Производные гидразина опасны при любом пути поступления в организм, обладают способностью вызывать отдаленные и специфические эффекты. Ранее проведенными нами исследованиями было показано, что однократное введение несимметричного диметилгидразина (НДМГ) индуцирует различные по степени выраженности и пролонгированности нарушения в организме растущих животных.
В настоящее время в медико-биологических исследованиях используется метод клиновидной дегидратации. В основу метода положено явление дегидратационной самоорганизации структур в высыхающих каплях многокомпонентных жидкостей. Высушенная капля имеет вид пленки (фации). В процессе формирования фации специфические структуры данных молекул формируют структуры, доступные для визуального анализа. Метод клиновидной дегидратации дает информацию о состоянии организма: патологический процесс меняет физико-химические свойства биожидкости, что в свою очередь определяет изменения фаций (Шабалин В.Н., Шатохина С.Н. , 2001; 2002).
Целью нашего исследования явилось изучение тезиограмм плазмы крови крыс - отъемышей самцов и самок через 3 часа, 24 часа и 48 часов после однократного внутрибрюшинного введения НДМГ в дозе 5 мг/кг.
Материалы и методы
В качестве объекта исследования служила плазма крови крыс контрольной и опытных групп. Эксперимент проводился на 40 белых крысах обоего пола (20♀ и 20♂), разделенных на 8 групп. Группа №1 (n=5) - интактные животные - отъемыши - самки, группа №2 (n=5) - интактные животные - отъемыши - самцы. Группа №3 (n=5) - отъемыши - самки через 3 часа после введения НДМГ; группа №4 (n=5) - отъемыши - самки через 24 часа после введения НДМГ; группа №5 (n=5) - отъемыши - самки через 48 часов после введения НДМГ. Группа №6 (n=5) - отъемыши - самцы через 3 часа после введения НДМГ; группа №7 (n=5) - отъемыши - самцы через 24 часа после введения НДМГ; группа №8 (n=5) - отъемыши - самцы через 48 часов после введения НДМГ. Тезиограммы плазмы крови определяли по методу клиновидной дегидратации плазмы крови (Шабалин В.Н., Шатохина С.Н. , 2001; 2002).
Результаты и обсуждение
Тезиограммы интактных отъемышей самок и самцов характеризуются высокой симметричностью (равнорадиальным растрескиванием), трехзональностью, высоким содержанием конкреций и густотой растрескивания фации.
Во всех тезиограммах отъемышей самок через 3 часа после однократного введения НДМГ наблюдается формирование трех зон (краевой, промежуточной и центральной). Для 50% тезиограмм характерен равнорадиальный тип растрескивания, когда все радиусы примерно одной длины (рис. 1).
Рис. 1. Первый тип тезиограмм отъемышей самок через 3 часа после введения НДМГ
Рис. 2. Второй тип тезиограмм отъемышей самок через 3 часа после введения НДМГ
Для остальных 50% тезиограмм характерен разнорадиальный тип растрескивания, когда в сформировавшихся фациях условно выделяют малый и большой радиусы растрескивания (рис. 2).
Все тезиограммы имеют четкую краевую очерченность, очень высокую густоту растрескивания и высокий порядок ветвления. В тезиограммах с равнорадиальным растрескиванием в центральной зоне отмечены небольшие участки с хаотичным растрескиванием. Так же, все тезиограммы характеризуются низким содержанием конкреций мелких размеров без атипичных форм.
Тезиограммы плазмы крови отъемышей самцов через 3 часа после однократного введения НДМГ характеризуются трехзональным строением. Преобладающим типом (75%) является разнорадиальный тип растрескивания. 66% тезиограмм из 75% с разнорадиальным строением имеют очень высокую густоту растрескивания (мелкосетчатое растрескивание) и очень высокое количество конкреций (рис. 3).
Рис. 3. Типичная тезиограмма отъемышей самцов через 3 часа после введения НДМГ
В 9% из 75% встречаются тезиограммы разнорадиального растрескивания со средней густотой растрескивания и средним содержанием конкреций. Равнорадиальное растрескивание встречается в 25% фаций и характеризуется средней густотой растрескивания и средним содержанием конкреций. В тезиограммах формируются конкреции мелких размеров, а в 25% фаций встречаются конкреции атипичных форм и размеров (рис. 4).
Тезиограммы плазмы крови отъемышей самок через 24 часа после однократного введения НДМГ имеют однотипное строение: трехзональное строение фаций; четкая краевая очерченность; очень высокий порядок ветвления; очень высокое количество мелких конкреций.
Рис. 4. Подсистемные нарушения в виде атипичных конкреций в тезиограммах отъемышей - самцов через 3 часа после введения НДМГ
Для большинства (60%) тезиограмм характерен разнорадиальный тип растрескивания (рис. 5).
Рис. 5. Типичная тезиограмма отъемышей самок через 24 часа после введения НДМГ
Для 40% тезиограмм характерно равнорадиальное растрескивание. Хаотичное растрескивание центральной зоны наблюдается в 60% тезиограмм. И для 20% тезиограмм характерно формирование конкреций атипичных форм и размеров (рис. 6). Тезиограммы плазмы крови отъемышей самцов через 24 часа после однократного введения НДМГ имеют однотипное строение: трехзональное строение, четкую краевую очерченность, аморфные области в центральной зоне, мелкие конкреции атипичных форм и размеров (рис. 7).
Рис. 6. Хаотичное растрескивание центральной зоны тезиограмм отъемышей самок через 24 часа после введения НДМГ с формированием конкреций атипичных форм и размеров.
Рис. 7. Тезиограмма отъемышей самцов через 24 часа после введения НДМГ
Тезиограммы плазмы крови отъемышей самок через 48 часов после введения НДМГ сохраняют трехзональную структуру, четкую краевую очерченность. В 66% тезиограмм центральная зона имеет хаотичное растрескивание, а сама фация характеризуется очень высокой густотой растрескивания, очень высоким порядком ветвления и формированием очень высокого числа атипичных конкреций (рис. 8). Для 34% тезиограмм с равнорадиальным строением характерна средняя густота растрескивания, низкий порядок ветвления с низким числом мелких конкреций.
Рис. 8. Тезиограмма отъемышей самок через 48 часов после введения НДМГ
Тезиограммы плазмы крови отъемышей самцов через 48 часов после однократного введения НДМГ характеризуются: наличием всех трех зон (краевой, промежуточной и центральной), четкой краевой очерченностью, очень высокой густотой растрескивания и очень высоким порядком ветвления, атипичными конкрециями в очень высоком количестве. Для 66% характерен разнорадиальный тип растрескивания, в 34% тезиограмм центральная зона хаотична.
Анализ морфотипов тезиограмм показал, что начальные системные (смена равнорадиального типа растрескивания на разнорадиальный) и подсистемные нарушения (формирование атипичных форм конкреций) можно зафиксировать методом клиновидной дегидратации уже спустя 3 часа после введения НДМГ в организм крыс отъемышей. Причем более существенны нарушения в структуре тезиограмм отъемышей самцов, так как здесь наблюдаются не только системные, но и первые этапы развития и подсистемных нарушений. Отличия в морфотипах тезиограмм отъемышей самок и самцов хорошо прослеживаются и спустя 24 часа после введения НДМГ. В этом случае более выражены структурные нарушения фаций отъемышей самцов, чем отъемышей самок, так как у них наблюдается полная утрата равнорадиального, и разнорадиального типов растрескивания, которые встречаются в фациях контрольных животных, а так же в тезиограммах плазмы крови отъемышей самок и самцов спустя 3 часа после введения НДМГ. Через 24 часа после введения НДМГ в тезиограммах отъемышей -самцов наблюдаются обширные аморфные области в центральных зонах фаций, а также атипичные конкреции, относящиеся к подсистемным нарушения, которые в тезиограммах отъемышей - самцов встречаются гораздо чаще, чем в тезиограммах отъемышей - самок в такой же срок эксперимента.
В целом, в тезиограммах, полученных через 24 часа после введения НДМГ, можно проследить усиление степени метаболических нарушений по сравнению с тезиограммами, полученными через 3 часа после введения НДМГ. Степень нарушений через 24 часа после введения НДМГ опять более высока у отъемышей самцов, чем отъемышей самок. Изменения морфотипов тезиограмм плазмы крови животных через 48 часов после введения НДМГ менее выражены по сравнению с таковыми, через 3 и 24 часа после введения токсиканта. По всей вероятности, это связано с функционированием системы детоксикации.
Таким образом, первоначальные метаболические нарушения прослеживаются в морфотипах тезиограмм спустя 3 часа после интоксикации НДМГ. Максимальное нарушение структурообразующих свойств плазмы крови отъемышей было зафиксировано через 24 часа после введения НДМГ и было более выражено у самцов - отъемышей.