Целью настоящей работы является изучение морфологических особенностей мононуклеарных клеток (МНК) селезенки, инкубированных в культурах с ИЛ-2.
Популяцию МНК выделяли из клеток селезенки с помощью центрифугирования в Percoll-градиенте. Клетки отбирали, отмывали в растворе Хенкса и ресуспендировали в 40% Перколле с добавлением среды RPMI 1640. Затем суспензию клеток осторожно наслаивали на 70% Перколл и центрифугировали 20 мин при 750 +g. МНК отбирали из интерфазы. Клетки отмывали 2 раза PBS и ресуспендировали в среде RPMI 1640 с добавлением 10% сыворотки эмбрионов телят, глютамина, гентамицина. Затем доводили концентрацию клеток до 1х106 в 1 мл взвеси, добавляли ИЛ-2 (Prolenkine, фирмы Chiron, Голландия) в концентрации 10 тысяч МЕ/мл и инкубировали при 370 и 45% СО2 в течение 48-72 часов.
Мазки готовили из взвеси МНК через 72 часа после начала инкубации, фиксировали метиловым спиртом и окрашивали азур-эозином и метиловым зеленым - пиронином по Браше на РНК с контрольной обработкой препаратов РНК-азой.
Изучение морфологических особенностей клеток в мазках взвеси активированных ИЛ-2 МНК селезенки показало, что они представляют собой клетки лимфоидного ряда различной степени зрелости. Из них 8,0±1,2% составляли бластные клетки, 9,5±0,6% - пролимфоциты и 82,5±4,8% - пиронинофильные лимфоциты.
Цитоплазма всех клеток была резко базофильна при окраске азур-эозином и обладала яркой пиронинофилией при окраске по Браше. У бластных клеток и пролифоцитов в ядрах выявлялись крупные пиронинофильные ядрышки.
Данные показатели свидетельствовали о повышенном содержании РНК в ядрышках и цитоплазме, а следовательно, о высоком уровне синтетических процессов в активированных ИЛ-2 МНК селезенки, включающих довольной большой процент молодых клеточных форм.