Увеличение радиационного фона в связи с техногенным влиянием на окружающую среду и все более увеличивающимся использованием источников ионизирующего излучения во многих отраслях промышленности, сельского хозяйства, медицины побуждает к активным поискам широко доступных средств, способствующих устранению последствий действия ионизирующей радиации на живой организм (злокачественные новообразования, наследственные дефекты, сокращение продолжительности жизни) [1].
В последнее время значительно расширились подходы к фармакологической противолучевой защите. Существующие в настоящее время классификации противолучевых средств свидетельствуют о появлении радиозащитных препаратов, применение которых дает позитивный эффект, как при хроническом низкомощностном облучении, так и при облучении в больших дозах радиации [2]. Одним из процессов, лежащих в основе противолучевого действия радиопротекторов, является повышение устойчивости и мобильности защитных сил организма. При воздействии ионизирующего излучения инициируется и значительно ускоряется перекисное окисление органических компонентов живой системы, развивающееся по свободно радикальному механизму. Показатели окислительного метаболизма рассматриваются как биохимические детерминанты радиорезистентности [3]. В процессе поглощения энергии ионизирующего излучения происходит резкая активация ПОЛ биомембран, быстро приводящая к изменению активности мембраносвязанных ферментов с последующей лабилизацией мембран. Разработка средств защиты и коррекции радиационных повреждений детоксикационных систем может представить определенный интерес в плане снижения тяжести лучевой патологии продуктов.
Цель исследования – изучить степень влияния иммунокорректоров и иммуномодуляторов на процессы перекисного окисления липидов, вызванные воздействием ионизирующей радиации в отдаленном периоде.
Материалы и методы исследования
В качестве корригирующих препаратов нами были использованы имунофан и реаферон. Фармакологическое действие пептидного иммуноксидредуктанта – имунофана основано на достижении коррекции иммунной и окислительно-антиокислительной системы организма. В клинической практике имунофан используется для лечения онкологических больных в схеме радикального комбинированного лечения [4]. Препараты интерферон альфа-2а (роферон-А, реаферон) содержат высокоочищенный рекомбинантный протеин, аналогичный человеческому лейкоцитарному интерферону альфа-2а. Основные его биологические эффекты – противовирусная, противоопухолевая и иммуномодулирующая активность. В связи с этим нами проведено экспериментальное исследование влияния реаферона и иммунофана на обменные процессы в селезенке, печени крыс при ионизирующем поражении организма. Для решения поставленной цели были выполнены 4 серии опытов на 60 белых крысах половозрелого возраста: 1 серия – интактные (n = 15), 2 серия – облученные в дозе 6 Гр (группа сравнения n = 15), 3 серия – облученные (6 Гр) + иммунофан (n = 15), 4 серия – облученные 6 Гр + реаферон (15). Животные 3 серии получали имунофан из расчета 0,0715 мкг/100 г массы тела в течение 10 дней после облучения. Животные 4 группы получали реаферон из расчета 0,004285 МЕ/100 г массы тела путем внутрибрюшинной инъекции. Биохимические показатели определялись во всех указанных группах, проведена соответствующая статистическая обработка цифрового материала.
Подопытным животным назначались: Реаферон по 0,004285 млн МЕ на 200 г веса каждому животному путем внутрибрюшинной инъекции в течение 10 дней, в срок после облучения – 30 и 90 дней. Имунофан по 0,143 мкг на 200 г веса каждому животному путем внутрибрюшинной инъекции в течение 10 дней, в срок после облучения – 30 и 90 [5, 6] дней.
Результаты исследования
и их обсуждение
При применении реаферона и имунофана у облученных животных были зарегистрированы умеренные изменения показателей липопероксидации в тканях селезенки, причем только через месяц после действия однократной дозы внешнего гамма-излучения 6 Гр. Тенденция к снижению содержания ДК, при применении реаферона относительно уровня группы сравнения составила 8,0 %, при использовании имунофана различия достигали 22,0 % и были достоверными (p < 0,05).
В отношении содержания в гомогенатах тканей селезенки МДА различия были более значительными и при применении реаферона составляли 12,8 %, имунофана – 25,1 % (p < 0,05). Разница в уровне активированной продукции ДК и МДА в группах была несущественной. Через 3 месяца (табл. 1) на фоне практически полной нормализации всех показателей содержания продуктов ПОЛ в тканях селезенки прослеживались лишь минимальные различия между группами – при применении препаратов их концентрации были на 4–3 % ниже, чем в группе сравнения (p > 0,05 во всех случаях).Таким образом, через 1 месяц содержание первичных и вторичных продуктов перекисного окисления липидов оставалось высоким, как и в контрольной группе, особенно их неактивированные формы под действием реаферона и имунофана. Более высокое содержание первичных и вторичных продуктов наблюдалось в группе, где использовался реаферон. В отдаленном периоде в группе сравнения практически отсутствовали достоверные различия с группой контроля, но имевшееся некоторое недостоверное превышение показателей ПОЛ было приближено к контрольным величинам под действием реаферона и имунофана. В табл. 2 представлены данные, характеризующие влияние реаферона и имунофана на состояние процессов липопероксидации в тканях печени облученных животных. При анализе содержания продуктов ПОЛ в гомогенатах тканей печени при применении реаферона и имунофана достоверные различия с группой сравнения (облучение 6 Гр без коррекции) были выявлены только по одному показателю, а именно, содержание ДК было ниже на 31,3 % в группе имунофана через 1 месяц после облучения (p < 0,01). При применении реаферона в этот же срок было зарегистрировано только недостоверное снижение показателя на 12,1 % (p > 0,05). Различия по содержанию в тканях МДА достигали соответственно 13,7 и 9,7 %, по активированной продукции – были еще меньшими. Через 3 месяца не было выявлено даже четких тенденций исследованных показателей при применении средств иммунокоррекции по отношению к группе облученных животных. Таким образом, применение средств иммунокоррекции в тканях печени через 1 месяц после облучения позволило изменить показатели ПОЛ в сторону уменьшения относительно группы сравнения, особенно здесь проявилось действие имунофана, однако в обеих группах коррекции сохранялись различия с группой интактных. Через три месяца после облучения достоверные различия между группами отсутствовали, но применение имунофана позволило максимально приблизить результаты к контрольным.
Таблица 1
Влияние реаферона и имунофана на показатели липопероксидации в селезенке у животных, подвергнутых облучению в дозе 6 Гр
|
Показатель |
Интактные животные |
Через 3 месяца |
||
|
Облучение 6 Гр |
Облучение |
Облучение |
||
|
ДК, усл. ед. |
0,21 ± 0,02 |
0,25 ± 0,02 |
0,24 ± 0,02 |
0,22 ± 0,01 |
|
Дк(а), усл. ед. |
0,45 ± 0,03 |
0,53 ± 0,04 |
0,51 ± 0,03 |
0,50 ± 0,03 |
|
МДА, нмоль на 1 мг ОЛ |
1,18 ± 0,11 |
1,34 ± 0,10 |
1,25 ± 0,09 |
1,16 ± 0,08 |
|
МДА(а), нмоль на 1 мг ОЛ |
1,76 ± 0,15 |
1,91 ± 0,14 |
1,69 ± 0,12 |
1,61 ± 0,11 |
Примечания:
* – различия с показателем интактных животных достоверны, p < 0,05, *** – p < 0,01;
# – различия с показателем облученных животных без коррекции достоверны, p < 0,05.
Таблица 2
Влияние реаферона и имунофана на показатели липопероксидации
в печени у животных, подвергнутых облучению в дозе 6 Гр
|
Показатель |
Интактные |
Через 3 месяца |
||
|
Облучение 6 Гр |
Облучение |
Облучение |
||
|
ДК, усл.ед. |
0,36 ± 0,03 |
0,34 ± 0,03 |
0,32 ± 0,02 |
0,34 ± 0,03 |
|
Дк(а), усл.ед. |
0,55 ± 0,04 |
0,56 ± 0,04 |
0,49 ± 0,03 |
0,53 ± 0,04 |
|
МДА, нмоль на 1 мг ОЛ |
1,44 ± 0,13 |
1,23 ± 0,09 |
1,26 ± 0,10 |
1,29 ± 0,08 |
|
МДА(а), нмоль на 1 мг ОЛ |
2,02 ± 0,17 |
1,98 ± 0,15 |
2,05 ± 0,17 |
2,00 ± 0,14 |
Примечания:
* – различия с показателем интактных животных достоверны, p < 0,05, ** – p < 0,01, *** – p < 0,01;
## – различия с показателем облученных животных без коррекции достоверны, p < 0,01.
Выводы и заключение
Резюмируя вышеизложенный материал, следует отметить, что применение реаферона и имунофана в качестве корректоров ПОЛ при облучении в острой дозе показало незначительное снижение уровня первичных продуктов липопероксидации в селезенке, печени крыс через один месяц после облучения. Что касается вторичных продуктов ПОЛ в этот срок, то в селезенке различия были более значительными в сторону уменьшения, особенно при применении иммунофана, в печени гораздо менее значительными. Разница в активированной продукции для обоих органов незначительная.
Через три месяца не было выявлено четких различий показателей липопероксидации при применении коррегирующих средств в печени, в селезенке на фоне полной нормализации к трем месяцам наблюдалось некоторое снижение показателей при применении препаратов.
Рецензенты:Тапбергенов С.О., д.м.н., профессор, заведующий кафедрой биохимии и химических дисциплин, Государственный медицинский университет, г. Семей;
Мынжанов М.Р., д.б.н., профессор, зав. кафедрой молекулярной биологии и микробиологии, Государственный медицинский университет, г. Семей.