Научный журнал
Фундаментальные исследования
ISSN 1812-7339
"Перечень" ВАК
ИФ РИНЦ = 1,087

АССОЦИАЦИИ НLA-АНТИГЕНОВ С РАЗЛИЧНЫМИ ВАРИАНТАМИ ТЕЧЕНИЯ ХРОНИЧЕСКОГО ГЕПАТИТА С

Донцов Д.В. 1 Романова Е.Б. 1 Амбалов Ю.М. 1
1 ГОУ ВПО «Ростовский государственный медицинский университет», Ростов-на-Дону
Изучен характер распределения НLА-антигенов среди 94 больных хроническим гепатитом С в сопоставлении с региональным контролем – лицами русской национальности (400 человек), являющимися представителями коренного населения Ростова-на-Дону. Установлено, что генетическая предрасположенность к НСV-инфекции ассоциируется с наличием в фенотипе HLA антигенов АI0, В12, ВЗ5, Cwl, Cw5, а также их сочетаний в фено- и гаплотипах (ВЗ5/В7; ВЗ5/В12; А1В5; А2В7; А2,В12; А2,ВЗ5). Иммуногенетическими маркерами риска развития цирроза печени являются HLA-B7, В27 и Cwl.
хронический гепатит С
HLA-антигены
способ прогноза
1. Арямкина О.Л. Прогнозирование течения и исходов хронических гепатитов: автореф. дис. ... д-ра мед. наук. – Ульяновск, 2006.
2. Никитин И.Г. Клиника, диагностика и этиопатогенетическое лечение хронического НСV-гепатита: автореф. дис. ... д-ра мед. наук. – М., 2000.
3. Майер К.П. Гепатит и последствия гепатита. – М., 2004.
4. Моисеев С.В. Лечение хронического гепатита С: результаты рандомизированных контролируемых исследований // Инфекционные болезни. – 2010. – Т. 8, № 3. – С. 52–57.
5. Попов Е.А., Левитан Б.Н., Алексеев Л.П. и др. // Тер. арх. – 2005. – №2. – С. 54.
6. Соринсон С.Н. Вирусные гепатиты. – СПб., 1998.
7. Хронические гепатиты в Российской Федерации / И.В. Шахгильдян, А.А. Ясинский, М.И. Михайлов и др. // Эпидемиология и инфекционные болезни. – 2008. – № 6. – С. 12–15.
8. Шерлок Ш., Дули Дж. Заболевания печени и желчных путей. – М., 1999.
9. Aguilar R. J. et а1. // Hepato1ogy. – 2000. – Vо1. 32, №2. – Р. 129.
10. Svejgaard А., Ruder L.Р. // Tissue Antigens. – 1994. – Vо1. 43. – Р. 18–27.

Хронический гепатит С (ХГС) занимает одно из ведущих мест в структуре инфекционной патологии и представляет собой одну из наиболее важных проблем здравоохранения во всем мире, что связано с широким распространением этого заболевания и высоким риском развития неблагоприятных исходов - цирроза печени и гепатоцеллюлярной карциномы [3, 4, 6, 7, 8].

Активное изучение механизмов прогрессирования хронической НСV-инфекции позволило разработать ряд критериев неблагоприятного течения заболевания с быстрым темпом фиброзирования печени [1, 2]. К наиболее важным из них относят пол, возраст пациента в момент инфицирования, избыточную массу тела, алкоголизм, исходную стадию фиброза, наличие жировой дистрофии гепатоцитов и др. Однако в большинстве работ не дана оценка прогностической значимости корреляций между различными вариантами естественного течения ХГС и указанными факторами.

Недостаточно ясным остается вопрос о роли генетической предрасположенности, в частности НLА-фенотипа, в развитии неблагоприятных исходов хронической НСV-инфекции. Данные литературы, касающиеся взаимосвязи ХГС и его различных вариантов течения с системой HLA, малочисленны и довольно противоречивы [5, 9, 10]. Вместе с тем установление НLА-ассоциаций с темпом прогрессирования заболевания может стать реальной основой для разработки достоверных и высокоинформативных способов прогноза неблагоприятного течения ХГС.

Цель исследования - изучить характер распределения антигенов НLA-системы у больных ХГС для определения иммуногенетической предрасположенности различных вариантов течения хронической НСV-инфекции и оптимизации индивидуального прогноза риска развития неблагоприятной формы заболевания.

Материал и методы исследования

У 94 пациентов с хронической НСV-инфекцией проведено НLА-типирование антигенов сублокусов А, В и С стандартным двухступенчатым микролимфоцитотоксическим методом (Terasasaki Р., McClelland, 1964) с использованием 112 типирующих сывороток, идентифицирующих 23 антигена HLA сублокуса А, 29 антигенов HLA сублокуса В и 5 антигенов HLA сублокуса С (АО «Гисанс» НИИ гематологии и переливания крови, Санкт-Петербург). Контрольную группу составили 400 практически здоровых лиц русской национальности, являющихся представителями коренного населения г. Ростова-на-Дону.

Верификация диагноза осуществлялась с использованием стандартных диагностических методов (раздельная индикация анти-НСV-IgG, качественное определение в крови РНК НСV с помощью полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией, пункционная биопсия печени).

Для определения иммуногенетических параметров применяли программу Immunogenetik VО 5.04.89 V.F.Р. IКI SB AМS (Новосибирск). Оценку достоверности различий между частотой выявления антигенов НLA-системы у больных ХГС и в здоровой популяции проводили с помощью критерия х2. Для определения силы ассоциации между изучаемыми иммуногенетическими признаками и НСV-инфекцией использовали критерий относительного риска (RR). При значениях показателей RR больше 1 мы определяли атрибутивный риск или этиологическую фракцию (EF), которую вычисляли по формуле:

EF = RR - RR∙F,

где ЕF - этиологическая фракция; RR - показатель относительного риска; F - частота встречаемости антигена HLA у обследованного контингента больных.

Если величина RR была меньше 1, проводили расчет превентивной фракции (РЕ) по формуле:

PF = (1 - RR)∙F/(1 - F)∙RR + F,

где РF - превентивная фракция; RR - показатель относительного риска; F - частота встречаемости антигена НLA у обследованного контингента больных.

Результаты исследования и их обсуждение

Наиболее часто в здоровой популяции г. Ростова-на-Дону встречались НLА-антигены Аl (23,4 %), А2 (49,3 %), А3 (24 %), А9 (22 %), А19 (22,7 %), В7 (21,3 %), В35 (20 %), Cw2 (30,7 %) и Cw4 (42,8 %), значительно реже - А28 (8 %), В14 (6,7 %), В17 (8 %), В22 (3,4 %) и Cw6 (3,4 %) (табл. 1).

Как видно из табл. 1, у больных ХГС достоверно чаще, чем в здоровой популяции, встречались НLА-антигены Cw1, Cw5, а также фенотип В35/В12.

Иной характер распределения имели HLA-антигены А19, В8, В15, Cw2, а также фенотипы А9/А10 и В35/В12, которые достоверно реже регистрировались у обследованных нами пациентов, чем в группе здоровых лиц.

В нашем исследовании у больных ХГС наиболее значимые ассоциативные связи выявлены с HLA-антигенами А10 (RR = 1,5, ЕF = 7,7), В12 (RR = 1,3, ЕF = 4,1), B27 (RR = 1,3, ЕF = 1,7), В35 (RR = 1,3, ЕF = 5,0), Cwl (RR = 2,2, ЕF = 10,9), Cw5 (RR = 2,4, ЕF = 16,4), Cw6 (RR = 1,8, ЕF = 2,5) и фенотипами В35/В7 (RR = 11,4, ЕF = 1,8), В35/В12 (RR = 28,9, ЕF = 4,7), Cwl/Cw4 (RR = 8,2, ЕF = 1,7), Cwl/Cw6 (RR = 2,8, ЕF = 3,7). При этом следует отметить, что наибольшие значения этиологической фракции регистрировались у «носителей» антигенов АI0, В12, В35, Cwl и Cw5.

При изучении распределения НLА-гаплотипов у больных ХГС в сравнении со здоровой популяцией также были обнаружены достоверные различия (табл. 2).

Установлено, что у больных ХГС с наибольшей частотой встречались гаплотипы Аl, В5 (10,9 %, х2 = 6,6), А2, В7 (20 %, х2 = 36,2), А2,В12 (27,3 %, х2 = 7,3), А2, ВI6 (16,4 %, х2 = 2,3) и А2, В35 (16,4 %, х2 = 10,4). Достоверное повышение частоты встречаемости выявлено и в отношении гаплотипа А10, В5 (7,3 % у больных ХГС против 2 % в группе здоровых лиц, х2 = 3,1).

Таблица 1

Частота выявления НLA-антигенов и их фенотипов у больных ХГС в сравнении
с популяционным распределением антигенных специфичностей

HLA-антигены

Фенотипическая частота, %

RR

ER

PF

больные хгс

(n = 94)

здоровые лица

(n = 400)

Аl

20,4

23,4

0,8

 

0,8

А2

45,6

49,3

0,9

 

0,9

А3

18,4

24,0

0,7

 

0,8

А9

13,6

22,0

0,6

 

0,9

АI0

24,3

18,0

1,5

7,7

 

Аl1

8,7

11,3

0,8

 

0,7

А19

5,6

22,7*

0,2

 

0,8

А28

5,8

8,0

0,7

 

0,6

Аl/А2

11,3

18,0

0,6

 

0,8

А2/А28

7,0

9,0

0,8

 

0,6

А9/АI0

8,5

22,0*

0,3

 

0,9

В5

8,7

15,3

0,5

 

0,8

В7

18,4

21,3

0,8

 

0,8

В8

5,8

13,3*

0,4

 

0,8

В12

19,4

16,0

1,3

4,1

 

В13

6,8

10,1

0,7

 

0,7

В14

1,9

6,7

0,3

 

0,6

В15

3,9

12,0*

0,3

 

0,7

В16

14,6

8,7

1,1

0,8

 

В17

8,7

8,0

1,3

0,8

 

В18

7,8

10,0

0,5

 

0,8

В21

1,9

5,3

0,8

 

0,2

В22

2,9

3,4

0,4

 

0,6

В27

7,8

7,3

1,3

1,7

 

В35

24,0

20,0

1,3

5,0

 

В40

12,6

12,0

1,1

0,7

 

В35/В7

1,9

0,2

11,4

1,8

 

В35/В12

4,9*

0,2

28,9

4,7

 

В16/В12

2,9

2,7

1,1

0,2

 

Cwl

19,4*

9,5

2,2

10,9

 

Cw2

9,7

30,7*

0,2

 

0,9

Cw3

19,2

18,6

0,2

 

0,9

Cw4

42,0

42,8

0,9

 

0,6

Cw5

28,1*

14,1

2,4

16,4

 

Cw6

5,8

3,4

1,8

2,5

 

Cwl/Cw4

1,9

0,2

8,2

1,7

 

Cwl/Cw6

1,9

0,7

2,8

3,7

 

Примечание. * - различия достоверны при сравнении группы больных ХГС со здоровой популяцией (р < 0,05).

Таблица 2

Распределение НLA-гаплотипов у больных ХГС и здоровых лиц

НLА-гаплотипы

Частота выявления, %

RR

х2

больные ХГС

(n = 94)

здоровые лица

(n = 400)

А1, В5

10,9

3,7

3,2

6,6

А1, В12

9,1

3,7

2,6

0,08

А2, В7

20,0

12,7

1,8

36,2

А2, В12

27,3

11,5

2,3

7,3

А2, В16

16,4

3,5

5,4

2,3

А2, В18

7,3

2,0

3,8

1,9

А2, В35

16,4

9,5

1,9

10,4

А9, В16

9,1

3,0

3,2

0,5

А10, В5

7,3

2,0

3,8

3,1

А10, В12

9,1

2,5

3,9

0,5

А11, В12

9,1

2,2

4,5

1,0

А28, В12

7,3

0,8

9,3

0,3

Важно отметить, что показатели превентивной фракции исследованных иммуногенетических маркеров не достигали значимого уровня, т.е. оказались меньше 1.

Таким образом, выявленные нами ассоциативные связи НLА-антигенов с хронической НСV-инфекцией свидетельствуют об иммуногенетической детерминированности данного заболевания. К числу факторов, определяющих предрасположенность к данному заболеванию, следует отнести наличие в фенотипе HLA АI0, В12, В35, Cwl, Cw5, а также их сочетаний в фено- и гаплотипах (В35/В7; В35/В12; Аl,В5; А2, В7; А2, В12; А2, В16; А2, В35; А10В5 и А28, В12). В то же время в нашем исследовании не удалось выявить антигенов НLА-системы, являющихся маркерами устойчивости к НСV-инфекции.

Для выяснения роли генетических факторов в механизмах фиброзирования печени при ХГС нами проведен сравнительный анализ иммуногенетических показателей в двух группах больных. В 1-ю группу включили 61 пациента с клинически незначимым фиброзом (F0, F1), во 2-ю группу - 25 пациентов с выраженными фибротическими изменениями в печени (F3, F4).

Исследования показали, что у пациентов с отсутствием фиброза и слабым фиброзом (табл. 3) достоверно чаще, чем в группе сравнения, встречается НLА-антиген А2 (соответственно 54,1 и 24 %; р < 0,05).

НLА-антиген Cw3 почти в 4 раза чаще регистрируется у больных ХГС с минимальной выраженностью фибротических изменений в печени, чем в группе больных циррозом печени (соответственно 26,2 и 4 %; р < 0,05).

Аналогичный характер распределения имел НLA-антиген Cw4, частота встречаемости которого также была достоверно выше у больных со слабовыраженным фиброзом, чем в группе больных циррозом печени (соответственно 47,5 и 12,0 %; р < 0,05). У последних отмечена и более высокая частота регистрации НLА-антигена Cw1 (20 против 4,9 % в группе сравнения; р < 0,05).

В результате проведенных исследований установлена взаимосвязь ряда лейкоцитарных антигенов НLА-системы с выраженностью фибротических изменений в печени у больных хронической HCV-инфекцией. Так, наибольший риск развития цирроза печени ассоциирован с наличием в HLA-фенотипе антигенов В7 (RR = 2,1, ЕF = 9,6), В27 (RR = 1,8, ЕF = 5,2) и Cw1 (RR = 2,4, ЕF = 11,7). Полученные результаты свидетельствуют о генетической детерминированности такого исхода ХГС.

Как видно из приведенных в табл. 3 данных, НLА-антиген А10 определяет генетическую предрасположенность к НСV-инфекции и его присутствие в НLА-фенотипе в значительно меньшей мере влияет на интенсивность фиброзирования печени при этом заболевании. Об этом свидетельствуют довольно высокие значения показателя ЕF как в группе больных с минимальной выраженностью фиброза, так и у пациентов с тяжелым фиброзом и циррозом печени (соответственно 4,1 и 2,6).

Наличие в фенотипе HLA антигенов В12, Cw5 и Cw6 также следует рассматривать как фактор предрасположенности к НCV-инфекции. Что касается этих антигенных специфичностей, то убедительных доказательств их участия в фиброгенезе печени при ХГС не получено.

Обращает на себя внимание, что в нашем исследовании не удалось выявить статистически значимых ассоциаций НLА-антигенов у больных ХГС с устойчивостью к интенсивному фиброзированию печени при ХГС. По крайней мере показатели РF для всех исследованных нами антигенных специфичностей не превышали 1. Однако этот вывод нельзя считать окончательным в связи с малочисленностью группы больных циррозом печени.

Как отмечено выше, НLА-антиген А2 с наибольшей частотой регистрируется у больных ХГС с минимальной выраженностью фиброза. При этом показатель ЕF составил 9,5. Однако частота встречаемости этого антигена в общей группе больных ХГС по сравнению с таковой в здоровой популяции достоверно не различалась (р > 0,05). Кроме того, численность группы пациентов с минимальными фибротическими изменениями в печени была в 2 раза больше общего числа обследованных больных циррозом печени. Поэтому мы не склонны переоценивать значение антигена А2 как маркера благоприятного течения НСV-инфекции.

Таблица 3

Распределение НLA-антигенов (в %) у обследованного контингента больных
в зависимости от выраженности фиброза

НLA-антигены

Здоровые

лица (n = 400)

Больные
с F0, F1

RR

EF

PR

Больные
с F3, F4

RR

EF

PF

А1

23,4

14,8

0,6

 

0,9

20,0

0,8

 

0,8

А2

49,3

54,1

1,2

9,5

 

24,0

0,3

 

0,9

А3

24,0

21,3

0,9

 

0,8

8,0

0,3

 

0,9

А9

22,0

16,4

0,7

 

0,8

20,0

0,9

 

0,7

А10

18,0

18,0

1,2

4,1

 

20,0

1,2

2,6

 

А11

11,3

9,8

0,9

 

0,6

0

 

 

 

А19

22,7

0

 

 

 

0

 

 

 

А28

8,0

9,8

1,3

2,0

 

0

 

 

 

В5

15,3

0

 

 

 

0

 

 

 

В7

21,3

14,8

0,6

 

0,8

28,8

2,1

9,6

 

В8

13,3

9,8

0,7

 

0,7

8,0

0,8

 

0,6

В12

16,0

18,0

1,2

2,4

 

28,8

2,1

15,3

 

В13

10,1

9,8

0,9

 

0,2

8,0

0,8

 

0,6

В14

6,7

3,3

0,5

 

0,6

0

 

 

 

Вl5

12,0

4,9

0,4

 

0,8

0

 

 

 

В16

8,7

19,7

1,9

9,2

 

12,0

1,1

0,6

 

В17

8,0

4,9

0,6

 

0,7

0

 

 

 

В18

10,0

0

 

 

 

0

 

 

 

В21

5,3

3,3

0,6

 

0,6

0

 

 

 

В27

7,3

8,2

1,1

1,0

 

12,0

1,8

5,2

 

В35

20,0

24,6

1,3

5,8

 

12,0

0,6

 

0,8

В40

12,0

13,1

1,9

6,1

 

0

 

 

 

Cw1

9,5

4,9

0,5

 

0,7

20,0

2,4

11,7

 

Cw2

30,7

9,8

0,3

 

0,9

8,0

0,2

 

0,9

Cw3

18,6

26,2

1,6

9,4

 

4,0

0,2

 

0,8

Cw4

42,8

47,5

1,2

8,2

 

12,0

0,2

 

0,9

Cw5

14,1

22,9

1,8

10,3

 

40,0

4,1

30,2

 

Cw6

3,4

6,6

2,0

3,3

 

12,0

3,9

8,9

 

При изучении особенностей распределения лейкоцитарных антигенов у больных ХГС с минимальной выраженностью фиброза наиболее значимые ассоциации были обнаружены с НLА-антигенами А28 (RR = 1,3, ЕF = 2,0), В35 (RR = 1,3, ЕF = 5,8), В40 (RR = 1,9, ЕF = 6,1), Cw3 (RR = 1,6, ЕF = 9,4) и Cw4 (RR = 1,2, ЕF = 8,2). Возможно, указанные НLА-антигены осуществляют генетический контроль механизмов фиброзирования печени и могут быть отнесены к числу факторов, определяющих относительно благоприятное течение заболевания.

Таким образом, полученные данные свидетельствуют об иммуногенетической детерминированности различных вариантов течения хронической НСV-инфекции и ее исходов. При этом присутствие в фенотипе отдельных антигенов может существенно повысить риск быстрого фиброгенеза с развитием цирроза печени. С другими же антигенами НLA-системы ассоциируется относительно медленное прогрессирование заболевания и более благоприятный прогноз.

Выявленные ассоциации НLA-антигенов с различной выраженностью фиброза печени могут быть использованы для разработки способов прогноза направленности течения ХГС.

Рецензенты:

Ермолова Н.В., д.м.н., с.н.с. ФГУ «Ростовского НИИ акушерства и педиатрии» Минздравсоцразвития, г. Ростов-на-Дону;

Яговкин Э.А., д.м.н., с.н.с., зам. директора Ростовского НИИ микробиологии и паразитологии Роспотребнадзора, г. Ростов-на-Дону.

Работа поступила в редакцию 26.05.2011.


Библиографическая ссылка

Донцов Д.В., Романова Е.Б., Амбалов Ю.М. АССОЦИАЦИИ НLA-АНТИГЕНОВ С РАЗЛИЧНЫМИ ВАРИАНТАМИ ТЕЧЕНИЯ ХРОНИЧЕСКОГО ГЕПАТИТА С // Фундаментальные исследования. – 2011. – № 10-1. – С. 57-61;
URL: http://fundamental-research.ru/ru/article/view?id=28671 (дата обращения: 08.07.2020).

Предлагаем вашему вниманию журналы, издающиеся в издательстве «Академия Естествознания»
(Высокий импакт-фактор РИНЦ, тематика журналов охватывает все научные направления)

«Фундаментальные исследования» список ВАК ИФ РИНЦ = 1.074