Scientific journal
Fundamental research
ISSN 1812-7339
"Перечень" ВАК
ИФ РИНЦ = 1,674

COMPARATIVE RESEARCH OF ENTEROPROTECTIVE ACTION OF DEANOL ACEGLUMATE AND ETOXYDOL AGAINST THE BACKGROUND OF INTRODUCTION OF INDOMETACIN AND DICLOFENAC

Zorkin M.V. 1 Atkarskaja O.A. 1 Zorkina A.V. 1
1 FSBGI HPE “Mordovian Ogarev state university”
Search of methods of effective prophylaxis of the enteropathy associated with introduction of nonsteroid antiinflammatory drugs, is an actual problem of pharmacology. Comparative research of enteroprotective action of etoxydol (3-oxypyridine derivative) and deanol aceglumate (glutamine acid derivative) is conducted. Two models of ulcer lesion are used: model №1 – intragastric introduction of indometacin during 10 days, corrective preparations were injected preventively intragastric in the probe method during the same period; model №2 – intramuscular introduction of diclofenac during two days, corrective preparations were injected preventively intramusculary during 5 days. It is shown that in the conditions of the 1st model deanol aceglumate and etoxydol at their intragastric introduction have similar enteroproteсtive effect, reducing quantity of ulcers in a small bowel by 85 % and 80 %, the area – for 66 % and 73 %. Total number of perforated ulcers decreased by 95 % and 93 %, the area – for 94 % and 92 % respectively. In a colon deanol aceglumate reduced quantity of ulcers by 54 % and area for 69 %, and etoxydol – only area for 66 %. In the conditions of model №2 etoxydol showed more expressed enteroprotective action, reducing quantity and the area of ulcers in a small bowel by 60 % and 92 %. In group of comparison indicators decreased by 48 % and 83 % respectively. In a colon etoxydol more reduced the area of ulcers (for 74 % in comparison with 46 %). Preventive intramuscular introduction of etoxydol allowed to prevent completely development of intestinal bleeding and perforated ulcers.
nonsteroidal anti-inflammatory drug-enteropathy
enteroprotective action
etoxydol
deanol aceglumate.
1. Zorkin М.V., Atkarskaja O.A. Journal of Computer- Sovremennueproblemunaookiiobrazovanija, 2014, no.3; available at: http://www.science-education.ru/117-13153 (20.05.2014).
2. Patent RF №2435575, 10.11.2011.
3. Chernehovskaja N.E. Endoskopicheskayadiagnostikazabo-levaniypischevoda, zheludka i tonkoykishki [Endoscopic diagnostics of diseases of a gullet, stomach and small intestine]. Moscow, MEDpress-inform, 2006. 91p.
4. Adebayo D, Bjarnason I. Postgrad Med J. 2006. №82. Р.186-191 [PMID: 16517800 DOI: 10.1136/pgmj. 2005.039586]
5. Davies N.M. J Pharm Pharm Sci 1999. №2. Р.5-14 [PMID: 10951657]
6 Lanas A, Scarpignato C. Microbial flora in NSAID-induced intestinal damage: a role for antibiotics? Digestion 2006. №73. Suppl 1. Р. 136-150 [PMID: 16498262 DOI: 10.1159/ 000089789]
7. McCarthy D.M. Gastrointest Endosc 2009. №70. Р.225-228 [PMID: 19631801 DOI: 10.1016/j.gie.2008.12.247]
8. Park S.C. World J Gastroenterol 2011. №17. P.4647-4653 [PMID: 22180706 DOI: 10.3748/wjg.v17.i42.4647]
9. Wallace J.L. World J Gastroenterol. 2013. March 28; 19(12): 1861-1876. http://www.wjgnet.com/1007-9327/pdf/v19/i12/1861.pdf
10. Wallace JL. Br J Pharmacol 2012. №165. Р.67-74 [PMID: 21627632 DOI: 10.1111/j.1476-5381.2011.01509.x]
11. Wallace JL. Gastroenterology 1997. №112. Р.1000-1016 [PMID: 9041264 DOI: 10.1053/gast.1997.v112.pm 9041264]
12. Wallace JL. Physiol Rev 2008. №88. Р.1547-1565 [PMID: 18923189 DOI: 10.1152/physrev.00004.2008]

Энтеропатия, индуцированная введением нестероидных противовоспалительных средств (НПВС-энтеропатия), встречается чаще, чем НПВС-гастропатия, хотя диагностика ее затруднительна [4,7]. Серьезные осложнения НПВС-индуциро-ванной энтеропатии могут включать массивное кровотечение, перфорацию и стриктуры, иногда приводящие к смерти [4,5,8]. Кроме того, в настоящее время нет разработанных методов лечения НПВС – индуцированной энтеропатии с обоснованной эффективностью [9,10]. Доказано, что ингибиторы протонной помпы уменьшают тяжесть повреждения и кровотечения в желудке и двенадцатиперстной кишке, где важна роль соляной кислоты в процессе язвообразования [11,12]. Однако отсутствуют доказательства о снижении тяжести НПВС-индуцированной энтеропатии под влиянием каких-либо антисекреторных препаратов [6]. В связи с вышеуказанными данными особенно актуальным является изучение энтеропротеторного эффекта у отечественных препаратов антиоксидантного действия [1,2].

Целью работы явилось сравнение энтеропротекторного эффекта отечественных лекарственных препаратов антиокисдантного действия – деанола ацеглумата и этоксидола – в условиях моделирования язвенного поражения желудочно-кишечного тракта введением индометацина и диклофенака.

Материалы и методы исследования

В работе исследовалось энтеропротекторное действие этоксидола (2-этил-6-метил-3-гидроксипири-дина гидроксибутандиоат), созданного на базе Всероссийского научного центра по безопасности биологически активных веществ (ВНЦ БАВ) (Старая Купавна, Россия) (директор Н.М.Митрохин) под руководством заведующей отделом химии и технологии лекарственных средств, лауреата Государственной премии РФ, доктора химических наук, профессора С.Я. Скачиловой. В качестве препарата сравнения выбран деанола ацеглумата (N-ацетил-L-глютамат 2 (диметиламино) этанола) с доказанным ранее энтеропротекторным действием в условиях индукции эрозивно-язвенного поражения желудочно-кишечного тракта нестероидными противовоспалительными препаратами [2], также созданный на базе ВНЦ БАВ.

Экспериментальные исследования выполнены на 60 белых нелинейных крысах-самцах весом 220-280гр., содержащихся в стандартных условиях вивария Медицинского института ФГБОУ ВПО «МГУ им. Н.П.Огарева», в соответствии со статьей 11 Хельсинской декларации Всемирной медицинской ассоциации (1964г.), «Международными рекомендациями по проведению медико-биологических исследований с использованием животных» (1985г.) и «Правилами лабораторной практики в Российской Федерации» (приказ МЗ и СР РФ № 708н от 23.08.2010 г.).

В первом разделе экспериментов в качестве модели язвообразования использовали 5-дневное введение индометацина в дозе 10 мг/кг внутрижелудочно зондовым способом после двух часов без пищи и воды. Контрольную группу составили 10 животных. Летальность в контрольной группе составила 20%. Животным опытной группы (п=8) в течение 5 суток эксперимента вводили внутрижелудочно зондовым способом этоксидол в дозе 25 мг/кг один раз в день. Животным группы сравнения (п=8) вводили деанола ацеглумат в условно изотоксической дозе 250 мг/кг через 30 минут после введения индометацина. Оценку результатов проводили на 11 сутки эксперимента. В опытных группах летальность отсутствовала.

Во втором разделе экспериментов животным опытной группы вводили этоксидол в дозе 25 мг/кг внутримышечно в течение 5 суток (п=12), животным группы сравнения вводили внутримышечно деанола ацеглумат в дозе 250 мг/кг в течение 5 суток. Язвенное поражение желудочно-кишечного тракта воспроизводили путем внутримышечного введения диклофенака в дозе 50 мг/кг на 5 и 6 сутки эксперимента. Животные контрольной группы (п=12) не получали какой-либо профилактической фармакологической коррекции. Оценка результатов проводилась на 7 сутки эксперимента.

Все манипуляции с причинением боли проводились под общим обезболиванием в виде внутрибрюшинного введения тиопентала натрия в дозе 50 мг/кг. Выведение животных из опыта осуществлялось после исчезновения роговичного рефлекса гильотинным способом. Кишечник вскрывался на всем протяжении. Визуально оценивалось язвенное поражение слизистой оболочки тонкой и толстой кишки по методике Н.Е. Чернеховской с соавт., (2006) [3]. Проводили оценку количества язв, общей площади язвенного поражения, рассчитывали количество и площадь язв на 1 см длины тонкой кишки, оценивали количество и площадь язв с гемосидерином, количество и площадь прободных язв. Сравнивали долю животных с признаками кровотечения, долю животных с наличием прободных язв, летальность животных в группах.

Полученные данные обрабатывались методами вариационной статистики с использованием программ StatPlus 2009 Professional. Вычисляли среднее арифметическое (М) и среднюю квадратическую ошибку (m), представляя данные в виде M±m. Для оценки значимости различий двух выборок применяли параметрический (t-критерий Стьюдента) и непараметрические (χ2, Фишера) критерии. Различия считались достоверными при уровне значимости р<0,05.

Результаты и их обсуждение

Введение индометацина привело к выраженному язвообразованию в слизистой оболочке тонкой и толстой кишки. У всех животных контрольной группы регистрировались прободные язвы, признаки кровотечения из язв тонкой и толстой кишки. На фоне введения индометацина наблюдалась гибель 20 % животных.

В серии сравнения введение деанола ацеглумата в изученной дозе привело к сокращению количества язв в тонкой кишке на 85 % (с 1,55±0,142 до 0,234±0,150 язв/см, р<0,05). При этом площадь язвенного поражения тонкой кишки сократилась на 66 % (с 1,788±0,208 мм2/см до 0,599±0,056 мм2/см, р<0,05).

В серии с применением деанола ацеглумата не регистрировалось язв с гемосидерином (χ2=3,961, р=0,047, по критерюй Фишера р=0,022). Доля животных с прободными язвами уменьшилась со 100% до 57 % (р>0,05). Количество прободных язв сократилось на 95 % (с 25,75±2,48 до 1,286±0,567, р<0,001) на 1 животное, а площадь – на 94 % (с 54,11±5,18 до 3,31±1,21 мм2, р<0,001). В толстой кишке введение деанола ацеглумата уменьшило количество язв на 54 % (с 22,5±1,35 до 10,38±1,59, р<0,05), а их площадь – на 69,4 % (со 157,89±18,91 до 48,28±4,88 мм2, р<0,01).

Этоксидол при внутрижелудочном введении в дозе 25 мг/кг также оказал выраженное энтеропротекторное действие. Препарат уменьшал количество язв в тонкой кишке на 80 % (до 0,315±0,065 язв/см, р<0,001). Площадь язвенного поражения тонкой кишки сокращалась на 73 % (до 0,479±0,116 мм2/см, р<0,001). У всех животных опытной группы предотвращалось развитие кровотечения (χ2=3,961, р=0,047, по критерию Фишера р=0,022).

5265.jpg

5257.jpg

Рис. 1. Влияние деанола ацеглумата (250 мг/кг) и этоксидола (25 мг/кг) при внутрижелудочном введении зондовым способом на процессы язвообразования в тонкой кишке, индуцированные введением индометацина 10 мг/кг (в % к данным контроля); * – достоверность различия р<0,05 по отношению к данным контрольной группы

5249.jpg

Рис. 2. Влияние деанола ацеглумата (250 мг/кг) и этоксидола (25 мг/кг) при внутрижелудочном введении зондовым способом на процессы язвообразования в толстой кишке, индуцированные введением индометацина 10 мг/кг (в % к данным контроля); * – достоверность различия р<0,05 по отношению к данным контрольной группы, # – к данным группы сравнения

Количество прободных язв уменьшилось на 93,2 % (до 1,75±1,08, р<0,05), площадь – на 92,2 % (р<0,01). Доля животных с прободными язвами уменьшилась до 50 % (χ2=0,246, р=0,620). В толстой кишке введение этоксидола не повлияло на количество язв (24,75±5,93, р>0,05), но площадь язвенного поражения уменьшилась на 66 % (54,04±11,38 мм2, р<0,05).

Во втором разделе экспериментов в контрольной группе на фоне введения диклофенака летальность животных составила 25 %. Процессы язвообразования в кишечнике, признаки кровотечения и развитие прободных язв наблюдалось у всех животных контрольной серии. Количество язв составило на 1 см длины тонкой кишки – 1,357±0,136 язв/см. Площадь язвенного поражения достигла 7,307±1,386 мм2/см. Кол-во прободных язв составило 8,25±0,881 в среднем на 1 животное в группе, по площади – 22,91±3,06 мм2. Количество язв с гемосидерином составило 40±6,84. Их площадь достигла 71 % от общей площади язвенного поражения (318,8±95,53 мм2). В толстой кишке количество язв достигало 29,25±2,23 на 1 животное, площадь их составила 320,19±26,69 мм2. У 5 из 8 животных наблюдались признаки кровотечения из язв толстой кишки.

В группе сравнения на фоне внутримышечного введения деанола ацеглумата количество язв в тонкой кишке уменьшалось на 48 % (до 0,704±0,086 язв/см, р<0,05). Площадь язв в тонкой кишке также сокращалась на 83 % (до 1,220±0,123 мм2/см, р<0,001). У 3 животных из 12 наблюдалось образование прободных язв, однако их среднее количество уменьшилось на 97% (р<0,001), а площадь – на 96 % (р<0,001). У 10 из 12 животных в группе регистрировались признаки кровотечения. По сравнению с контрольной серией количество язв с гемосидерином в тонкой кишке уменьшилось на 73 % (р<0,05), а площадь – на 91 % (р<0,001). В толстой кишке количество язв на фоне предварительного введения деанола ацеглумата не снижалось, но площадь уменьшалась на 46 % (до 171,56±8,59 мм2, р<0,05). Количество язв с тромбом также сократилось на 32 % (с 19,00±2,31 до 13,00± 2,59), а их площадь – на 68 % ( с 292,0±27,9 мм2 до 93,63±19,96 мм2).

5241.jpg

Рис. 3. Влияние деанола ацеглумата (250 мг/кг) и этоксидола (25 мг/кг) при внутримышечном введении на процессы язвообразования в тонкой кишке, индуцированные введением диклофенака 50 мг/кг в/м (в % к данным контроля); ДА – деанола ацеглумат; Э – этоксидол; * – достоверность различия р<0,05 по отношению к данным контрольной группы

5232.jpg

Рис. 4. Влияние деанола ацеглумата (250 мг/кг) и этоксидола (25 мг/кг) при внутримышечном введении на процессы язвообразования в толстой кишке, индуцированные введением диклофенака 50 мг/кг в/м (в % к данным контроля); ДА – деанола ацеглумат; Э – этоксидол; * – достоверность различия р<0,05 по отношению к данным контрольной группы

В опытной группе на фоне предварительного внутримышечного введения этоксидола в дозе 25мг/кг наблюдалось снижение общего количества язв в тонкой кишке на 60 % (до 0,537±0,125 язв/см, р<0,05) и площади язвенного поражения – на 92 % (до 0,577±0,142 мм2/см, р<0,001). В толстой кишке у животных опытной группы количество язв составило 92 % от показателя контроля, площадь язвенного поражения уменьшалась на 74 % (р<0,001). У всех животных полностью предотвращалось развитие кишечных кровотечений и прободных язв (r=6,129, р=0,013 по χ2, по критерию Фишера р=0,008).

Заключение

Таким образом, полученные результаты подтверждают достоверное энтеропротекторное действие деанола ацеглумата и этоксидола в условиях введения нестероидных противовоспалительных препаратов. Причем, при внутрижелудочном введении на модели индометацинового повреждения желудочно-кишечного тракта у изученных препаратов наблюдается одинаковый противоязвенный эффект в тонкой кишке, но в толстой кишке деанола ацеглумат оказывает более выраженное противоязвенное действие. При профилактическом внутримышечном введении препаратов в изученных дозах во 2-й модели энтеропротекторный эффект этоксидола более выражен, чем у деанола ацеглумата. Так, площадь язвенного поражения в тонкой кишке в группе животных, получавших этоксидол в/м, на 53% меньше. Кроме того, в отличие от серии с в/м введением деанола ацеглумата, полностью предотвращается развитие кровотечения и прободных язв.

Рецензенты:

Инчина В.И., д.м.н., профессор, заведующий кафедрой фармакологии Медицинского института ФГБОУ ВПО «Мордовский государственный университет имени Н.П. Огарева», г. Саранск;

Лещанкина Н.Ю., д.м.н., профессор, заведующий кафедрой госпитальной терапии Медицинского института ФГБОУ ВПО «Мордовский государственный университет имени Н.П.Огарева», г. Саранск.

Работа поступила в редакцию 24.06.2014.