В доступной нам литературе, отсутствуют цитофотометрические данные об изменениях содержания цитоплазматической РНК в базалиоцитах эпидермиса кожи при воздействии микроволн термогенной интенсивности. Все это и обусловило, особенно с учетом возможности экстраполяции полученных экспериментальных данных на человека (Бонд В., 1971) необходимость проведения нашего исследования.
Исследование проведено на 65 половозрелых морских свинках-самцах, массой 400-450 гр., из которых 35 были использованы в эксперименте, а 30 - служили в качестве контроля. Содержание морских свинок проводилось в соответствии с правилами, принятыми Европейской конвенцией по защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и других научных целей (Страсбург, 1986). Перед проведением эксперимента морские свинки адаптировались к условиям лаборатории с целью исключения стрессового фактора 3-5 раз подвергались «ложному» воздействию с включенной аппаратурой, но отсутствием самого излучения. Экспериментальные животные подвергались воздействию однократного общего микроволнового излучения (длина волны-12,6 см, частота-2375 МГц, плотность потока мощности-60 мВт/см2, экспозиция-10мин.). В качестве источника СВЧ-излучения был использован терапевтический аппарат «ЛУЧ-58». Облучение производилось в одно и то же время суток - с 10 до 11 часов в осеннее-зимний период с учетом суточной и сезонной радиочувствительности (Щербова Е.Н., 1984). Выведение животных из эксперимента и забор материала производился сразу, через 6 часов, на 1, 5, 10, 25 и 60-е сутки после окончания воздействия. Кусочки кожи были взяты из различных областей (голова (щека), спина, живот). Для цитофотометрического исследования был использован материал, фиксированный в 12% нейтральном формалине, затем залитый в парафин, из которого изготавливались срезы толщиной 7 мкм, которые окрашивались с применением хромово-квасцового галлоцианина по L.Einarson (1951), для выявления РНК и ДНК. Фотометрическое определение активности содержания цитоплазматической РНК производилось в 50 клетках каждого среза. Цитофотометрическое исследование осуществляли с помощью однолучевого микроскопа «ЛЮМАМ-3» с объективом 40, размером зонда 0,1 мм, в проходящем свете с длиной волны 576 нм. О содержании цитоплазматической РНК в изучаемых клетках судили по светопропускной способности окрашенных структур и фона. Все данные выражались в условных единицах оптической плотности (Журавлева Т.Б., Прочуханов Р.А., 1978). Сигналы фотоэлектрического умножителя были подвергнуты преобразованию, регистрировались и статистически обрабатывались по правилам параметрической статистики с использованием критерия Стьюдента, вычисляли средние значения и их стандартные отклонения. Достоверность различий между контрольными и опытными значениями принималась при вероятности Р<0,05 (Автандилов Г.Г., 1990). Проводился гематологический контроль (подсчет общего количества эритроцитов и лейкоцитов).
Сразу после окончания воздействия микроволн, при цитофотометрическом исследовании гистологических препаратов, со стороны базалиоцитов кожи всех участков локализации отмечается снижение, по сравнению с контролем, цитоплазматической РНК, но в наибольшей степени в коже живота - на 13,3% от исходной (р<0,05). В последующие сроки после окончания воздействия СВЧ-волн термогенной интенсивности наблюдается дальнейшее снижение содержания цитоплазматической РНК в базалиоцитах эпидермиса кожи всех участков, особенно головы и живота. При этом наибольшие изменения указанного показателя отмечаются со стороны базальных клеток кожи всех участков локализации на 5-е сутки после окончания воздействия микроволн. Так, в указанный срок после окончания действия СВЧ-волн, содержание цитоплазматической РНК максимально снижено в базалиоцитах кожи головы и живота - на 27,6% и 39,3% от уровня контроля, соответственно (р<0,05). Начиная с 10-х суток наблюдается повышение содержания цитоплазматической РНК в базалиоцитах кожи всех участков локализации. На 25-е сутки после окончания воздействия микроволн в базалиоцитах кожи головы и живота содержание цитоплазматической РНК достигает уровня контроля, а в коже спины лишь незначительно ниже исходного. На 60-е сутки после окончания действия СВЧ-волн содержания РНК в цитоплазме базалиоцитов кожи живота и спины близко к исходному, лишь в коже головы оно несколько ниже.
Результаты проведенного исследования свидетельствуют о том, что изменение цитоплазматической РНК может быть использовано как показатель функциональной активности базалиоцитов кожи различных областей локализации для оценки действия экстремального фактора внешней среды электромагнитной природы - микроволн термогенной интенсивности.