Выявление ранней динамики экспрессии маркеров синцитиотрофобласта играет важную роль в установлении физиологических механизмов беременности и причин нарушений её развития или прерывания. Иммуногистохимические методы могут увеличить точность диагностики, последовательность и характер событий, происходящих на ранних стадиях имплантации и плацентации. Целью исследования было определение начала и динамики иммуногистохимической экспрессии некоторых маркеров синцитиотрофобласта при физиологической беременности на ранних сроках развития. Изучены образцы плацентарной ткани, полученные в ходе медицинских абортов от 5,5 до 10,5 недель беременности. Для уточнения срока гестации использовали данные результатов ультрасонографии матки с определением теменно-копчикового размера эмбриона до прерывания беременности. Средний возраст матерей составил 26,1 ± 1,3 лет, все пациентки были физически здоровы. Фрагменты плацентарной ткани фиксировали в 10 %-м нейтральном забуференном растворе формалина 24–48 часов и обрабатывали приёмами стандартной гистологической техники. После удаления парафина на тонких срезах выявлена экспрессия рецепторов к человеческому β-хорионическому гонадотропину – β-HCG; к рецепторам 3 типа фактора роста эндотелия сосудов – VEGFR-3 и плацентарной щелочной фосфатазе – PLAP. Гистохимический коэффициент был определён по обычной формуле. Только значения VEGFR-3 для гестационного возраста 7,5–10,5 недель имели нормальное распределение, значения других маркеров значительно отличаются от нормального распределения. Коэффициент линейной корреляции Пирсона PLAP с возрастом был равен r ± mr = 0,45 ± 0,15, непараметрический коэффициент ранговой корреляции Спирмена был также статистически значимым и имел более высокое значение rS = 0661 (р < 0,05). Предложена формула уравнения множественной регрессии PLAP с ранними сроками беременности. Экспрессия рецепторов β- HCG имеет небольшое статистически значимое снижение гистохимического коэффициента от 270,5 ± 39,6 на 5–7 неделе беременности до 265,0 ± 51,9 в 7,5–10,5 недель беременности. Авторы показали, что ранняя интенсивная продукция гормонов синцитиотрофобласта синхронизирована с началом васкуляризации ворсинок и ангиогенеза, формированием полноценной капиллярной сети. Проанализированные количественные значения плацентарных маркеров могут быть использованы в качестве диагностических критериев патологии при ранних сроках беременности.
Identification of early dynamics of syncytiotrophoblast markers expression is important in the determination of physiological mechanisms of pregnancy and identifying the cause of the violations of her development or miscarriage. Immunohistochemical methods can increase the accuracy of diagnosis of the sequence and nature of events occurring during the early stages of implantation and placentation. The aim of the study was to determine the beginning and early age dynamics of the immunohistochemical expression of some markers of syncytiotrophoblast in physiological pregnancy. We studied the placental tissue obtained during medical abortion on 5,5 to 10,5 weeks of gestation. To clarify gestation used with data on the results of ultrasonography of the uterus with the definition of embryonic parieto-coccygeal size before pregnancy termination. The average maternal age was 26,1 ± 1,3 years, all patients were physical health. Placental tissue fragments were fixed in 10 % neutral buffered formalin 24–48 h and were treated by standard histological techniques. After removal of the paraffin on thin sections revealed the expression of the receptor β-human chorionic gonadotropin hormone – β-HCGH; receptor 3 type of vascular endothelial growth factor – VEGFR-3 and placental alkaline phosphatase – PLAP. Histochemical score (HS) were determined by the usual formula. The values only VEGFR-3-for-gestational age 7,5–10,5 weeks had a normal distribution, the values of other markers were significantly different from normal distribution. The Pearson’s linear correlation coefficient of PLAP HS with age was r ± mr = 0,45 ± 0,15, nonparametric Spearman rank correlation was also statistically significant and higher rS = 0,661 (p < 0,05). The Formula of multiple regression equation of PLAP expression with early gestation is proposed. Expression of the receptor β-HCG has a small statistically significant reduction of HS from 270,5 ± 39,6 at 5–7 weeks of gestation to 265,0 ± 51,9 to 7,5–10,5 weeks gestation. The authors showed that, early intensive production of syncytiotrophoblast hormones synchronized with the beginning of villous vascularization and angiogenesis, the formation of a complete capillary network. The analyzed quantitative values of placental markers can be used as diagnostic criteria for pathological early pregnancy.
1. Беда Н.А. Плацентарная щелочная фосфатаза и острофазовые белки в иммунохимической оценке течения беременности и некоторой онкопатологии: дис. ... канд. мед. наук. – М., 2002. – С. 9–27.
2. Anteby E.Y., Natanson-Yaron S., Greenfield C., Goldman-Wohl D., Haimov-Kochman R., Holzer H., Yagel S. Human placental Hofbauer cells express sprouty proteins: a possible modulating mechanism of villous branching // Placenta. – 2005. – Vol. 26. – № 6. – P. 476–483.
3. Bates D.O. An unexpected tail of VEGF and PlGF in pre-eclampsia// Biochem. Soc. Trans. – 2011. – Vol. 39. – № 6. – P. 1576–1582.
4. Birch L., English C.A., O’donoghue To Barigye O., Fisk N.M., Kir J.T. Accurate and reliable quantitative circulating fruit and total DNA in plasma mother from 5 to 41 weeks of pregnancy // Clin. Chem. – 2005. – Vol. 51. – P. 312–320.
5. Burrows T.D., King A., Loke Y.W. Trophoblast migration during human placental implantation//Hum. Reprod. Update. – 1996. – Vol. 2. – № 4. – P. 307–321.
6. Demir R., Kayisli U.A., Seval Y., Celik-Ozenci C., Korgun E.T., Demir-Weusten A.Y., Huppertz B. Sequential expression of VEGF and its receptors in human placental villi during very early pregnancy: differences between placental vasculogenesis and angiogenesis// Placenta. – 2004. – Vol. 25. – № 6. – рр. 560–572.
7. Di Lorenzo G., Ceccarello M., Cecotti V., Ronfani L., Monasta L., Vecchi Brumatti L., Montico M., D‘Ottavio G. The first trimester maternal serum PIGF, free β-hCG and Papp-A, RR-13, uterine artery Doppler and maternal history for the prediction of pre-eclampsia // Placenta. – 2012. – Vol. 33. – № 6. – P. 495–501.
8. Goswami D., Tannetta D.S., Fuchisawa, Redman CW, Sargent I.L. Excessive discharge of microparticles syncitiotrophoblast is a sign of early onset pre-eclampsia, but not normal blood pressure intrauterine delay // Placenta. – 2006. – Vol. 27. – № 1. – P. 56–61.
9. Jaffe R., Jauniaux E., Hustin J. Maternal circulation in the first-trimester human placenta—myth or reality? // Am. J. Obstet. Gynecol. – 1997. – Vol. 176. – № 3. – P. 695–705.
10. Leung T.N., Zhang J., Lau T.C., Lo Y.M. Maternal plasma DNA of the fetus as a marker for premature delivery // The Lancet. – 1998. – Vol. 352. – P. 1904–1905.
11. Meekins J.W., Luckas M.J., Pijnenborg R., Mc. Fadyen I.R. Histological study of decidual spiral arteries and the presence of maternal erythrocytes in the intervillous space during the first trimester of normal human pregnancy // Placenta. –
1997. – Vol. 18. – P. 459–464.
12. Onwuameze I.C., Onwubere B.J., Ezeoke A.C. Serum heat-stable alkaline phosphatase activity in normal pregnancy // East. Afr. Med. J. – 1999. – Vol. 76. – № 6. – P. 341–343.
13. Andraweera P.H., Dekker G.A., Lawrence J.A. Roberts. Placental expression of VEGF mRNA in the family of adverse pregnancy outcomes // Placenta. – 2012. – Vol. 33. – № 6. – P. 467–472.
14. Sekizawa, Sugito Y., Iwasaki M., Watanabe, Jimbo M., S Hoshi et al. Cell-free fetal DNA increases in the blood plasma of pregnant women with an indomitable// Clin. Chem. – 2001. – Vol. 47. – P. 2164–2165
15. Zhong Yu, Ng M.C., Lo Y.U., Chan J., Johnson P.J. The presence of mitochondrial tRNA (Leu (CID)) to G 3243 mutations in DNA, extracted from serum and plasma of patients with type 2 diabetes // J. Clin. Pathol. – 2000. – Vol. 53. – P. 466–469.