Журнал Фундаментальные исследования 1812-7339 Общество с ограниченной ответственностью "Издательский Дом "Академия Естествознания" ART-30174 ИЗБИРАТЕЛЬНОЕ ДЕЙСТВИЕ БИНАЗЫ НА АПОПТОЗ СУБПОПУЛЯЦИЙ ЛЕЙКОЦИТОВ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА Миронов В.А. Mironov V.A. kazan.vlad@gmail.com Ширшиков Ф.В. Shirshikov F.V. srhk@ya.ru Калачёва Н.В. Kalacheva N.V. nvkalacheva@yandex.ru Черепнёв Г.В. Cherepnev G.V. rkb2_rt@mail.ru Казанский (Приволжский) федеральный университет Kazan (Volga region) State University Отдел лабораторной медицины Казанской государственной медицинской академии Department of Laboratory Medicine Kazan State Medical Academy 30 09 2012 9 53 59 This is an open-access article distributed under the terms of the CC BY 4.0 license. https://fundamental-research.ru/ru/article/view?id=30174

Изучено влияние двух различных концентраций (40 мкг/мл и 400 мкг/мл) биназы (РНКазы Bacillus intermedius) на развитие спонтанного и пероксид-индуцированного апоптоза в субпопуляциях лейкоцитов крови человека с помощью метода проточной лазерной цитофлуориметрии. Установлено, что биназа в концентрации 400 мкг/мл избирательно активирует спонтанный апоптоз моноцитов крови человека и не модифицирует апоптоз лимфоцитов и гранулоцитов в обеих исследованных концентрациях. В условиях оксидативного стресса, вызванного H2O2, биназа оказывает дифференцированное влияние на апоптоз моноцитов в зависимости от концентрации. В низкой концентрации она значительно увеличивает долю жизнеспособных моноцитов, обработанных пероксидом водорода. При концентрации 400 мкг/мл протекторный эффект биназы в отношении моноцитов исчезает. В то же время в концентрации 400 мкг/мл биназа меняет динамику Н2О2-индуцированного апоптоза, повышая долю моноцитов в стадии раннего апоптоза. При этом она достоверно не модифицирует Н2О2-индуцированный апоптоз гранулоцитов и лимфоцитов. Обнаружено сходство апоптозмодулирующего эффекта биназы в моноцитах крови человека и перитонеальных макрофагах крысы.

Influence of two various concentrations (40 μg/ml and 400 μg/ml) of binase (RNase Bacillus intermedius) on development spontaneous and peroxide-induced apoptosis in subpopulations of human blood leucocytes by means of a method flow laser cytofluorimetry is studied. It is positioned, that binase in concentration of 400 μg/ml are activated selectively by a spontaneous apoptosis of human blood monocytes and does not modify an apoptosis of lymphocytes and granulocytes in both investigated concentrations. In conditions oxidative-stress invoked H2O2, binase the differentiated impact on an apoptosis of monocytes depending on concentration makes. In low concentration it considerably enlarges a lobe of the viable monocytes treated by peroxide of hydrogen. At concentration of 400 μg/ml protection effect of binase concerning monocytes disappears. At the same time in concentration of 400 μg/ml of binase changes dynamics Н2О2-induced of an apoptosis, raising a lobe of monocytes in a stage of an early apoptosis. It thus authentically does not modify Н2О2-induced an apoptosis of granulocytes and lymphocytes. Resemblance apoptosis-modulatory effect of binase in human blood monocytes and rat peritoneal macrophages is revealed.

 биназа спонтанный и пероксид-индуцированный апоптоз апоптоз модулирующий эффект мононуклеарные фагоциты binase spontaneous and peroxide-induced apoptosis apoptosis-modulatory effect mononuclear phagocytes

1. Голубенко И. А., Балабан Н.П., Лещинская И.Б. Рибонуклеаза Bacillus intermedius 7P. Очистка хроматографией на фосфоцеллюлозе и некоторые характеристики гомогенного фермента. Биохимия. - 1979. - Т. 44. - С. 640-648.

2. Сравнительная цитотоксичность биназы по отношению к опухолевым и нормальным клеткам: ученые записки Казанского университетата / Э.А. Кабрера Фуентес, П.В. Зеленихин, А.И. Колпаков, К.Т. Прайсснер, О.Н. Ильинская. - 2010. - Т. 152. Кн. 3. - С. 143-148.

3. Калачева Н.В., Куриненко Б.М. Влияние рибонуклеаз и их модифицированных производных на функциональную активность перитонеальных макрофагов крысы // Биомедицинская химия. - 2005. - Т. 3. - С. 303-309.

4. Меньшиков В.В. Клиническая лабораторная аналитика. - М., 1999. - Т.2.

5. Debby G.B., Сess W.J., Oomens, P.T., Carlijn М.С. Evolution of a continuous quantification method of apoptosis and necrosis in tissue cultures. Cytotechnology. - 2004. - V. 46. - P. 139-150.

6. Frantz S., Kelly R.A. Role of TLR-2 in the Activation of Nuclear Factor κB by oxidative stress in Cardiac Myocytes. The Journal of Biological Chemistry. - 2001. - V. 276. - P. 5197-5203.

7. Huang J.M., Roberto M.L., Ragione, Nanez A., Simon M. Immunostimulatory activity of Bacillus spores. Immunol. Med. Microbiol. - 2008. - V. 53. - P. 195-203.

8. Joshi, S.G., Francis C.W., Silverman D.J. Nuclear factor κB protects against host cell apoptosis during Rickettsia rickettsii infection by inhibiting activation of apical and effector caspases and maintaining mitochondrial integrity. Infection and Immunity. - 2003. - V. 71. - рр. 4127-4136.

9. Michael V.L., Satish K.N. Intracellular TLR Signaling: A Structural Perspective on Human Disease. The Journal of Immunology. - 2006. - V. 177 (1). - P. 11-16.

10. Mower D.A., Peckhman D.W. Decreased membrane phospholipid packing and decreased cell size precede DNA cleavage in mature B cell apoptosis. J.Immunol. - 1994. - V. 152. - P. 4832-4842.