Материалы и методы исследования
Обследовано 108 больных ГЛПС, из них с легкой формой - 24, среднетяжелой - 58, тяжелой - 26. Исследования проводили в доолигоурическом, олигоанурическом и полиурическом периодах.
Основываясь на положении, что эритроцитарные мембраны косвенно отражают структурно-функциональные характеристики биомембранного пула организма, так как значительная часть структурных плазматических и внутренних мембран представлена фосфолипидами, определялись общие фосфолипиды (ОФЛ) и их фракции: лизофосфатидилхолин (ЛФХ), сфингомиелин (СМ), фосфатидилхолин (ФХ), фосфатидилсерин (ФС), фосфатидилэтаноламин (ФЭА), фосфатиднуюкислоту (ФК). Анализ активности свободно радикального окисления был произведен методом регистрации сверхслабого свечения в эритроцитарных мембранах на хемилюминометре ХЛМ 1 ц - 01 [6, 7].
Мезенхимальная активность оценивалась по уровню гликопротеидов крови, в частности, по их углеводным компонентам: гексозе, фукозе, сиаловой кислоте. Определялась концентрация общих и белко- восвязанных гексоз по методу D. Handel и W. Kitlak [8, 10], общей и белковосвязанной фукозы по методу Z. Dishce и L. Shettles [8, 9], концентрация сиаловых кислот в крови - методом E. Hess [9].
В качестве контроля обследованы 25 здоровых лиц.
Результаты исследования и их обсуждение
Согласно полученным результатам (табл. 1, 2) у больных с легкой формой ГЛПС на всем протяжении острого периода не выявлено изменений в содержании ОФЛ и их фракций.
Анализ состояния структурных липидов плазмы крови при среднетяжелой форме ГЛПС показал увеличение содержания ОЛ, ОФЛ, ЛФХ, ФЭА, структура липидов эритроцитарных мембран изменилась в результате повышения уровня ЛФХ, СМ, ФЭА, ФК. При тяжелой форме болезни сдвиги структурных компонентов мембран эритроцитов носили более выраженный характер по сравнению с легкой формой. Отмечалось увеличение содержания ЛФХ, СМ, ФК, ОФЛ с одновременным снижением содержания ФХ и ФС. Происходила конформационная перестройка фосфолипидного спектра со снижением процентного содержания легкоокисляемых фракций и увеличением содержания трудноокисляемых фракций в мембранах эритроцитов. Перестройка структурных липидов являлась результатом активации начальных этапов обмена глицерофосфолипидов, в биомембранах накапливался реактогенный ЛФХ, активация фосфолипаз усиливала катаболизм глицерофосфолипидов. Конформационные сдвиги указывали на возможность развития апоптоза или некроза клеток.
В то же время в неспецифическом острофазовом ответе организма в условиях интоксикационного синдрома принимает участие большая группа гликопротеидов, содержащая в своей структуре углеводные компоненты (гексозу, фукозу, сиаловую кислоту), являющиеся маркерами гликопротеидного обмена [1, 2]. Приведенные результаты (табл. 3) наглядно демонстрируют увеличение концентрации в крови углеводных компонентов ГП прямо пропорционально тяжести инфекционного процесса.
Показатели липидов крови у больных ГЛПС в разгаре болезни
Таблица 1
|
Показатели липидов |
Группы обследованных M ± m |
|||
|
контроль (n = 25) |
легкая форма (n = 24) |
среднетяжелая форма (n = 58) |
тяжелая форма (n = 26) |
|
|
ОЛ (г/л) |
5,81 ± 0,31 |
5,81 ± 0,30 p > 0,1 |
7,47 ± 0,18 p < 0,001 pi < 0,001 |
7,98 ± 0,26 p < 0,001 pi < 0,001 p2 > 0,1 |
|
ОФЛ (моль/л) |
2,55 ± 0,15 |
2,30 ± 0,11 p > 0,1 |
3,44 ± 0,20 p < 0,001 pi < 0,001 |
2,84 ± 0,22 p > 0,2 pi < 0,02 p2 < 0,02 |
|
ЛФХ ( %) |
3,99 ± 0,22 |
3,90 ± 0,20 p > 0,5 |
5,31 ± 0,24 p < 0,001 p, < 0,001 |
5,64 ± 0,23 p < 0,001 p, < 0,001 p2 > 0,2 |
|
ФХ ( %) |
26,56 ± 0,69 |
26,64 ± 0,55 p > 0,5 |
26,14 ± 0,38 p > 0,2 pi > 0,2 |
21,11 ± 0,35 p < 0,001 pi < 0,001 p2 < 0,001 |
|
СМ ( %) |
20,56 ± 0,52 |
20,29 ± 0,45 p > 0,5 |
18,45 ± 0,47 p < 0,001 pi < 0,001 |
17,41 ± 0,42 p < 0,001 pi < 0,001 p2 > 0,5 |
|
ФС ( %) |
13,86 ± 0,50 |
14,12 ± 0,54 p > 0,5 |
13,26 ± 0,42 p > 0,2 p, > 0,2 |
15,63 ± 0,49 p < 0,01 p, < 0,02 p2 < 0,001 |
|
ФЭА ( %) |
23,07 ± 0,87 |
24,35 ± 0,64 p > 0,2 |
26,43 ± 0,86 p < 0,001 p, > 0,05 |
29,35 ± 0,49 p < 0,001 pi < 0,001 p2 < 0,001 |
|
ФК ( %) |
5,18 ± 0,66 |
4,97 ± 0,39 p > 0,5 |
5,11 ± 0,22 p > 0,5 pi > 0,5 |
4,41 ± 0,15 p > 0,2 pi > 0,1 p2 < 0,001 |
|
ФИ ( %) |
6,18 ± 0,34 |
5,07 ± 0,28 p < 0,001 |
5,25 ± 0,22 p < 0,02 pi > 0,5 |
6,43 ± 0,88 p > 0,5 p > 0,1 p2 > 0,1 |
Примечания:
p - показатель достоверности при сравнении с данными контроля;
p1 - показатель достоверности при сравнении с результатами при легкой форме;
p2 - показатель достоверности при сравнении с результатами при среднетяжелой форме
Таблица 2
Показатели липидов эритроцитарных мембран у больных ГЛПС в разгаре болезни
|
Показатели липидов |
Группы обследованных M ± m |
|||
|
контроль n = 25 |
легкая форма n = 24 |
среднетяжелая форма n = 58 |
тяжелая форма n = 26 |
|
|
ОФЛ (моль/л) |
3,40 ± 0,14 |
3,44 ± 0,11 p > 0,5 |
3,00 ± 0,17 p > 0,05 pi < 0,02 |
3,21 ± 0,13 p > 0,2 pi > 0,02 p2 > 0,2 |
|
ЛФХ ( %) |
0,61 ± 0,06 |
0,58 ± 0,03 p > 0,5 |
0,68 ± 0,03 p > 0,2 p < 0,01 |
0,95 ± 0,05 p < 0,001 pi < 0,001 p2 < 0,001 |
|
ФХ ( %) |
29,08 ± 0,61 |
28,77 ± 0,63 p > 0,5 |
27,71 ± 0,33 p < 0,02 p > 0,1 |
25,55 ± 0,43 p < 0,001 pi < 0,001 p2 < 0,001 |
|
СМ ( %) |
25,56 ± 0,62 |
24,94 ± 0,45 p > 0,5 |
28,50 ± 0,32 p < 0,001 pi < 0,001 |
32,45 ± 0,48 p < 0,001 pi < 0,001 p2 < 0,001 |
|
ФС ( %) |
14,67 ± 0,46 |
13,92 ± 0,42 p > 0,2 |
14,43 ± 0,31 p > 0,2 p > 0,2 |
12,60 ± 0,26 p < 0,001 pi < 0,001 p2 < 0,001 |
|
ФЭА ( %) |
25,31 ± 0,83 |
24,88 ± 0,55 p > 0,5 |
25,74 ± 0,31 p > 0,5 p > 0,1 |
25,20 ± 0,19 p > 0,5 pi > 0,5 p2 > 0,5 |
|
ФК ( %) |
1,79 ± 0,12 |
1,78 ± 0,06 p > 0,5 |
2,73 ± 0,15 p < 0,001 p < 0,001 |
3,10 ± 0,19 p < 0,001 p < 0,001 p2 < 0,1 |
Примечания:
p - показатель достоверности при сравнении с данными контроля;
Pj - показатель достоверности при сравнении с результатами при легкой форме;
p2 - показатель достоверности при сравнении с результатами при среднетяжелой форме.
Таблица 3.
Динамика показателей уровня углеводных маркеров гликопротеидов в крови у больных ГЛПС
|
Показатели |
Контроль (M ± m) (n = 25) |
Концентрация у больных ГЛПС |
||
|
легкая форма (n = 24) |
среднетяжелая форма (n = 58) |
тяжелая форма (n = 26) |
||
|
Гексозы, г/л |
1,213 ± 0,022 p < 0,05 |
1,712 ± 0,09 p < 0,001 |
2,415 ± 0,101 p < 0,001 |
2,81 ± 0,11 p < 0,001 |
|
Фукоза, г/л |
0,0763 ± 0,0023 p < 0,05 |
0,0905 ± 0,02 p < 0,001 |
0,115 ± 0,018 p < 0,001 |
0,167 ± 0,021 p < 0,001 |
|
Сиаловые кислоты, ммоль/л |
0,84 ± 0,01 p < 0,05 |
0,97 ± 0,014 p < 0,05 |
1,099 ± 0,02 p < 0,05 |
1,36 ± 0,022 p < 0,05 |
|
Примечание . p - показатель достоверности по сравнению с данными контроля. |
Повышение уровня гексоз и фукоз в крови объясняется развитием в почках воспалительно-деструктивного процесса с одновременной клеточной пролиферацией, нарушением фильтрационной способности почек, активацией ПОЛ и структурных элементов соединительной ткани. Увеличение уровня сиаловых кислот в крови указывает на расщепление гликопротеидов в организме больных ГЛПС в результате инфекционных и некробиотических процессов, приводящих к нарушению тканевого метаболизма. Под воздействием патогенных факторов, в том числе тканевых сиалидаз и разрушающихся клеток, сиаловые кислоты легко отщепляются от гликопротеидов и в результате появляются в сыворотке крови в большом количестве, что подтверждает наличие очага воспаления. Поскольку гликопротеиды продуцируются клетками мезенхимы, образуют структурные элементы соединительной ткани и определяют устойчивость соединительно-тканных структур к протеолитическим ферментам, то увеличение уровня фукоз, гексоз и сиаловых кислот свидетельствует о нарушении целостности клеточных структур, повышении биохимической активности мезенхимальной ткани органа-мишени и активации структур соединительной ткани. Происходящие процессы способствуют образованию фиброзных изменений в местах локализации участков некроза, что подтверждается патоморфологическими исследованиями.
Выводы
- В остром периоде ГЛПС выявлены сдвиги структурных фосфолипидов и повышение уровня углеводных компонентов ГП, зависящих от формы тяжести заболевания.
- Изменение концентрации в крови фосфолипидов и ГП связано с активацией интоксикационного синдрома и воспалительно-деструктивных процессов.
- Наличие структурно-функциональных сдвигов и увеличение уровня углеводных компонентов ГП имеет прогностическое значение в определении формы тяжести заболевания.
Рецензенты:
- Ляпина Е.П., д.м.н., доцент кафедры инфекционных болезней ГОУ ВПО «Саратовский государственный медицинский университет имени В. И Разумовского» Минздравсоцразвития РФ, г. Саратов;
- Моррисон В.В., д.м.н., профессор, зав. кафедрой патологической физиологии ГОУ ВПО «Саратовский государственный медицинский университет имени В.И Разумовского» Минздравсоцразвития РФ, г. Саратов.
Работа поступила в редакцию 25.06.2011.