Научный журнал

Фундаментальные исследования

ISSN 1812-7339

"Перечень" ВАК

ИФ РИНЦ = 1,674

• Авторы
• Резюме
• Файлы
• Ключевые слова

Камилов Ф.Х., Тимирханова Г.А., Самородов А.В., Клен Е.Э., Макарова Н.Н., Халиуллин Ф.А.

Исследована антиагрегационная и антикоагуляционная активность 8 впервые синтезированных азотсодержащих гетероциклических производных. Установлено различное влияние данных соединений на систему гемостаза. Найдены активные соединения, что доказывает перспективность дальнейших исследований среди производных данных рядов.

Статья в формате PDF

360 KB

тромбоциты

антиагрегационная активность

дезагрегационная активность

антикоагуляционная активность

азотсодержащие гетероциклические производные

Нарушения системы гемостаза занимают важное место в общей патологии человека. Это определяется высокой частотой, разнообразием и потенциально высокой опасностью тромбогеморрагических заболеваний и синдромов. Изменения гемостаза являются существенным звеном патогенеза многих состояний [1], зачастую замыкают порочный круг, усугубляющий течение и исход основной болезни. По данным [7], именно тромбоз в различных его проявлениях занимает второе место среди непосредственных причин смертности и летальности онкологических больных.

В этой связи, весьма актуален поиск новых средств, способных в лечебных и профилактических целях корректировать систему гемостаза. С одной стороны, это обусловлено повсеместным ростом заболеваемости, с другой - недостаточной эффективностью или высокой токсичностью применяемых в настоящее время препаратов.

Цель: оценить влияние на сосудисто-тромбоцитарное и плазменное звенья гемостаза 8 производных ксантина, триазола, тиетана и бензимидазола, впервые синтезированных на кафедре фармацевтической химии Башкирского государственного медицинского университета [2, 3].

Методы исследования

Исследование влияния на функциональную активность тромбоцитов проводили in vitro по методу Born на агрегометре «Thromlite-1006A» на донорской крови человека [6]. Метод основан на регистрации изменения оптической плотности богатой тромбоцитами плазмы до и после введения индуктора агрегации тромбоцитов. В качестве индуктора агрегации использовали аденозиндифосфат (АДФ) в концентрации 20 мкг/мл, производства «Технология-Стандарт», г. Барнаул (рис. 1а). Определение активности исследуемых производных проводили в концентрации 2×10-3 М/л. При анализе агрегатограмм обращали внимание на спонтанную агрегацию тромбоцитов, вызванную введением исследуемого вещества в плазму, рассчитывали степень подавления или усиления агрегации под действием данных производных, изучали дезагрегационный эффект соединений [4].

Исследование антикоагуляционной активности проводили in vitro стандартными коагуляционными методами на турбометрическом гемокоагулометре Solar CGL 2110 на донорской крови человека. Проводилось определение активированного парциального тромбопластинового времени (АПТВ), протромбинового времени (ПВ) и концентрации фибриногена (по A. Clauss, 1957) [5]. Определение антикоагуляционной активности исследуемых производных проводили в конечной концентрации 10-3 г/мл.

Препараты сравнения: в качестве антиагреганта использовали «Трентал» (3,7-диметил-1-(5-оксогексил)ксантин, Aventis Pharma Ltd, Мумбай, Индия), в качестве антикоагулянта - «Гепарин натрия» (производства ОАО «Синтез», Россия). Определение влияния на функциональную активность тромбоцитов и плазменный компонент гемостаза проводили на 6 пробах крови разных доноров для каждого соединения. Данные показателей статистически обрабатывали с применением t-критерия Стьюдента.

Обсуждение результатов

Результаты исследования влияния на функциональную активность тромбоцитов представлены в табл. 1.

Таблица 1

Влияние азотсодержащих гетероциклических производных
на функциональную активность тромбоцитов

Примечание: данные достоверны (р < 0,05)

Из данных табл. 1 видно, что все синтезированные производные в этой концентрации проявляют антиагрегационную активность. Соединения Э и Н-14 при предварительной инкубации в обогащенной тромбоцитами плазме вызывали спонтанную агрегацию (рис. 1б). Следует отметить, что все производные при регистрации АДФ-индуцированной агрегации тромбоцитов, уступали препарату сравнения «Трентал» в эквимолярной концентрации.

Среди изученных производных соединение Л-355 проявляет дезагрегационную активность. При вводе соединения на высоте АДФ-индуцированной агрегации в течение 5 минут в среднем распадалось 10,6 % первоначально существующих тромбоцитарных агрегатов (рис. 2а). В данной концентрации дезагрегационного эффекта у «Трентала» не регистрировалось (рис. 2б).

Рис. 1

Рис. 2

Результаты исследования влияния соединений на плазменный компонент гемостаза представлены в табл. 2.

Таблица 2

Влияние азотсодержащих гетероциклических производных
на плазменный компонент гемостаза

Примечание: данные достоверны (р < 0,05).

Соединения показали различное влияние на плазменный компонент гемостаза, проявляющееся изменением показателя внутреннего пути свертывания крови - АПТВ. На показатели ПВ и концентрацию фибриногена значимого влияния большинства соединений не регистрировалось.

Соединение Н-140 значительно сокращало время образования сгустка по всем исследуемым параметрам, проявляя прокоагуляционную активность. Но при макроскопической оценке - в кювете коагулометра жидкая плазма с формированными нитями фибрина. Для оценки механико-физических характеристик данное соединение было исследовано методом тромбоэластографии на обедненной тромбоцитами плазме человека на аппарате TEG 5000 в конечной концентрации 10-3 г/мл. Результаты исследования представлены в табл. 3 и на рис. 3.

Таблица 3

Показатели тромбоэластограммы обедненной тромбоцитами плазмы в присутствии Н-140

В ходе исследования установлено, что время образования первых нитей фибрина и скорость роста фибриновой сети снижены, но при этом значительно увеличено время достижения фиксированного уровня прочности сгустка, а показатели коагуляционного индекса свидетельствуют о гипокоагуляции. Образовавшийся сгусток по механико-физическим характеристикам является неполноценным, с тенденцией к повышеному лизису, что может являться показателем нарушений энзиматической части коагуляционного каскада.

Рис. 3. Тромбоэластограмма соединения Н-140

Таким образом, в ходе исследования установлено различное влияние впервые синтезированных азотсодержащих гетероциклических производных на систему гемостаза, найдены активные соединения Н-140, Л-355, что показывает перспективность дальнейших исследований среди производных данного ряда.

Список литературы

1. Баркаган З.С. Геморрагические заболевания и синдромы. - 2-е изд., перераб. и доп. - М.: Медицина, 1988. - С. 8-35.
2. Клен Е.Э. 3,5-Дибром-1-(1,1-диоксотиетан-3-ил)-1,2,4-триазол - новый реагент для синтеза 3-замещенных тиетан-1,1-диоксидов / Ф.А. Халиуллин, Н.Н. Макарова // Журн. органич. химии. - 2008. - Т. 44, № 11. - С. 1729-1731.
3. Клен Е.Э. Гетероциклизация 3,5-дибром-1-(тииранил-2-метил)-1,2,4-триазола в 5-замещенные 2-бром-5,6-дигидротиазоло[3,2-b]-1,2,4-триазолы / Ф.А. Халиуллин // Журн. органич. химии. - 2009. - Т. 45, № 3. - С. 477-478.
4. Поляков А.Е. Метод исследования агрегационной функции тромбоцитов / В.А. Черняк // Лабораторное дело. - 1989. - №10. - С. 19-20.
5. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / под общ. ред. Р.У. Хабриева. - 2-е изд., перераб. и доп. - М.: Медицина, 2005. - С. 461-476.
6. Воrn G.V.R. Aggregation of blood platelets by adenosine diphosphate and its reversal // Nature. - 1962. - Vоl. 194 48З2. - Р. 924-929.
7. Khorana A.A., Francis C.W., Culakova E. et al. Thromboembolism is a leading cause of death in cancer patients receiving outpatient chemotherapy // J Thromb Haemost. - 2007. - №5. - Р. 632-634.

Рецензенты:

Фазлыев М.М., д.м.н., профессор, начальник госпиталя медико-санитарной части МВД по Республике Башкортостан, Уфа;

Никитина И.Л., д.м.н., профессор, директор филиала федерального государственного учреждения «Консультативно-методический центр лицензирования» Федеральной службы по надзору в сфере здравоохранения и социального развития по Республике Башкортостан, Уфа.

Библиографическая ссылка