Проблема обморожений является актуальной в травматологии и ортопедии. Одно из центральных звеньев в патогенезе холодовой травмы занимает поражение печени. Поэтому представляет интерес изучить изменение ферментативной активности в печени при обморожениях на примере одного из ключевых ферментов гликолиза, дактатдегидрогеназы.
Цель исследования: Определить активность лактатдегидрогеназы в митохондриях печени у крыс на 3 сутки после холодовой травмы.
Материал и методы: Эксперименты были проведены на 25 белых линейных крысах линии Вистар массой 160-180 г. Под эфирным наркозом животным эпилирована задняя лапа до тазобедренного сустава, затем контактным путем нанесена холодовая травма с помощью сухого льда (твердой углекислоты с температурой -63оС) циркулярно до границы верхней трети бедра. На 3 сутки подострого эксперимента животные забивались путем декапитации. Митохондрии получали путем дифференциального центрифугирования в градиенте плотности сахарозы (Финдлей, Эванз, 1990). Активность лактатдегидрогеназы определяли по Кочетову (1980). Концентрацию белка определяли по методу Лоури в модификации (Dawson et al., 1984). Результаты исследований обрабатывали с использованием t-критерия Стьюдента с помощью программы BIOSTAT (Гланц, 1998).
Результаты: Полученные результаты показали, что при холодовой травме происходит достоверное увеличение активности лактатдегидрогеназы в прямой реакции в 2 раза. Активность ЛДГпр крыс с обморожением составила 100,95+2,32 нмоль НАДН/мин*мг белка, активность ЛДГ пр интактных крыс равна 58,62+2,41. При этом под воздействием холодовой травмы не наблюдалось достоверного увеличения активности лактатдегидрогеназы в обратной реакции. Активность ЛДГобр крыс с обморожением равна 304,72+23,34 нмоль НАДН/мин*мг белка, активность ЛДГ в обратной реакции интактных крыс - соответственно 238,07+12,08 нмоль НАДН/мин*мг белка. Достоверное увеличение активности лактатдегидрогеназы в прямой реакции, при незначительном увеличении активности ЛДГ в обратной реакции приводит к увеличению количества пировиноградной кислоты, что свидетельствует об ингибировании процессов анаэробного гликолиза. Активированию прямой лактатдегидрогеназной реакции способствует сдвиг соотношения окисленных и восстановленных форм НАД в сторону преобладания первых.
Заключение: Таким образом, изменение активности лактатдегидрогеназы митохондрий печени под воздействием холодового фактора может привести к нарушению течения гликолиза и многих сопряженных с ним реакций обмена веществ.