагонистической активности, и их численность в составе микрофлоры толстой кишки в значительной степени влияет на колонизационную резистентность.
Цель настоящего исследования - оценка влияния циклофосфамида, преднизолона и метотрексата на численность и видовой состав энтерококков в составе кишечной микрофлоры белых мышей.
Материалы и методы.
В работе использованы препараты Веро-метотрексат, 1%-ный раствор натриевой соли метотрексата для инъекций (ЗАО «Верофарм», Москва), Циклофосфан, порошок для приготовления раствора для инъекций (ОАО «Биохимик», Саранск), Преднизолон Никомед, раствор для внутривенного и внутримышечного введения (Nycomed, Австрия), питательные среды производства ГНЦ прикладной микробиологии и биотехнологии (г. Оболенск).
Исследования выполнены на 40 белых беспородных мышах-самках массой 30±3 г. Контрольные и опытные группы состояли из 10 животных. Препараты вводили внутрибрюшинно. Схемы введения выбирали исходя из режимов дозирования, применяемых у человека. В соответствии с рекомендациями «Руководства по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ» (Москва, 2000) дозы, применяемые у человека, увеличивали в 11,8 раза. Циклофосфамид вводили в дозе 35,4 мг/кг ежедневно; метотрексат - 2,5 мг/кг в неделю за 2 приёма с интервалом 24 часа; преднизолон - 2,5 мг/кг ежедневно. Продолжительность введения всех препаратов составляла 6 недель. Животным контрольной группы вводили стерильную дистиллированную воду. Выделение энтерококков осуществляли на энтерококкагаре (г. Оболенск), идентификацию Enterococcus faecalis и Enterococcus faecium осуществляли визуально по морфологии колоний через 24-48 часов инкубации при 37˚С. Статистическую обработку полученных данных проводили на IBM PC совместимом компьютере с помощью программ STATISTICA (StatSoft, Inc.) релиз 7.0и Primer of Biostatistics (Stanton A. Glantz, McGraw Hill) версия 4.03 в среде WINDOWS.
Результаты.
Распределение значений оцениваемых показателей отличалось от нормального, поэтому для оценки различий между группами использовали непараметрический дисперсионный анализ по критерию Крускала-Уоллиса и множественные сравнения по критерию Данна.
Через 2 недели наблюдались статистически достоверные (P<0,05) различия между показателями общего числа энтерококков у контрольной группы и группы, получавшей метотрексат; имело место повышение общего числа энтерококков в 6,7 раза (см. таблицу 1). У животных, получавших циклофосфамид и преднизолон, содержание энтерококков также было повышено, однако различия оказались статистически недостоверными.
Наблюдались тенденции к повышению числа E. faecium у мышей всех опытных групп и к снижению числа E. faecalis у мышей, получавших преднизолон и метотрексат, однако различия были статистически недостоверны.
Таблица 1. Общее число энтерококков в фекалиях мышей, получавших иммунодепрессанты (данные через 2 недели после начала введения)
Группа |
Медиана |
Минимум |
Максимум |
25-й процентиль |
75-й процентиль |
Квартильный Размах |
число энтерококков в млн КОЕ/г |
||||||
Контроль |
2,66 |
1,00 |
10,24 |
2,34 |
6,03 |
3,69 |
Циклофосфан |
7,82 |
2,50 |
17,06 |
4,38 |
11,93 |
7,56 |
Преднизолон |
9,22 |
4,68 |
36,34 |
6,41 |
30,15 |
23,74 |
Метотрексат |
17,75 |
5,48 |
54,81 |
6,62 |
40,13 |
33,52 |
Через 4 недели наблюдались статистически достоверные (P<0,05) различия между показателями общего числа энтерококков у контрольной группы и групп, получавших преднизолон (превышение в 5,1 раза) и метотрексат (превышение в 1,7 раза, таблица 2).
Таблица 2. Общее число энтерококков в фекалиях мышей, получавших иммунодепрессанты (данные через 4 недели после начала введения)
Группа |
Медиана |
Минимум |
Максимум |
25-й процентиль |
75-й процентиль |
Квартильный Размах |
число энтерококков в млн КОЕ/г |
||||||
Контроль |
3,65 |
2,73 |
4,40 |
3,13 |
4,20 |
1,08 |
Циклофосфан |
6,48 |
2,88 |
14,51 |
4,49 |
8,82 |
4,34 |
Преднизолон |
18,73 |
4,41 |
25,57 |
9,95 |
20,72 |
10,77 |
Метотрексат |
6,18 |
5,17 |
10,00 |
5,62 |
8,25 |
2,63 |
Имело место статистически достоверное повышение числа E. faecalis у мышей, получавших преднизолон, по сравнению со всеми остальными группами, а также повышение количества E. faecium у группы, получавшей преднизолон, по сравнению с контрольной группой (таблицы 3 и 4).
Таблица 3. Число E. faecalis в фекалиях мышей, получавших иммунодепрессанты (данные через 4 недели после начала введения)
Группа |
Медиана |
Минимум |
Максимум |
25-й процентиль |
75-й процентиль |
Квартильный Размах |
число E. faecalis в млн КОЕ/г |
||||||
Контроль |
2,57 |
1,32 |
3,73 |
1,81 |
3,29 |
1,48 |
Циклофосфан |
1,22 |
0,11 |
4,30 |
0,57 |
3,52 |
2,95 |
Преднизолон |
9,94 |
8,35 |
10,53 |
8,45 |
10,01 |
1,56 |
Метотрексат |
2,09 |
0,29 |
2,69 |
0,52 |
2,56 |
2,04 |
Таблица 4. Число E. faecium в фекалиях мышей, получавших иммунодепрессанты (данные через 4 недели после начала введения)
Группа |
Медиана |
Минимум |
Максимум |
25-й процентиль |
75-й процентиль |
Квартильный Размах |
число E. faecium в млн КОЕ/г |
||||||
Контроль |
0,83 |
0,45 |
3,08 |
0,55 |
2,35 |
1,80 |
Циклофосфан |
5,09 |
0,19 |
11,43 |
2,40 |
8,92 |
6,52 |
Преднизолон |
7,93 |
4,41 |
25,57 |
4,97 |
18,12 |
13,15 |
Метотрексат |
3,82 |
3,14 |
9,71 |
3,20 |
7,07 |
3,87 |
Через 6 недель после начала введения препаратов отсутствовали достоверные различия как по общему числу энтерококков, так и по их видовому составу.
Таким образом, из рассматриваемых препаратов наиболее значимые изменения в численности и видовом составе энтерококков вызывают преднизолон и метотрексат; указанные изменения наблюдаются через 2-4 недели после начала введения препаратов и нивелируются через 6 недель.
Работа представлена на V научную международную конференцию «Современные проблемы экспериментальной и клинической медицины», Тайланд (Паттайа), 20-28 февраля 2008 г. Поступила в редакцию 27.12.2007.
Библиографическая ссылка
Шитов Л.Н. ВЛИЯНИЕ ИММУНОДЕПРЕССАНТОВ НА ЧИСЛЕННОСТЬ И ВИДОВОЙ СОСТАВ ЭНТЕРОКОККОВ В СОСТАВЕ МИКРОФЛОРЫ ТОЛСТОЙ КИШКИ // Фундаментальные исследования. – 2008. – № 1. – С. 152-154;URL: https://fundamental-research.ru/ru/article/view?id=2514 (дата обращения: 16.08.2024).