Научный журнал
Фундаментальные исследования
ISSN 1812-7339
"Перечень" ВАК
ИФ РИНЦ = 1,222

ИЗМЕНЕНИЕ СЕКРЕТОРНО-СИНТЕТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ МОНОЦИТОВ/МАКРОФАГОВ У ЖЕНЩИН ПРИ ПРИМЕНЕНИИ РАЗЛИЧНЫХ СРЕДСТВ КОНТРАЦЕПЦИИ

Рева Г.В. 1, 2 Кольцов И.П. 1, 2 Храмова И.А. 1, 2
1 ГОУ ВПО «Владивостокский государственный медицинский университет», Владивосток
2 ГОУ ВПО «Дальневосточный государственный медицинский университет», Хабаровск
Проведены исследования состояния стабильности лизосомных мембран моноцитов крови и перитонеальных макрофагов, их секреторно-синтетической активности у 49 женщин репродуктивного возраста, применявших различные средства контрацепции в течение 1 года. Выявлено, что на фоне использования внутриматочного контрацептивна (ВМК) наблюдается слабая лабилизация лизосомных мембран моноцитов/макрофагов, незначительное повышение секреции и синтеза лизоцима этими клетками. При приеме комбинированных оральных контрацептивов (КОК) имеет место стабилизация лизосомных мембран макрофагальных клеток со снижением в них секреции и повышением синтеза лизосомного фермента лизоцима.
моноциты
макрофаги
лизоцим
контрацепция
1. Бражник В.А. Влияние двух монофазных оральных контрацептивов, содержащих 30 мкг этинилэстрадиола в комбинации с 2 мг хлормадинона ацетата или 0,15 мг дезогестрела на параметры липидного обмена, гормональные и метаболические показатели // Гинекология. – 2009. – Т. 11, №4. – С. 20.
2. Дикке Г.Б. Стратегическая оценка политики, программ и услуг в сфере непланируемой беременности, абортов и контрацепции в Российской Федерации. Совместное исследование МЗ и СР РФ и ВОЗ // Проблемы репродукции. – 2010. – Т. 16, №3. – С. 92–93.
3. Лапик Т.П., Сулейманова Н.С., Рублева К.И. Оценка функциональной активности фагоцитов цервикальной связи женщин, использовавших внутриматочные контрацептивны // Тезисы докладов I съезда иммунологов России. – Новосибирск, 1992. – С. 269.
4. Мотавкина Н.С., Шаронов А.С., Ковалев Б.М. Микрометоды в иммунологии. – Владивосток: ДВГУ, 1987. – 184 с.
5. Реброва О.Ю. Статистический анализ медицинских данных. Применение прикладных программ «Statistica». – М.: Медиа сфера, 2002. – 305 с.
6. Подзолкова Н.М. Гормональная контрацепция: вопросы безопасности и переносимости // Рус. мед. журнал. – 2009. – Т. 17, №1. – С. 5–10.
7. Сухих Г.Т., Ванько В.Б. Взаимоотношения иммунной и репродуктивной систем человека // Rus. J. Immunol. – 1999. – Vol. 4, № 1. – P. 201–204.
8. Фрейдлин И.С. Клетки иммунной системы: развитие, активация, эффекторные функции // Rus. J. Immunol. – 1999. – Vol. 4, № 1. – P. 9–15.
9. Чередеев А.Н. Количественная и функциональная оценка Т и В систем иммунитета у человека // Общие вопросы патологии. – М.: ВИНИТИ, 1976. – Т. 4. – С. 124–160.
10. Шаронов А.С. Фагоциты, лизосомы, мембраны. – Владивосток: Дальнаука, 2007. – 128 с.
11. Шаронов А.С. Оценка изменений стабильности лизосомных мембран мононуклеарных фагоцитов как метод аллергоиммунодиагностики и скрининга мембранотропных и радиопротективных препаратов: метод. рекомендации МЗ СССР. – М., 1989. – 14 с.

В настоящее время более 100 млн женщин фертильного возраста пользуются различными контрацептивными средствами. Эффективность применения контрацептивов колеблется от 91 до 99 % [2]. При использовании этих средств возможно развитие различных осложнений в виде нарушений менструального цикла, воспалительных заболеваний половых органов, бесплодия, экспульсии внутриматочных средств и других. Они могут быть связаны как с дисфункцией гипоталямо-гипофизарно-яичниковой системы, так и с изменением показателей иммунной системы [1, 3]. Правильно подобранные контрацептивные средства позволят не только избежать нежелательной беременности, осложнений вследствие их применения, но и сохранить репродуктивное здоровье женщины [6].

Мононуклеарные фагоциты, к которым относятся моноциты крови и тканевые макрофаги, присутствуют в различных органах и тканях, в том числе и половой системе женского организма. Они значительным образом определяют развитие и характер воспаления, вовлекаются в регенеративные процессы, в иммуногенез путем процессинга антигенов и презентациии ангигенной детерминанты лимфоцитам [8, 9].

Участие мононуклеарных фагоцитов в том или ином биологическом процессе сопровождается изменением их функциональной активности. В частности, при активации моноцитов/макрофагов в них происходит усиление секреторно-синтетических процессов, повышение выхода лизосомных ферментов из клеток. При этом секреция лизосомных ферментов сопряжена с состоянием стабильности лизосомных мембран: при лабилизации лизосомных мембран происходит повышение выхода ферментов из клеток, при стабилизации - снижение [10].

Цель работы: изучить влияние различных контрацептивов на состояние стабильности лизосомных мембран моноцитов крови и перитонеальных макрофагов и секреторно-синтетическую активность этих клеток для предупреждения возможных осложнений.

Материал и методы исследования

Исследованы моноциты крови и перитонеальные макрофаги у 49 клинически здоровых женщин 25-30 лет (средний возраст 25 ± 3,2 года), применявших различные средства контрацепции в течение 1 года. Первую группу составили женщины, предохраняющиеся от беременности с использованием презервативов (17 человек), вторую - ВМК (14 человек), третью - низкодозированных КОК (содержание этинилэстрадиола 30 мкг). Женщины, использующие презервативы, условно были приняты за контрольную группу. Обследуемые пациентки наблюдались в поликлинике ГУЗ «Приморский краевой диагностический центр» г. Владивостока. На все исследования было получено информированное согласие.

Выделение моноцитов крови проводилось на градиенте плотности фиколл-верографина центрифугированием крови в течение 30 минут при 400 G с последующим отсасыванием микропипеткой кольца градиента [9]. Клетки прикреплялись к поверхности стекла в течение 60 мин при температуре 37 °С.

Перитонеальные макрофаги получали из суспензии, взятой методом пункций заднего влагалищного свода, так же выделяли прикреплением клеток к поверхности стекла.

Концентрацию клеток считали в камере Горяева и доводили стерильным физиологическим раствором до 6∙106 кл/мл. Определение стабильности лизосомных мембран моноцитов крови и перитонеальных макрофагов с расчетом показателя стабильности (ПСЛМ) проводили методом культивирования выделенных клеток в среде 199 с добавлением 0,5 % стерильного L-глутамина и 2,5 % смешанной человеческой сыворотки, прогретой в течение 30 мин при 56 °С в течение 12-15 часов при 37 °С. Микрометодом [4] проводили определение секретированного лизоцима (Lсекр), а после 4-6-кратного замораживания-оттаивания культивируемых клеток - общего лизоцима (Lобщ = L секретированный плюс L внутриклеточный). На основании полученных результатов секретированного и общего лизоцима высчитывали ПСЛМ по формуле: ПСЛМ = Lсекр/Lобщ∙100 %. Повышение ПСЛМ выше оптимального значения (53-58 %) расценивалось как лабилизация лизосомных мембран, снижение этого показателя - как стабилизация мембран. По результатам оценки разницы Lобщ после и до культивирования определяли количество синтезированного лизоцима (Lсинт) [10].

Проведенные ранее нами исследования выявили выраженные колебания ПСЛМ в зависимости от фазы менструального цикла. Наблюдался подъем показателя стабильности лизосомных мембран в день предполагаемой овуляции с последующим снижением до оптимального значения (53-58 %) на 19-21 день менструального цикла. Поэтому женщины обследовались во вторую фазу менструального цикла.

Статистическую обработку результатов исследования проводили с использованием пакета программ «Statistica 6» с применением стандартных методов вариационной статистики и критерия Манна-Уитни для оценки статистически значимых различий. Различие считалось достоверным при р < 0,05 [5].

Результаты исследований и их обсуждение

В результате проведенных исследований выявлено, что состояние стабильности лизосомных мембран моноцитов крови и перитонеальных макрофагов, их секреторно-синтетическая активность имеют различия у женщин, использующих разные средства контрацепции.

Таблица 1

Показатель стабильности лизосомных мембран моноцитов крови и перитонеальных макрофагов у женщин, применяющих различные виды контрацептивов

Группы сравнения

n

ПСЛМ в % моноцитов

(M ± m)

ПСЛМ в % макрофагов

(M ± m)

Женщины, применяющие презервативы - p¹

17

53,8 ± 1,4

59,6 ± 1,3

Женщины, применяющие ВМК -p²

14

54,2 ± 1,6

p1-p2*

60,3 ± 1,7

p1-p2*

Женщины, применяющие КОК - p³

18

47,8 ± 1,5

p1-p3**

p2-p3**

53,5 ± 1,4

p1-p3**

p2-p3**

Примечание (достоверность различий между сравниваемыми группами)

* - p > 0,05;

** - p < 0,01.

Как видно из полученных данных, показатель стабильности лизосомных мембран моноцитов/макрофагов у женщин, использующих в качестве контрацептивного средства ВМК, несколько увеличивается по сравнению с женщинами, применявшими презервативы (р > 0,05), что говорит о наметившейся тенденции к лабилизации лизосомных мембран этих клеток. Напротив, у женщин, регулярно применяющих КОК, наступает выраженная стабилизация лизосомных мембран моноцитов крови и перитонеальных макрофагов (p < 0,01 по сравнению с результатами двух других групп женщин).

Таблица 2

Уровень секреции лизоцима моноцитами крови и перитонеальными макрофагами у женщин, применяющих различные виды контрацептивов

Группы
сравнения

n

Lсекр, мкг/мл

моноцитов

(M ± m)

Lсекр, мкг/мл

макрофагов

(M ± m)

Женщины, применяющие презервативы - p¹

17

0,7 ± 0,06

0,86 ± 0,07

Женщины, применяющие ВМК - p²

14

0,65 ± 0,03

p1-p2*

0,9 ± 0,06

p1-p2*

Женщины, применяющие
КОК - p³

18

0,5 ± 0,04

p1-p3**

p2-p3**

0,6 ± 0,06

p1-p3**

p2-p3**

Примечание (достоверность различия между сравниваемыми группами)

* - p > 0,05;

** - p < 0,01.

Одновременно с незначительной лабилизацией лизосомных мембран моноцитов крови и перитонеальных макрофагов у женщин, использующих ВМК, наблюдается невыраженное повышение секреторной активности этих клеток (p > 0,05). У женщин, регулярно применяющих КОК, стабилизация лизосомных мембран моноцитов/макрофагов ведет к заметному снижению в них секреторной активности (p < 0,01 по сравнению с результатами двух других групп женщин).

При этом синтетическая активность моноцитов крови и перитонеальных макрофагов у женщин, применявших КОК, повышена по сравнению с женщинами, отдающими предпочтение презервативам (p < 0,01). Использование ВМК ведет лишь к незначительному возрастанию синтеза лизоцима изучаемых клеток (p > 0,05).

Таблица 3

Уровень синтеза лизоцима (Lсинт) моноцитами крови и перитонеальными макрофагами у женщин, применяющих различные виды контрацептивов

Группы сравнения

n

Lсинт, мкг/мл, моноцитов

(M ± m)

Lсинт, мкг/, макрофагов

(M ± m)

Женщины, применяющие презервативы - p¹

17

0,4 ± 0,03

0,7 ± 0,04

Женщины, применяющие ВМК - p²

14

0,45 ± 0,05

p1-p2*

0,78 ± 0,04

p1-p2*

Женщины, применяющие КОК - p³

18

0,54 ± 0,04

p1-p3**

p2-p3**

0,86 ± 0,03

p1-p3**

p2-p3**

Примечание (достоверность различия между сравниваемыми группами)

* - p > 0,05; ** - p < 0,01.

Таким образом, состояние стабильности лизосомных мембран моноцитов крови и перитонеальных макрофагов, их секреторно-синтетическая активность различается у женщин, использующих различные средства контрацепции. Применение ВМК в течение одного года ведет к незначительной лабилизации лизосомных мембран моноцитов/макофагов, повышению в них секреции и синтеза лизоцима. На фоне приема КОК наступает выраженная стабилизация лизосомных мембран этих клеток со снижением в них секреции и увеличением синтеза лизосомного фермента ‒ лизоцима. По-видимому, выраженные изменения секреторно-синтетической активности моноцитов крови и перитонеальных макрофагов при использовании КОК связаны с превалирующим эффектом прогестерона, обладающим стабилизирующим действием на лизосомные мембраны этих клеток [12]. Влияние гармонов, входящих в состав КОК, на клетки макрофагальной системы могут происходить непосредственно через имеющиеся на плазматической мембране этих клеток рецепторы к гормонам или опосредованно, путем сдвига количественных гормональных соотношений [8]. Наступающие изменения состояния стабильности лизосомных мембран макрофагальных клеток, их секреторно-синтетической активности при приеме различных видов контрацептивов должны быть невыраженными и иметь обратимый характер. Своевременная диагностика клеточных нарушений позволит определить рекомендуемый вид контрацепции для женщин и сроки его использования.

Рецензенты:

Антонюк М.В., д.м.н., профессор, зав. лабораторией восстановительного лечения НИИ медицинской климатологии и восстановительного лечения СО РАМН, г. Владивосток;

Гельцер Б.И., д.м.н., профессор, главный врач ГБУЗ «Краевой клинический центр специализированной медицинской помощи», г. Владивосток.

Работа поступила в редакцию 08.08.2011.


Библиографическая ссылка

Рева Г.В., Рева Г.В., Кольцов И.П., Кольцов И.П., Храмова И.А., Храмова И.А. ИЗМЕНЕНИЕ СЕКРЕТОРНО-СИНТЕТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ МОНОЦИТОВ/МАКРОФАГОВ У ЖЕНЩИН ПРИ ПРИМЕНЕНИИ РАЗЛИЧНЫХ СРЕДСТВ КОНТРАЦЕПЦИИ // Фундаментальные исследования. – 2011. – № 10-2. – С. 367-369;
URL: http://fundamental-research.ru/ru/article/view?id=28820 (дата обращения: 25.04.2019).

Предлагаем вашему вниманию журналы, издающиеся в издательстве «Академия Естествознания»
(Высокий импакт-фактор РИНЦ, тематика журналов охватывает все научные направления)

«Фундаментальные исследования» список ВАК ИФ РИНЦ = 1.252