В современных условиях лекарственные средства используются не только для лечения и коррекции патологических состояний, но и практически здоровыми людьми с целью адаптации к изменяющимся условиям среды, улучшения качества жизни [1]. Примером может служить фармакологическое обеспечение спортсменов, людей экстремальных профессий (космонавты, альпинисты, шахтеры, личный состав военизированных формирований и т.д.), профилактика психоэмоциональных и физических нарушений при смене климатических и часовых поясов и т.д. [5].
Для оценки перенесенных физических и стрессовых нагрузок существует большое количество различных методик [4]. Однако ввиду индивидуальных особенностей организма животного в экспериментальных условиях не всегда представляется возможным адекватно оценить степень перегрузок, поэтому актуальной становится разработка новых методических подходов к изучению психоэмоционального и физического перенапряжения.
Цель работы
Цель данного исследования состояла в комплексной валидационной оценке нового методического подхода к изучению физического и психоэмоцинального перенапряжения в эксперименте.
Материалы и методы исследования
Исследование проводилось на 45 беспородных мышах-самцах, массой 20–25 граммов, разделенных на 2 группы. Первая группа – 30 интактных животных. Вторая группа – 15 мышей (группа негативного контроля), в течение 10 дней подвергалась физическим нагрузкам в тесте «принудительное плавание «до отказа» с модифицированной 20 %-й нагрузкой от массы тела животного. Интактные животные также подвергались принудительному плаванию с аналогичной нагрузкой группами по 10 мышей, с периодами отдыха. Плавание осуществлялось в цилиндре диаметром 10 см и высотой 30 см с водой температурой 15 °С (аверсивная среда). Время плавания фиксировалось. Для оценки психоэмоционального статуса использовали тесты «открытое поле» и «приподнятый крестообразный лабиринт» в начале эксперимента и по истечении 10-дневного плавания. Для оценки состояния некоторых показателей общего обмена проводили клинический анализ крови с использованием анализатора Mindray BC-2800Vet и клинический анализ мочи на анализаторе CL-50 URINE ANALYZER. Результаты опытов выражали в % к интактной группе. Статическую обработку данных осуществляли путем проверки данных на нормальность распределения с использованием критерия Колмогорова-Смирнова. В случае нормального распределения использовали параметрический t-критерий Стьюдента. При ненормальном распределении дальнейшую статистическую обработку данных проводили с использованием критерия Манна-Уитни.
Результаты исследования и их обсуждение
В группе интактных мышей исходное время плавания составило 311,32 + 17,352 сек. На протяжении всех 10 дней эксперимента продолжительность плавания интактной группы мышей оставалась практически неизменной (рисунок).
Исходное время плавания группы негативного контроля составляло 282,65 + 24,389 сек. Начиная со второго дня продолжительность плавания данной группы животных уменьшалась практически линейно, до значения 151,15 + 16,387 сек, что соответствует 6-му дню плавания с нагрузкой. Таким образом, на 6-й день эксперимента продолжительность плавания мышей группы негативного контроля уменьшилась на 46,5 % относительно исходного значения и на 50,5 % относительно интактной группы. Изменения носили достоверный характер (Р ≤ 0,05). На седьмой день в группе мышей, ежедневно подвергавшихся плаванию с 20 %-й нагрузкой, наблюдалось увеличение работоспособности. Так, время плавания возросло, до 204 + 23,191 сек, что составляет 125,9 % относительно 6-го дня плавания данной группы животных. Однако затем у группы негативного контроля наблюдалось дальнейшее снижение продолжительности принудительного плавания, до 121 + 11,801 сек, т.е. на 40,69 % относительно времени 6-го дня плавания данной группы мышей и на 62,4 % по сравнению с интактной группой (рисунок). На 10-й день в группе негативного контроля продолжительность плавания статистически достоверно (Р ≤ 0,05) снизилась на 48,2 % относительно исходного значения и на 53,4 % по сравнению с интактной группой.
 
Продолжительность плавания интактных животных и группы негативного контроля. Примечание. * – достоверно относительно интактной группы (Р ≤ 0,05)
При оценке психоэмоционального статуса в тесте «открытое поле» у животных, подвергавшихся ежедневным физическим и психоэмоциональным нагрузкам, было установлено статистически достоверное снижение количества пройденных квадратов на 38,93 % и числа стоек на 184,2 % относительно исходного значения (табл. 1).Относительно интактной группы также было установлено статистически достоверное (Р ≤ 0,05) снижение локомоторной и ориентировочно-исследовательской активности на 40,83 % и 257,9 % соответственно. Полученные в тесте «открытое поле» данные свидетельствуют о значительном уменьшении двигательной и исследовательской активности, причем падение поисковой активности преимущественно произошло за счет снижения вертикальной ее составляющей (число стоек), что может свидетельствовать о значительном перенапряжении скелетной мускулатуры [6] и согласуется с результатами теста принудительного плавания.
В тесте «приподнятый крестообразный лабиринт («ПКЛ») у группы негативного контроля произошло снижение количества переходов между рукавами «ПКЛ» на 26,92 % и числа стоек на 25 %, без статистической достоверности относительно исходного значения. В сравнении с интактной группой наблюдалась аналогичная тенденция. Количество переходов достоверно (Р ≤ 0,05) снизилось на 47,37 %, число стоек на 60,78 %, что коррелирует с данными, полученными в тесте «открытое поле» и также может свидетельствовать о снижении поисковой и двигательной активности.
Кроме того, наблюдалось снижение времени пребывания животных, подвергавшихся ежедневным физическим и психоэмоциональным перегрузкам, в открытых рукавах «ПКЛ» более чем в 7 раз (∆ % 614,29 %) и увеличение времени нахождения в центральном квадрате на 270,59 %, по сравнению с исходными показателями. Относительно интактной группы данные показатели изменялись аналогично, так время в открытых рукавах «ПКЛ» снизилось более чем в 5 раз, а продолжительность нахождения в центральном квадрате увеличилась на 88,46 %. Изменения носили достоверный характер. Значительно возросла и продолжительность груминга у группы негативного контроля изменения относительно исходного значения составили 156,41 %, в сравнении с интактной группой время груминга увеличилось на 128,31 % без статистической достоверности (табл. 2).
Приведенные данные позволяют предположить, что перенесенные физические нагрузки способствовали формированию тревожности у животных [3].
Проведенный клинический анализ крови показал, что в группе животных, подвергавшихся длительным физическим нагрузкам наблюдается увеличение количества лейкоцитов на 46,36 % относительно интактной группы мышей, при этом значительно увеличилось содержание моноцитов (61,01 %). Содержание гемоглобина и тромбоцитов незначительно повысилось (табл. 3). Возникшие изменения состава периферической крови у группы негативного контроля, вероятно, связаны с возросшей активностью симпато-адреналовой системы, а также усиленной деятельностью коры надпочечников, что в свою очередь является следствием стресса, во время перенесенных физических и психоэмоциональных нагрузок [2].
Таблица 1
Изменение физического и психоэмоционального статуса животных в тесте «открытое поле»
| 
			 Открытое поле  | 
			
			 Число пройденных квадратов  | 
			
			 Число стоек  | 
			
			 Число заглядываний  | 
			
			 Груминг  | 
			
			 Время в центральном квадрате  | 
		|
| 
			 Исходное значение  | 
			
			 Ср. знач.  | 
			
			 97,75  | 
			
			 10,8  | 
			
			 2,5  | 
			
			 2,55  | 
			
			 2,55  | 
		
| 
			 +/–  | 
			
			 6,231  | 
			
			 1,358  | 
			
			 0,494  | 
			
			 1,225  | 
			
			 1,148  | 
		|
| 
			 После 10 дней плавания  | 
			
			 Ср. знач.  | 
			
			 59,7  | 
			
			 3,8  | 
			
			 2,6  | 
			
			 1,75  | 
			
			 1,6  | 
		
| 
			 +/–  | 
			
			 5,13  | 
			
			 0,863  | 
			
			 0,386  | 
			
			 0,691  | 
			
			 0,892  | 
		|
| 
			 ∆ %  | 
			
			 – 38,93 %δ  | 
			
			 – 184,2 %δ  | 
			
			 4 %  | 
			
			 – 45,71 %  | 
			
			 – 59,38 %  | 
		|
| 
			 Интактная группа  | 
			
			 Ср. знач.  | 
			
			 100,89  | 
			
			 13,6  | 
			
			 2,3  | 
			
			 3,11  | 
			
			 2,9  | 
		
| 
			 +/–  | 
			
			 4,348  | 
			
			 2,541  | 
			
			 0,657  | 
			
			 1,755  | 
			
			 1,523  | 
		|
| 
			 ∆ %  | 
			
			 – 40,83 %*  | 
			
			 – 257,9 %*  | 
			
			 8,7 %  | 
			
			 – 77,71 %  | 
			
			 – 81,25 %  | 
		|
Примечания. * – достоверно относительно интактной группы (Р ≤ 0,05), δ – достоверно относительно исходного значения (Р ≤ 0,05).
Таблица 2
Изменение физического и психоэмоционального статуса животных в тесте «приподнятый крестообразный лабиринт»
| 
			 ПКЛ  | 
			
			 Время в закр. рук.  | 
			
			 Время в центр. квадр.  | 
			
			 Время в откр. рук.  | 
			
			 Стойки  | 
			
			 Груминг  | 
			
			 Число переходов  | 
		|
| 
			 Исходное значение  | 
			
			 Ср. знач.  | 
			
			 100,6  | 
			
			 11,9  | 
			
			 67,5  | 
			
			 3,4  | 
			
			 1,95  | 
			
			 3,9  | 
		
| 
			 +/–  | 
			
			 11,881  | 
			
			 1,633  | 
			
			 11,743  | 
			
			 0,741  | 
			
			 0,977  | 
			
			 0,684  | 
		|
| 
			 После 10 дней плавания  | 
			
			 Ср. знач.  | 
			
			 126,45  | 
			
			 44,1  | 
			
			 9,45  | 
			
			 2,55  | 
			
			 5  | 
			
			 2,85  | 
		
| 
			 +/–  | 
			
			 8,099  | 
			
			 5,894  | 
			
			 3,908  | 
			
			 0,573  | 
			
			 1,988  | 
			
			 0,35  | 
		|
| 
			 ∆ %  | 
			
			 20,44 %  | 
			
			 270,59δ  | 
			
			 – 614,29 %δ  | 
			
			 – 25 %  | 
			
			 156,41 %  | 
			
			 – 26,92 %  | 
		|
| 
			 Интактная группа  | 
			
			 Ср. знач.  | 
			
			 109,3  | 
			
			 23,4  | 
			
			 47,3  | 
			
			 4,1  | 
			
			 2,19  | 
			
			 4,2  | 
		
| 
			 +/–  | 
			
			 13,852  | 
			
			 2,658  | 
			
			 6,337  | 
			
			 0,169  | 
			
			 1,011  | 
			
			 0,844  | 
		|
| 
			 ∆ %  | 
			
			 15,69 %  | 
			
			 88,46 %*  | 
			
			 – 400,53 %*  | 
			
			 – 60,78 %  | 
			
			 128,31 %  | 
			
			 -47,37 %  | 
		|
Примечания. * – достоверно относительно интактной группы (Р ≤ 0,05), δ – достоверно относительно исходного значения (Р ≤ 0,05).
Таблица 3
Изменения состава периферической крови, после перенесенных физических и психоэмоциональных нагрузок
| 
			 Показатель  | 
			
			 WBC* 109/L  | 
			
			 LYM* 109/L  | 
			
			 MON* 109/L  | 
			
			 GRAN* 109/L  | 
			
			 RBC* 1012/L  | 
			
			 HGB, g/L  | 
			
			 PLT* 109/L  | 
		|
| 
			 Негатив. Контроль  | 
			
			 Ср. знач.  | 
			
			 8,352  | 
			
			 3  | 
			
			 0,59  | 
			
			 4,76  | 
			
			 5,799  | 
			
			 108,8  | 
			
			 519,3  | 
		
| 
			 +/–  | 
			
			 0,493  | 
			
			 0,296  | 
			
			 0,106  | 
			
			 0,574  | 
			
			 0,187826  | 
			
			 3,002  | 
			
			 36,775  | 
		|
| 
			 Интакт  | 
			
			 Ср. знач.  | 
			
			 4,48  | 
			
			 1,765*  | 
			
			 0,23*  | 
			
			 2,8*  | 
			
			 5,59  | 
			
			 100,6  | 
			
			 466,75  | 
		
| 
			 +/–  | 
			
			 0,448  | 
			
			 0,342  | 
			
			 0,036  | 
			
			 0,381  | 
			
			 32,825  | 
			
			 2,5602  | 
			
			 25,617  | 
		|
| 
			 ∆ %  | 
			
			 + 46,36 %*  | 
			
			 + 41,76 %*  | 
			
			 + – 61,01 %*  | 
			
			 + 41,17 %*  | 
			
			 – 3,6 %  | 
			
			 + 7,54 %  | 
			
			 + 10,12 %  | 
		|
Примечание. * – достоверно относительно интактной группы (Р ≤ 0,05).
Таблица 4
Изменения состава мочи после перенесенных физических и психоэмоциональных нагрузок
| 
			 Показатель  | 
			
			 Лейкоциты кл/мкмоль  | 
			
			 Кетоны ммоль/л  | 
			
			 Белок г/л  | 
			
			 Глюкоза ммоль/л  | 
			
			 Эритроциты кл/мкл  | 
			
			 рН  | 
		|
| 
			 Опыт  | 
			
			 Ср. знач  | 
			
			 84,25  | 
			
			 0,325  | 
			
			 0,94*  | 
			
			 0  | 
			
			 22,5  | 
			
			 6,475  | 
		
| 
			 +/–  | 
			
			 33,441  | 
			
			 0,083  | 
			
			 0,280  | 
			
			 0  | 
			
			 10,8002  | 
			
			 0,236  | 
		|
| 
			 Интакт  | 
			
			 Ср. знач  | 
			
			 0  | 
			
			 0  | 
			
			 0,025  | 
			
			 0  | 
			
			 0  | 
			
			 6,6  | 
		
| 
			 +/–  | 
			
			 0  | 
			
			 0  | 
			
			 0,0170783  | 
			
			 0  | 
			
			 0  | 
			
			 0,305505  | 
		|
Примечание. * – достоверно относительно интактной группы (Р ≤ 0,05).
При анализе мочи в группе животных, подвергавшихся ежедневному принудительному плаванию, наблюдалась выраженная протеинурия, содержание белка возросло в 37,6 раз относительно значения интактной группы. Обнаружены кетоновые тела в количестве 0,325 + 0,083 ммоль/л. Ввиду изменения состава периферической крови у данных животных наблюдались лейкоцитурия и микрогематурия (табл. 4).
Полученные данные о составе мочи, в частности протеинурия и кетонурия, также свидетельствуют о значительном физическом и эмоциональном перенапряжении организма животных [2].
Выводы
Продолжительность принудительного плавания с 20 %-й нагрузкой от массы тела животного на 10-й день достоверно снизилась на 48,2 % по сравнению с исходными данными и на 53,4 % относительно интактной группы. При оценке психоэмоционального статуса и локомоторной активности в тесте «открытое поле» было выявлено статистически достоверное снижение двигательной и ориентировочно-исследовательской активности на 38,93 % и числа стоек на 184,2 % относительно исходного значения, относительно интактной группы на 40,83 % и 257,9 % соответственно. В тесте «приподнятый крестообразный лабиринт» наблюдалось повышение уровня тревожности, о чем свидетельствует достоверное уменьшение времени пребывания животных в открытых рукавах креста более чем в 7 раз, по сравнению с исходными показателями, и более чем в 5 раз, относительно интакной группы, а также увеличение продолжительности груминга на 156,41 %, относительно исходного значения и в сравнении с интактной группой на 128,31 %. Определенные показатели состава периферической крови и мочи группы негативного контроля показали наличие выраженного лейкоцитоза (содержание лейкоцитов возросло на 46,36 %, относительно интактной группы), а также значительного количества белка (0,94 + 0,025 г/л) и кетоновых тел (0,325 + 0,083 ммоль/л) в моче, что может свидетельствовать о перенесенном физическом и психоэмоциональном перенапряжении. Сопоставляя полученные данные, можно сделать вывод, что новый методический подход к изучению физического и психоэмоцинального перенапряжения на протяжении 10 дней с 20 %-й нагрузкой от массы тела животного является валидным и может применяться в экспериментальной практике.
Рецензенты:
Черников М.В., д.м.н., профессор. заведующий кафедрой биологии и физиологии ГБОУ ВПО «Пятигорского медико-фармацевтического института-филиала Волгоградского государственного медицинского университета», г. Пятигорск;
Погорелый В.Е., д.б.н., профессор кафедры фармакологии с курсом клинической фармакологии ГБОУ ВПО «Пятигорского медико-фармацевтического института-филиала Волгоградского государственного медицинского университета», г. Пятигорск.
Библиографическая ссылка
Воронков А.В., Поздняков Д.И., Воронкова М.П. КОМПЛЕКСНАЯ ВАЛИДАЦИОННАЯ ОЦЕНКА НОВОГО МЕТОДИЧЕСКОГО ПОДХОДА К ИЗУЧЕНИЮ ФИЗИЧЕСКОГО И ПСИХОЭМОЦИОНАЛЬНОГО ПЕРЕНАПРЯЖЕНИЯ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ // Фундаментальные исследования. 2015. № 1-5. С. 915-919;URL: https://fundamental-research.ru/ru/article/view?id=37486 (дата обращения: 04.11.2025).



