Научный журнал
Фундаментальные исследования
ISSN 1812-7339
"Перечень" ВАК
ИФ РИНЦ = 1,441

СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА ГЕПАТОПРОТЕКТОРНОЙ АКТИВНОСТИ ЭКСТРАКТА КУКУРУЗЫ СТОЛБИКОВ С РЫЛЬЦАМИ СУХОГО И ЕГО СМЕСЕЙ С ЭНТЕРОСОРБЕНТАМИ

Дворникова Л.Г. 1 Турецкова В.Ф. 1 Мазко О.Н. 1 Золовкина А.Г. 1 Смирнов И.В. 1 Волобой Н.Л. 1 Щербаков Ю.Н. 1
1 ГБОУ ВПО «Алтайский государственный медицинский университет» Минздравсоцразвития России, Барнаул
Проведена сравнительная оценка гепатопротекторной активности экстракта кукурузы столбиков с рыльцами сухого (100 мг/кг) и его смесей с энтеросорбентами углем активированным и СУМС-1 в соотношении 3:1 (133 мг/кг) на модели острого экспериментального гепатита, вызванного у крыс пероральным введением масляного раствора тетрахлорметана в течение 6 суток. В качестве параметров оценки использовали скрининговые тесты (выживаемость, изменение массы тела, коэффициент массы печени) и биохимические показатели крови, характеризующие функции печени. Экстракт кукурузы столбиков с рыльцами сухой при приеме внутрь в течение 21 дня после формирования модельной патологии ослаблял гепатотоксическое действие тетрахлорметана, увеличив выживаемость, массу тела крыс, снизив коэффициент массы печени и улучшив биохимические показатели крови (уменьшилась гиперферментемия, содержание холестерина, триглицеридов и мочевины), хотя восстановления всех показателей не наблюдалось. Введение комбинации изучаемого экстракта с углем активированным не выявило тенденции к улучшению биохимических показателей крови крыс. Вместе с тем, установлена целесообразность сочетания экстракта кукурузы столбиков с рыльцами сухого с энтеросорбентом СУМС-1, т.к. при этом отмечается усиление гепатопротекторной активности по сравнению с группой животных, получавших экстракт кукурузы столбиков с рыльцами сухой. Данная комбинация может быть положена в основу создания лекарственного препарата для лечения токсического гепатита.
экстракт сухой
кукурузы столбики с рыльцами
уголь активированный
энтеросорбент СУМС-1
гепатопротектор
токсический гепатит
1. Влияние энтеросорбентов на метаболические эффекты гепатопротектора лохеина при экспериментальном токсическом гепатите / А.И. Венгеровский и др. // Вопросы биологической, медицинской и фармацевтической химии. – 2000. –№ 4. – С. 40–43.
2. Влияние энтеросорбентов на метаболические эффекты гепатопротектора максара при экспериментальном токсическом гепатите / А.И. Венгеровский и др. // Химико-фармацевтический журнал. – 2000. – № 5. – С. 9–11.
3. Дворникова Л.Г., Турецкова В.Ф. Установление оптимальных параметров экстрагирования биологически активных веществ из кукурузы столбиков с рыльцами // Актуальные вопросы фармацевтической науки и образования: материалы межрег. научн. конференции с международ. участием, посвящ. 70-летию фарм. факультета СибГМУ. – Томск, 2011. – С. 49–53.
4. Жилин М.С., Дворникова Л.Г., Турецкова В.Ф. Выбор оптимального сорбента для получения комбинированных таблеток с экстрактом кукурузы столбиков с рыльцами сухого // Актуальные проблемы фармакологии и фарма-
ции. – Барнаул, 2011. – Вып. VIII. – C. 59–64.
5. Заболеваемость населения России в 2009 году: стат. матер.: в 3 ч. / Минздравсоцразвития РФ, Департамент развития мед. помощи и курортного дела, ФГУ «ЦНИИ организации и информатизации здравоохранения» Росздрава. – М., 2010. – Ч. 2. – 170 с.
6. Николаева Н.В., Дворникова Л.Г., Турецкова В.Ф. Исследования по стандартизации экстракта кукурузы столбиков с рыльцами сухого // Актуальные проблемы фармакологии и фармации. – Барнаул, 2011. – Вып. VIII. – C. 149–154.
7. Палий И.Г. Роль энтеросорбции в лечении заболеваний печени (обзор литературы) / Consilium medicum Ukraina. – 2009. – № 3. – С. 8–9.
8. Ратькин Е.В. Гепатопротективные свойства полифенольного комплекса клеточной культуры маакии амурской: автореф. дис. ... канд. биол. наук. – Томск, 2010. – 24 с.
9. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / под ред. Р.У. Хабриева. – 2-е изд. – М.: Медицина, 2005. – 832 с.
10. Скакун Н.П., Шманько В.В., Охримович Л.М. Клиническая фармакология гепатопротекторов. – Тернополь: Збруч, 1995. – 272 с.
11. Фенольные соединения кукурузы столбиков с рыльцами как основа создания препарата гепатопротекторного действия / Л.Г. Дворникова и др. // Новые достижения в химии и химической технологии растительного сырья: материалы V Всероссийской конференции с международным участием. – Барнаул, 2012. – С. 260–262.

В последние десятилетия в России, как и во всем мире, наблюдается значительный рост заболеваемости населения болезнями печени и гепатобилиарной системы [5], что является предпосылкой для расширения ассортимента гепатопротекторов – лекарственных средств, способных усиливать регенераторные процессы в печени. В комплексную фармакотерапию заболеваний гепатобилиарной системы достаточно часто включают различные энтеросорбенты, основное действие которых связано с сорбцией эндогенных токсических веществ и продуктов распада гепатоцитов, что позволяет уменьшить нагрузку на печень и улучшить прогноз течения заболевания [10]. Ряд экспериментов доказывает, что последовательное применение гепатопротетора и энтеросорбента позволяет потенцировать их эффект [1, 2], однако отсутствуют данные о возможности совмещения указанных групп веществ в одной лекарственной форме, что связано с вероятной сорбцией активного компонента гепатозащитного средства энтеросорбентом.

На кафедре фармацевтической технологии АГМУ была разработана технология экстракта кукурузы столбиков с рыльцами сухого [3], который может стать основой для создания препарата для лечения заболеваний печени. В эксперименте на крысах указанный экстракт проявил гепатопротекторную активность в дозировке 100 мг/кг, не уступив действию стандартного препарата Легалона [11], что, по-нашему мнению, связано с присутствием в его химическом составе флавоноидов и фенолокислот [6]. В результате проведения технологических и биофармацевтических исследований установлена возможность изготовления комбинированных таблеток экстракта кукурузы столбиков с рыльцами сухого с углем активированным или энтеросорбентом СУМС-1 с высокими показателями теста «Растворение», что свидетельствует об отсутствии или же незначительной сорбции биологически активных веществ экстракта указанными сорбентами [4]. На основании вышеизложенного представляется актуальным фармакологическое подтверждение целесообразности разработки комбинированных таблеток экстракта кукурузы столбиков с рыльцами сухого с энтеросорбентом.

Целью настоящего исследования явилось изучение влияния экстракта кукурузы столбиков с рыльцами сухого и его смесей с энтеросорбентами на течение экспериментального острого токсического гепатита, вызванного у крыс тетрахлорметаном.

Материалы и методы исследования

Объектами исследования являлись экстракт кукурузы столбиков с рыльцами сухой и энтеросорбенты - уголь активированный (УА) и СУМС-1. Экстракт кукурузы столбиков с рыльцами сухой был получен по технологии, разработанной на кафедре фармацевтической технологии АГМУ, и представлял собой сыпучий порошок тёмно-коричневого цвета, специфического запаха, сладковатого вкуса, растворимый в воде и спирте этиловом 60 %. Содержание флавоноидов в экстракте составляло 1,62 ± 0,02 %, фенолокислот – 4,31 ± 0,09 %, потеря в массе при высушивании – 3,44 ± 0,17 % [6]. Уголь активированный (ЗАО «Медисорб») и СУМС-1 (АООТ «Новосибирский завод медицинских препаратов») были выбраны для исследования на основании их способности сорбировать токсичные продукты среднемолекулярной массы, характерные для развития токсического гепатита [7].

Изучение гепатопротекторной активности проводили в зимне-весенний период на 75 крысах линии Wistar обоего пола массой 195–245 граммов, предоставленных Институтом цитологии и генетики СО РАН. Животные находились в стандартных условиях содержания при естественном световом режиме, свободном доступе к воде и пище. Эксперименты осуществлялись в соответствии с «Правилами лабораторной практики в Российской Федерации» (приказ МЗ РФ № 708н от 23.08.2010 г.) и «Руководством по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ» [9]. Экспериментальный острый гепатит вызывали путем внутрижелудочного введения животным 1 мл 25 % масляного раствора тетрахлорметана в течение 6 суток. Экстракт кукурузы столбиков с рыльцами сухой (в дозировке 100 мг/кг) и его смеси с сорбентами в соотношении 3:1 (133 мг/кг) вводили перорально в виде суспензии в 2 % крахмальном клейстере 1 раз в сутки в течение 21 дня после формирования модельной патологии. На 28 день эксперимента крыс под легким эфирным наркозом забивали декапитацией с последующим забором биоматериалов (кровь, печень) для исследований.

Для первичной оценки гепатопротекторной активности использовали скрининговые тесты: определяли выживаемость животных, изменение массы тела и коэффициент массы печени. С целью более углубленного изучения влияния экспериментальных препаратов на течение гепатита оценивали биохимические показатели крови крыс, характеризующие функции печени. Уровни глюкозы, альбумина, общего билирубина, общего холестерина, триглицеридов и мочевины в сыворотке крови животных определяли фотометрически с помощью наборов реактивов фирмы «Вектор-Бест» (г. Новосибирск). Активность ферментов аланинаминотрансферазы (АЛТ), аспартатаминотрансферазы (АСТ), гамма-глутамилтрансферазы (ГГТ) и щелочной фосфатазы (ЩФ) определяли фотометрическим кинетическим методом с использованием наборов фирмы «Human, GmbH» (Германия) [8].

Статистическую обработку результатов проводили с помощью пакета программного обеспечения Statistica 6.1. Данные представлены в виде среднего значения (M) и стандартной ошибки среднего значения (m). Соответствие выборок закону нормального распределения оценивали по критерию Шапиро-Уилка. Для проверки статистических гипотез о различии между исследуемыми группами использовали критерии Манна-Уитни и Стьюдента. Исследуемые показатели контрольной группы оценивали по сравнению с показателями интактных животных; показатели группы, получавшей экстракт кукурузы столбиков с рыльцами сухой, – с контрольными животными; показатели групп, получавших экстракт в смеси с энтеросорбентами, – по сравнению с контрольными животными и животными, получавшими изучаемый экстракт.

Результаты исследования и их обсуждение

Обобщенные данные опытов по определению гепатопротекторной активности изучаемого экстракта и его смесей с сорбентами представлены в таблице.

Развитие токсического гепатита у животных контрольной группы характеризовалось снижением выживаемости до 73,3 % (в интактной группе – 100 %), снижением массы тела в среднем на 30,0 г и увеличением коэффициента массы печени на 19,4 %. Интоксикация тетрахлорметаном сопровождалась гиперферментемией, свидетельствовавшей о разрушении гепатоцитов и развитии холестаза, а также увеличением в сыворотке крови контрольных животных содержания холестерина, триглицеридов, мочевины и билирубина (до 1,74 ± 0,19; 1,73 ± 0,25; 5,15 ± 0,40 и 6,25 ± 0,90 ммоль/л соответственно) и снижением концентрации глюкозы и альбумина по сравнению с интактной группой (на 35 и 32 % соответственно).

Влияние экстракта кукурузы столбиков с рыльцами сухого и его смесей с энтеросорбентами на течение экспериментального острого токсического гепатита

Показатель

Группа наблюдения

Интактная

(n = 15)

Контроль

(n = 11)

Экстракт

(n = 15)

Экстракт + УА (n = 15)

Экстракт + СУМС-1 (n = 15)

Скрининговые тесты

Выживаемость, %

100,0

73,3

100,0

100,0

100,0

Коэффициент массы печени, мг/г

33,50 ± 0,50

40,00 ± 1,051

35,29 ± 1,052

33,78 ± 0,982

32,24 ± 

0,87 2,3

Изменение массы тела, г

+15,0 ± 2,63

–30,0 ± 3,97

+60,0 ± 2,48

+44,0 ± 3,41

+50,0 ± 2,72

Биохимические показатели

АЛТ, Е/л

58,6 ± 3,9

110,4 ± 8,11

78,0 ± 5,42

110,2 ± 6,7

104,2 ± 5,1

АСТ, Е/л

196,6 ± 6,0

312,6 ± 27,91

274,0 ± 11,4

248,9 ± 8,42

274,9 ± 16,7

ЩФ, Е/л

374,0 ± 18,4

645,6 ± 45,81

393,2 ± 27,22

500,0 ± 45,1 2,3

434,9 ± 24,22

ГГТ, Е/л

2,28 ± 0,67

3,36 ± 1,48

2,65 ± 0,64

3,13 ± 0,54

2,65 ± 0,27

Глюкоза, ммоль/л

7,70 ± 0,45

5,00 ± 0,281

4,81 ± 0,69

5,79 ± 0,383

5,96 ± 0,483

Альбумин, г/л

69,5 ± 0,7

47,1 ± 3,61

53,5 ± 1,4

44,9 ± 2,13

49,2 ± 1,5

Билирубин, мкмоль/л

4,03 ± 0,66

6,25 ± 0,90

6,28 ± 1,41

6,82 ± 1,67

5,34 ± 1,19

Холестерин, ммоль/л

1,42 ± 0,10

1,74 ± 0,19

0,55 ± 0,122

1,17 ± 0,13 2,3

0,63 ± 0,122

Триглицериды, ммоль/л

1,60 ± 0,06

1,73 ± 0,25

0,72 ± 0,042

0,64 ± 0,072

0,53 ± 0,05 2,3

Мочевина, ммоль/л

4,66 ± 0,34

5,15 ± 0,40

3,22 ± 0,222

3,08 ± 0,182

2,58 ± 0,24 2,3

Примечание: 1различия статистически значимы по сравнению с интактной группой (р < 0,05); 2 различия статистически значимы по сравнению с контрольной группой (р < 0,05); 3 различия статистически значимы по сравнению с группой, получавшей экстракт кукурузы столбиков с рыльцами сухой (р < 0,05).

Введение экспериментальным животным экстракта кукурузы столбиков с рыльцами сухого привело к ослаблению гепатотоксического действия тетрахлорметана: выживаемость крыс повысилась до 100 %; масса тела животных увеличилась на 60 г; коэффициент массы печени снизился на 12 %. Введение изучаемого экстракта стимулировало нормализацию биохимических показателей крови животных: статистически значимо снизились активность АЛТ, ЩФ, уровни холестерина, триглицеридов и мочевины (на 29, 39, 68, 58 и 37 % соответственно), а также наметилась тенденция к снижению активностей АСТ и ГГТ. На уровни альбумина, билирубина и глюкозы введение указанного препарата практически не повлияло.

Применение экстракта кукурузы столбиков с рыльцами сухого совместно с углем активированным привело к изменению некоторых биохимических показателей. Снизилась активность АСТ на 20 % по сравнению с контрольной группой, однако статистически значимого изменения по сравнению с группой, принимавшей изучаемый экстракт отдельно, не наблюдалось. Кроме того, произошло увеличение активности ЩФ, уровней холестерина и глюкозы в крови животных на 27, 112 и 20 % соответственно по сравнению с аналогичными показателями крыс, получавших экстракт кукурузы столбиков с рыльцами сухой. Следует отметить, что невозможно однозначно интерпретировать вышеуказанные данные. Изменение активности АСТ и уровня глюкозы свидетельствует об улучшении, повышение активности ЩФ и уровня холестерина – о снижении гепатозащитного действия по сравнению с аналогичными показателями животных, получавших экстракт кукурузы столбиков с рыльцами сухой.

Терапия животных с острым гепатитом комбинацией экстракта кукурузы столбиков с рыльцами сухого и энтеросорбента СУМС-1 характеризовалась статистически значимым улучшением показателей скрининговых тестов и биохимических опытов по сравнению с аналогичными показателями как контрольной группы, так и группы животных, получавших изучаемый экстракт отдельно. Коэффициент массы печени снизился до 32,24 ± 0,87 мг/г, что на 9 % меньше значения показателей группы, получавшей экстракт кукурузы столбиков с рыльцами сухой. Частично восстановился уровень глюкозы (на 25 %), снизились уровни триглицеридов и мочевины (на 26 и 20 % соответственно) по сравнению с показателями животных, получавших монотерапию изучаемого экстракта. Кроме того, наблюдалось снижение уровня билирубина на 15 % по сравнению с контролем, что не было отмечено в группе животных, получавших экстракт кукурузы столбиков с рыльцами сухой. Изменения всех указанных показателей, наблюдавшиеся у животных, получавших смесь изучаемого экстракта с энтеросорбентом СУМС-1, свидетельствовали об усилении гепатопротекторных свойств экстракта кукурузы столбиков с рыльцами сухого.

Заключение

Результаты сравнительной оценки гепатопротекторной активности экстракта кукурузы столбиков с рыльцами сухого и его смесей с энтеросорбентами свидетельствуют о рациональности сочетания изучаемого экстракта с энтеросорбентом СУМС-1, т.к. терапевтический эффект данной комбинации при терапии острого токсического гепатита превосходит аналогичный показатель экстракта кукурузы столбиков с рыльцами сухого.


Библиографическая ссылка

Дворникова Л.Г., Турецкова В.Ф., Мазко О.Н., Золовкина А.Г., Смирнов И.В., Волобой Н.Л., Щербаков Ю.Н. СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА ГЕПАТОПРОТЕКТОРНОЙ АКТИВНОСТИ ЭКСТРАКТА КУКУРУЗЫ СТОЛБИКОВ С РЫЛЬЦАМИ СУХОГО И ЕГО СМЕСЕЙ С ЭНТЕРОСОРБЕНТАМИ // Фундаментальные исследования. – 2012. – № 10-2. – С. 393-396;
URL: http://fundamental-research.ru/ru/article/view?id=30656 (дата обращения: 31.10.2020).

Предлагаем вашему вниманию журналы, издающиеся в издательстве «Академия Естествознания»
(Высокий импакт-фактор РИНЦ, тематика журналов охватывает все научные направления)

«Фундаментальные исследования» список ВАК ИФ РИНЦ = 1.074