Научный журнал

Фундаментальные исследования

ISSN 1812-7339

"Перечень" ВАК

ИФ РИНЦ = 1,798

• Авторы
• Резюме
• Файлы
• Ключевые слова
• Литература

Савенко И.А. 1, Усманский Ю.В. 1, Ивашев М.Н. 1, Сергиенко А.В. 1, Лысенко Т.А. 1, Куянцева А.М. 1, Арльт А.В. 1, Зацепина Е.Е. 1, Саркисян К.Х. 1, Ефремова М.П. 1, Шемонаева М.В. 1

---

1 ГБОУ ВПО «Пятигорская ГФА» Минздравсоцразвития России, Пятигорск

1. Арльт А.В. Влияние предуктала и триметазидина на мозговой кровоток / А.В. Арльт, А.М. Салман, М.Н. Ивашев // Фармация. – 2007. – №2. – С. 32–34. 2. Моделирование патологических состояний кожи у крыс и мышей / Д.А. Бондаренко [и др.] // Цитокины и воспаление. – 2010. – Т.9, № 4. – С. 28–31. 3. Демченко И.Т. Непрерывная количественная регистрация локального мозгового кровотока с помощью водородного клиренса и ЭПГ / И.Т. Демченко, С.В. Буров // Физиол. журн. СССР. – 1971. – Т. 57, №10. – С. 1553–1555. 4. Исследование роли нейро-гуморальных систем в патогенезе экспериментальной хронической сердечной недостаточности / С.Ф. Дугин, Е.А. Городецкая, М.Н. Ивашев, А.Н. Крутиков // Информационный бюллетень РФФИ. – 1994. – Т.2. – №4. – С. 292. 5. Макарова Н.В. Статистика в Excel / Н.В. Макарова, В.Я. Трофимец. – М.: Финансы и статистика, 2002. – 368 с. 6. Молчанов А.А. Изучение скорости мозгового кровотока при алкогольной интоксикации / А.А.Молчанов, А.В. Арльт, М.Н. Ивашев // Фармация. – 2009. – №4. – С. 50–52. 7. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / под ред. Р.У. Хабриева. – М., 2005. – 458 c. 8. Сергиенко А.В. Протективный эффект когитума при экспериментальной гастропатологии / А.В. Сергиенко, И.А. Савенко // Клинич. фармакология и терапия. – 2010. – Т. 19, № 6. – С. 83–85. 9. Фармакологическое исследование влияния когитума на моделированную патологию желудка крыс / И.А.Савенко [и др.] // Биомедицина. – 2010. – № 5. – С. 123–125. 10. Russell, W.M.S. The Principles of Human Experimental Technique / W.M.S. Russell, R.L. Burch. – London: UK: Methuen, 1959. – 238 p.

Статья в формате PDF

301 KB

наркоз

тилетамин

золазепам

экспериментальная фармакология

животные

1. Арльт А.В. Влияние предуктала и триметазидина на мозговой кровоток / А.В. Арльт, А.М. Салман, М.Н. Ивашев // Фармация. – 2007. – №2. – С. 32–34.

2. Моделирование патологических состояний кожи у крыс и мышей / Д.А. Бондаренко [и др.] // Цитокины и воспаление. – 2010. – Т.9, № 4. – С. 28–31.

3. Демченко И.Т. Непрерывная количественная регистрация локального мозгового кровотока с помощью водородного клиренса и ЭПГ / И.Т. Демченко, С.В. Буров // Физиол. журн. СССР. – 1971. – Т. 57, №10. – С. 1553–1555.

4. Исследование роли нейро-гуморальных систем в патогенезе экспериментальной хронической сердечной недостаточности / С.Ф. Дугин, Е.А. Городецкая, М.Н. Ивашев, А.Н. Крутиков // Информационный бюллетень РФФИ. – 1994. – Т.2. – №4. – С. 292.

5. Макарова Н.В. Статистика в Excel / Н.В. Макарова, В.Я. Трофимец. – М.: Финансы и статистика, 2002. – 368 с.

6. Молчанов А.А. Изучение скорости мозгового кровотока при алкогольной интоксикации / А.А.Молчанов,

А.В. Арльт, М.Н. Ивашев // Фармация. – 2009. – №4. – С. 50–52.

7. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / под ред. Р.У. Хабриева. – М., 2005. – 458 c.

8. Сергиенко А.В. Протективный эффект когитума при экспериментальной гастропатологии / А.В. Сергиенко, И.А. Савенко // Клинич. фармакология и терапия. – 2010. – Т. 19, № 6. – С. 83–85.

9. Фармакологическое исследование влияния когитума на моделированную патологию желудка крыс / И.А.Савенко [и др.] // Биомедицина. – 2010. – № 5. – С. 123–125.

10. Russell, W.M.S. The Principles of Human Experimental Technique / W.M.S. Russell, R.L. Burch. – London: UK: Methuen, 1959. – 238 p.

Под общей анестезией или наркозом понимают обратимое угнетение центральной нервной системы, сопровождающееся комплексом клинических признаков: отсутствием сознания; чувствительности (в первую очередь болевой); значительным подавлением рефлекторных реакций в организме и снижением тонуса скелетных мышц.

При постановке экспериментов и проведении оперативных вмешательств важной задачей является выбор оптимального наркозного средства, отвечающего всем необходимым требованиям. Наркозные средства, применяемые в экспериментальной практике, могут изменять показатели деятельности не только центральной нервной системы, но и сердечно-сосудистой системы, желудочно-кишечного тракта, нарушать выработку гормонов в организме животных [4]. Необходимо также отметить, что используемый общий анестетик должен быть разрешен к использованию на территории Российской Федерации и не должен оказывать значимого влияния на исследуемые показатели лабораторных животных. В доступных нам литературных источниках не найдена информация о возможности применения препарата золетил в качестве средства для неингаляционного наркоза в экспериментальной фармакологии, при изучении гастропротекторных эффектов препаратов, при измерении объемной скорости мозгового кровотока методом водородного клиренса.

Цель исследования - проведение эксперимента посвящено выявлению возможности применения золетила в качестве наркозного средства при изучении гастропротекторного действия препаратов при моделированной механической гастропатии, при измерении объемной скорости мозгового кровотока методом водородного клиренса, при изучении противовоспалительной и регенеративной активности исследуемых веществ.

Материал и методы исследования

При планировании эксперимента на животных мы руководствовались биоэтическими принципами «трех R» (replacement - замена болезненных для животных экспериментов опытами, не причиняющими страданий; reduction -уменьшение числа опытов с животными; refinement - улучшение методики с целью облегчения страданий подопытных животных). Впервые принципы биоэтики были изложены У. Рассел и Р. Берч в 1959 году в книге «Принципы гуманной экспериментальной техники» [10]. Ими обоснована концепция гуманного использования животных в экспериментах, которая получила название - «RБиоэтическая концепция трех R».

Исследование проводили на 54 белых крысах линии Wistar массой 250 ± 10 г. Экспериментальные животные содержались в стандартных условиях вивария Пятигорской государственной фармацевтической академии: температура окружающего воздуха 22 ± 2°С. Комбинированный корм и воду животные получали ad libitum [7].

При постановке экспериментов в качестве наркозных средств применялись золетил 100 и стандартный, официнальный препарат - хлоралгидрат.

Препарат золетил 100 - представляет собой общий анестетик для неингаляционного наркоза, применяемый в ветеринарной практике. Золетил включает тилетамина гидрохлорид и золазепама гидрохлорид. Тилетамин представляет собой общий анестетик диссоциативного типа действия, обладающего выраженным анальгетическим, но не достаточным миорелаксирующим эффектами. Золазепам, вызывая анксиолитическое и седативное действие, за счет угнетения подкорковых областей мозга потенцирует наркозный и миорелаксирующий эффекты тилетамина, а также уменьшает выраженность болевых реакций после выхода из наркоза. Наркозный эффект достигается через 6-7 минут после однократного внутрибрюшинного введения препарата, в дозе 30 мг/кг. Длительность хирургической стадии наркоза (при условии отсутствия выраженных внешних раздражителей) 2-3 часа.

Для сравнения нами были проведены эксперименты с использованием хлоралгидрата, который классически применяется при проведении оперативных вмешательств, для изучения действия биологически активных веществ. Хлоралгидрат относится к группе снотворных лекарственных средств с наркотическим типом действия, оказывает выраженный снотворный эффект за счет торможения процессов возбуждения в центральной нервной системе. При внутрибрюшинном введении, в дозе 300 мг/кг обладает выраженным, стабильным наркозным действием. Наркозный эффект развивается через 5-10 минут и хирургическая стадия наркоза длится 2-2,5 часа.

В ходе проведенного исследования нами оценивалось влияние исследуемых препаратов на уровень системного артериального давления (САД), частоту сердечных сокращений (ЧСС) и объемную скорость мозгового кровообращения (ОСМК). Объемную скорость мозгового кровотока оценивали с помощью метода водородного клиренса. Данный метод основан на регистрации скорости вымывания предварительно введенного водорода из мозговой ткани и позволяет определить количественно уровень ОСМК. Принципы метода были обоснованы И.Т. Демченко [3]. Положительными сторонами метода являются отсутствие травматичности сосудов мозга, стабильность показателей, индифферентность используемого газа. Результаты оценивались по кривой изменения напряжения водорода на электроде полярографическим способом [1].

САД и ЧСС регистрировали с помощью механического манометра в общей сонной артерии. Учитывая значения САД и ОСМК, рассчитывали величину сопротивления сосудов мозга (ССМ).

В ходе исследования гастропротекторной активности нами оценивалось влияние исследуемых препаратов на вес желудков, вес, площадь и количество участков стенки желудка с поврежденной слизистой при пептической (механической) гастропатии.

При изучении противовоспалительной и ранозаживляющей активности нами оценивалось влияние на обьем грануляционной ткани и скорость регенерации поврежденных тканей соответственно.

Результаты проведенных экспериментов представлены в виде средних арифметических и ошибки среднеквадратичного отклонения. Статистическую обработку полученных результатов производили с использованием t-критерия Стьюдента для независимых рядов. Расчёты результатов проводились в пакете компьютерной программы Microsoft Excel 2000 [5]. Изменения исследуемых показателей считались статистически значимыми при p < 0,05.

Золетил и хлоралгидрат при внутрибрюшинном применении вызывали наступление наркозного действия в течение первых 10 минут.

Хлоралгидрат вызывал недостоверное понижение уровня системного артериального давления на протяжении всего наблюдаемого периода. Максимальное снижение САД регистрировали на 60 минуте эксперимента в среднем на 5,3% (Р < 0,05). На 90 и 120 минутах регистрации САД уровень этого показателя был ниже исходного уровня в среднем на 3,8 и 2,7% соответственно. Уровень ЧСС после внутрибрюшинного применения хлоралгидрата был ниже исходного уровня на 4-6% (изменение показателя недостоверно). Одновременное понижение уровня САД и ЧСС указывает на подавление синокаротидного рефлекса, что свидетельствует о достаточной глубине стадии хирургического наркоза при назначении хлоралгидрата. В наших экспериментах наблюдали только тенденцию к понижению уровня САД и ЧСС при назначении хлоралгидрата.

При изучении эффектов исследуемых соединений синтетического и природного происхождения на систему мозгового кровообращения важно отметить, что большинство наркозных средств существенно угнетают систему ауторегуляции мозгового кровотока. Такой эффект наркозных препаратов может значительно искажать действие потенциально биологически активных веществ. В литературе имеются данные о том, что средства, вызывающие диссоциативный наркоз, меньше всего влияют на систему ауторегуляции мозгового кровотока [6].

По инструкции препарат ветеринарной практики золетил вызывает диссоциативный наркоз и может быть использован как базовое наркозное средство при изучении сосудистых эффектов химических соединений различного происхождения. В наших экспериментах золетил уменьшал САД на протяжении всего периода - 120 минут на 3,2-4,3%. ЧСС после применения золетила повышалась на 5,3-6,4% (изменения показателей недостоверны). Золетил при внутрибрюшинном введении уменьшал САД и увеличивал ЧСС (тенденция изменения показателей). По влиянию на САД и ЧСС наркозного средства золетила можно отметить, что синокаротидный рефлекс сохраняется. Подвергнув стандартной статистической обработки данные по влиянию золетила и хлоралгидрата на показатели ЧСС, установили, что имеются достоверные различия в большинстве точек регистрации показателей у экспериментальных животных. По влиянию на показатели системной гемодинамики у белых крыс золетил имеет преимущество, как базовое наркозное средство перед хлоралгидратом.

По влиянию на ОСМК установили, что хлоралгидрат с 30 минуты эксперимента незначительно снижал объёмную скорость мозгового кровотока до конца исследования в среднем на 10% (изменения недостоверны). В тех же условиях золетил незначительно повышал ОСМК в среднем на 5-7%, к 120 минуте эксперимента ОСМК был выше исходного уровня на 2,3%. Расчетный показатель ССМ, характеризующий сопротивление сосудов головного мозга, достоверно не изменялся на протяжении всего наблюдаемого периода после применения, как золетила, так и хлоралгидрата. Таким образом, золетил и хлоралгидрат на протяжении всего исследования достоверно не влияли на показатели системы мозгового кровообращения.

При лигировании пилорической части дуоденума в группе животных получивших в качестве наркозного средства хлоралгидрат, образование эрозий наблюдалось у 100% животных, масса желудков составляла 950,0 ± 18,9 мг, что на 44,44% (p < 0,05) меньше интактной группы животных. Вес стенки желудка с поврежденной слизистой составил 38,33 ± 2,65 мг. Площадь поврежденной стенки в данной группе 11,5 ± 1,26 мм², а количество эрозий 8,0 ± 1,15 шт. [8,9].

При применении в качестве наркоза золетила, как и в предыдущей серии, образование эрозий наблюдалось в 100% случаев. Масса желудков в данной группе составила 953,1 ± 1,83 мг, что на 44,26% (p < 0,05) и практически не отличается от группы животных, находившейся под хлоралгидратным наркозом. Площадь поврежденной стенки желудка составила 11,7 ± 0,94 мм², количество эрозий 7,9 ± 0,88 шт. Вес стенки желудка с поврежденной слизистой составил 38,12 мг. На количество и кислотность желудочного сока, относительно интактных животных, наркоз, вызванный хлоралгидратом и золетилом влияния не оказал. Различий в выраженности гастропротекторного эффекта при применении лекарственных препаратов не наблюдалось.

В экспериментальных группах животных при нанесении термического ожога на эпилированный участок кожи использовались золетил 100 и хлоралгидрат. При использовании в качестве наркозного средства хлоралгидрата через 7 дней площадь повреждения уменьшилась в среднем на 15,7%, отхождение струпа наблюдалось на 10 сутки, а полное восстановление эпителиальной ткани наблюдалось на 21 сутки эксперимента [2]. У животных при использовании препарата Золетил 100 на 7 сутки площадь ожоговой поверхности уменьшилась в среднем на 15,9%. Полное восстановление эпителия, как и в предыдущей группе, наблюдалось на 21 сутки, а отхождение струпа на 10 сутки. Различий в скорости эпителизации не наблюдалось.

При использовании в качестве наркозного средства хлоралгидрата имплантация под кожу ватного шарика вызывала асептическое воспаление, экссудативный компонент которого составил 83,8 ± 8,2 мг, пролиферативный компонент 37,4 ± 3,8 мг [2]. При использовании в качестве наркозного средства золетила 100 экссудативный компонент асептического воспаления составил 84,2 ± 7,9 мг, пролиферативный компонент 36,8 ± 4,7 мг. Экссудативный компонент в группах отличался на 0,47%, а пролиферативный компонент отличался на 1,6%.

1. Золетил и хлоралгидрат не оказывают существенного влияния в ходе эксперимента на показатели системной гемодинамики.
2. Исследуемые наркозные препараты золетил и хлоралгидрат не оказывают существенного влияния на объемную скорость мозгового кровотока.
3. Исследуемые наркозные препараты золетил и хлоралгидрат не оказывают существенного влияния на состояние слизистой оболочки желудка.
4. Исследуемые наркозные препараты золетил и хлоралгидрат не оказывают существенного влияния на скорость регенерации эпителиальной ткани.
5. Исследуемые наркозные препараты золетил и хлоралгидрат не оказывают существенного влияния на развитие асептического воспалительного процесса.
6. Препарат золетил может быть использован в качестве наркозного средства у крыс, при определении объемной скорости мозгового кровотока методом водородного клиренса.

• Верлан Н.В. д.м.н., профессор, зав. кафедрой клинической фармакологии ГБОУ ВПО «Иркутская медицинская академия последипломного образования», г. Иркутск;
• Пакровский М.В. д.м.н., профессор, зав. кафедрой фармакологии и фармдисциплин ИМПО ФГАОУ ВПО «Белгородский государственный национальный университет», г. Белгород;
• Юшков В.В. д.м.н., профессор кафедры фармакологии, клинической фармакологии ГБОУ ВПО «Пермская государственная фармацевтическая академия» Минздравсоцразвития России, г. Пермь.

Работа поступила в редакцию 23.04.2012

Библиографическая ссылка